RBL-2H3 Cellen - Betekenis van RBL-2H3 in Allergische Reactie en Immunologische Studies
De RBL-2H3 cellijn is een van ratten afgeleide basofiele leukemiecellijn die gebruikt wordt in immunologisch onderzoek. Ze dient als modelsysteem voor het bestuderen van de fysiologie, het gedrag en de functies van mestcellen. Deze cellen worden ook gebruikt om allergische reacties, immunologische processen en het testen en ontwikkelen van medicijnen te bestuderen.
Dit artikel geeft inzicht in de oorsprong van RBL-2H3, algemene eigenschappen, kweekvereisten en onderzoekstoepassingen.
RBL-2H3 cellen: Oorsprong en algemene eigenschappen
Voordat u een basofielencellijn in uw onderzoek gebruikt, moet u de oorsprong en algemene eigenschappen ervan kennen. Dit gedeelte van het artikel zal je informeren over de basisprincipes van RBL-2H3 cellen. Zoals, wat zijn de RBL-2H3 mestcellen? Waarom RBL-2H3 cellen gebruiken? Wat zijn RBL-2H3 cellen in rat basofiele leukemie? Wat is de morfologie van RBL-2H3? Zijn RBL-2H3 cellen onsterfelijk?
- RBL-2H3 zijn basofiele leukemiecellen die in 1978 zijn afgeleid van Wistar rat basofielcellen in het National Institute of Dental Research Laboratory of Immunology.
- RBL-2H3 cellen bezitten c-kit receptor tyrosine kinase en mastcelprotease II (RMCP-II) receptoren, waardoor ze een potentieel mastmodel zijn. Daarom worden ze vaak mestcellen genoemd, ondanks hun oorsprong uit rattenbasofielen [1].
- Bij activering geven ze histamine en andere mediatoren af en brengen ze IgE-receptoren met hoge affiniteit tot expressie.
- RBL-2H3 cellen vertonen een fibroblast-achtige morfologie.
RBL-2H3 Cellen: Informatie over het kweken
In dit onderdeel leer je enkele belangrijke aspecten voor het kweken van de RBL-2H3 cellijn. Je zult het volgende weten: Wat is de RBL-2H3 celverdubbelingstijd? Wat is de RBL-2H3 celdichtheid? Wat is het RBL-2H3 celkweekprotocol? Wat is de RBL-2H3 invriesmedia voor cellijnen?
Belangrijkste punten voor het kweken van RBL-2H3 cellen
|
Populatieverdubbelingstijd: |
De RBL-2H3 mestcelverdubbelingstijd is ongeveer 50-60 uur. |
|
Adherent of in suspensie: |
RBL-2H3 is een adherente cellijn. |
|
Subcultiveringsverhouding: |
Voor RBL-2H3-cellen wordt de splitratio tussen 1:2 en 1:4 gehouden. Adherente cellen worden gewassen met magnesium- en calciumvrije 1 x PBS-oplossing. Passaging-oplossing Accutase wordt toegevoegd en de cellen worden gedurende 10 minuten bij omgevingstemperatuur gehouden om los te komen van de bodem van het kweekvat. Verse media wordt toegevoegd en de cellen worden gecentrifugeerd. Geoogste cellen worden voorzichtig geresuspendeerd in vers medium en in nieuwe kolven met groeimedium gegoten. |
|
Groeimedium: |
EMEM media met 10% FBS, 2 mM L-Glutamine, 2,2 g/L NaHCO3 en EBSS zout wordt gebruikt om de RBL-2H3 cellen te kweken. Het medium moet 2 tot 3 keer per week worden vervangen. |
|
Groeicondities: |
RBL-2H3-cellen worden gekweekt in een vochtige incubator die is ingesteld op een temperatuur van 37 °C en is aangesloten op een 5%CO2-bron. |
|
Opslag: |
De cellen worden opgeslagen in de dampfase van vloeibare stikstof of bij een temperatuur van minder dan -150 °C in een elektrische vriezer om de levensvatbaarheid van de cel op lange termijn te beschermen. |
|
Invriesproces en -medium: |
CM-1 of CM-ACF invriesmedium wordt gebruikt om RBL-2H3 cellen langzaam in te vriezen. Deze methode maakt kort gezegd een temperatuurdaling van 1 °C per minuut mogelijk en beschermt de cellen tegen schokken. |
|
Ontdooien Proces: |
RBL-2H3 cellen worden ontdooid in een vooraf ingesteld waterbad (37 °C) gedurende ongeveer 60 seconden. Daarna worden de cellen toegevoegd aan vers kweekmedium en gecentrifugeerd. Deze stap is essentieel om bestanddelen van het bevriezingsmedium te verwijderen. Vervolgens wordt de celpellet geresuspendeerd in een groeimedium en worden de cellen in een kolf gedoseerd om gekweekt te worden. |
|
Bioveiligheidsniveau: |
De RBL-2H3 cellen moeten worden bewaard in bioveiligheid 1-laboratoria. |
Voordelen en beperkingen van de RBL-2H3 Basofielencellijn
RBL-2H3 cellen worden vaak gebruikt in immunologisch onderzoek. In dit gedeelte worden hun belangrijkste voordelen en beperkingen beschreven.
Voordelen
- Gemakkelijk te kweken: RBL-2H3 cellen kunnen gemakkelijk gekweekt en onderhouden worden in een laboratoriumomgeving. Dit vergemakkelijkt kosteneffectieve en reproduceerbare experimenten, waardoor ze een populaire keuze zijn voor de eerste studies in de immunologie.
Beperkingen
- Niet-menselijke oorsprong: RBL-2H3 cellen zijn afkomstig van rattenbasofielen en bootsen menselijke biologische processen mogelijk niet nauwkeurig na, wat hun toepasbaarheid in mens-specifieke onderzoeken kan beperken. Dit maakt een voorzichtige interpretatie van gegevens noodzakelijk bij het extrapoleren van resultaten naar humane systemen.
- Vereenvoudigd mestcelmodel: Hoewel deze cellen een basismodel bieden voor het bestuderen van mastcelfuncties, vertegenwoordigen ze niet volledig de complexe aard van mastcelinteracties binnen het menselijke immuunsysteem. Bijgevolg kunnen ze de veelzijdige rollen van mestcellen in immuunreacties of ziektecondities in vivo niet adequaat modelleren.
RBL-2H3 cellijn: Een hoeksteen in immunologisch onderzoek
Basofielen- en mestcelonderzoek met behulp van de RBL-2H3 cellijn
De RBL-2H3 cellijn, afkomstig van Rattus norvegicus, dient als een belangrijk model voor het bestuderen van de biologie van basofielen en mestcellen. Deze mestcellen van ratten bieden essentiële inzichten in de afgifte van mestcelmediatoren, wat essentieel is voor het begrijpen van allergische aandoeningen zoals allergische rhinitis. Via deze cellen onderzoeken onderzoekers de dynamiek van celreceptoren en de vorming van immunologische synapsen, die centraal staan in de reactie van het immuunsysteem op allergenen.Een interessante studie gepubliceerd in 2019 gebruikte de RBL-2H3 cellijn en onderzocht mechanismen achter pseudo-allergische reacties geproduceerd door Qingkailing injectie. De studie ontdekte dat de PI3K-RAC1 signaleringscascade deze allergische reactie gedeeltelijk uitlokt in de cellen [2]
Immunologische synapsdynamica in allergieonderzoek
RBL-2H3 cellen worden veel gebruikt in immunologisch onderzoek en zijn bijzonder effectief voor het onderzoeken van immunologische synapsdynamica. Dit helpt bij het ophelderen van de communicatieprocessen van het immuunsysteem, met toepassingen in het bestuderen van zowel perifeer bloed als peritoneale mestcellen. Dergelijk onderzoek is van vitaal belang voor een uitgebreid begrip van de immuunrespons in zowel systemische als lokale contexten
Screening van geneesmiddelen en toxiciteitstesten
Bij het screenen en testen van geneesmiddelen wordt de responsiviteit van RBL-cellen op verschillende stimuli benut, waaronder de studie van de manier waarop H2O2 IgE-gemedieerde reacties remt. Deze cellen spelen een essentiële rol bij de ontwikkeling van behandelingen voor ziekten zoals streptokokkeninfecties, waarbij de mitisgroep streptokokken mastcelactivatie remt. Daarnaast evalueren onderzoekers de toxische effecten van verschillende stoffen, waaronder chemicaliën, geneesmiddelen en nanodeeltjes, met behulp van dit RBL 2H3 mc-model. Zo werd in een recent onderzoek (2022) de cytotoxiciteit van polystyreen microplastics op RBL-2H3 cellen beoordeeld. Ze ontdekten dat microplastics RBL-2H3 celorganellen beschadigen en celdood bevorderen [3]. Een andere studie uit 2021 evalueerde het anti-allergische en anti-inflammatoire potentieel van een natuurproduct, neferine, met behulp van het RBL-2H3 mc-model. De studie onthulde de goede anti-allergische en anti-inflammatoire eigenschappen van de verbinding [4]
Geavanceerde methodologieën in immunologische metingen
De consistente en meetbare afgifte van mediatoren uit RBL-2H3 cellen maakt ze ideaal voor gemakkelijke fluorimetrie, waardoor nauwkeurige metingen mogelijk zijn die cruciaal zijn voor het bestuderen van ziekten en het beoordelen van therapeutische middelen.
De RBL-2H3 cellijn, afkomstig van Rattus norvegicus, is van onschatbare waarde voor zowel fundamenteel als toegepast onderzoek op het gebied van immunologie. Het biedt enorme mogelijkheden voor het bevorderen van onze kennis en behandeling van immunologische ziekten
RBL-2H3-cellijn voor geavanceerd immunologisch onderzoek
RBL-2H3 cellen: Publicaties
Hieronder volgen enkele spannende onderzoekspublicaties over de RBL-2H3 mestcellen:
Remmende activiteit van narirutine op degranulatie van RBL-2H3 cellen
Dit onderzoek is gepubliceerd in Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Het onderzoek stelde dat narirutine, een natuurlijke verbinding, remmende effecten uitoefent op degranulatie van RBL-2H3 cellen via regulering van NF-κB, MAPK en de tyrosinekinasesignaleringsroute.
Dit onderzoek in het International Journal of Molecular Sciences (2020) stelde dat de apigenineverbinding de allergische en ontstekingsreacties van RBL-2H3- en RAW264.7-cellen aanzienlijk onderdrukt. Daarom kan het dienen als een potentieel middel voor het bestrijden van immuungerelateerde ziekten.
Dit onderzoeksartikel in het International Journal of Molecular Sciences (2021) evalueerde de anti-allergische en anti-inflammatoire effecten van een natuurlijk product, saponarine, met behulp van verschillende cellijnen, waaronder RBL-2H3.
Deze Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014) studie toonde aan dat Benchalokawichian extracten en enkele actieve bestanddelen potentiële remmende effecten hebben op het vrijkomen van ß-hexosaminidase uit RBL-2H3 cellen.
Dit artikel werd in 2018 gepubliceerd in het International Journal of Biological Macromolecules. De studie stelde dat spirulina maxima, een natuurlijk product, RBL-2H3 degranulatie remt door MAPKs en AKT fosforylering te voorkomen.
Bronnen voor RBL-2H3 cellijn: Protocollen, video's en meer
RBL-2H3 is een veelgebruikte mestcellijn. De beschikbare bronnen met betrekking tot RBL-2H3 kweek- en transfectieprotocollen worden hier vermeld:
- RBL 2H3 MC model: Dit onderzoeksartikel bevat protocollen voor het onderhouden van RBL-2H3 culturen en voor RBL-2H3 transfectie.
Hier zijn enkele bronnen die het RBL-2H3 celkweekprotocol uitleggen:
- RBL-2H3 cellen: Deze website is nuttig voor je om celkweekprotocollen voor de RBL-2H3 cellijn te leren. Daarnaast bevat het informatie over RBL-2H3 celmedia en kweekomstandigheden.
RBL-2H3-cellijn: Essentiële veelgestelde vragen voor onderzoekers
Referenties
- Passante, E. en N. Frankish, The RBL-2H3 cell line: its provenance and suitability as a model for the mast cell. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al., Pseudo-allergische reactie veroorzaakt door Qingkailing injectie gedeeltelijk via de PI3K-Rac1 signaleringsroute in RBL-2H3 cellen. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al., Polystyreen micro (nano) plastics beschadigen de organellen van RBL-2H3 cellen en bevorderen MOAP-1 om apoptose te induceren. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Anti-allergische en ontstekingsremmende effecten van neferine op RBL-2H3-cellen. Internationaal Tijdschrift voor Moleculaire Wetenschappen, 2021. 22(20): p. 10994.