RAW 264.7 cellijn voor macrofaag- en immunologisch onderzoek

De RAW 264.7 cellijn dient als een robuust in vitro model voor muriene macrofagen, fundamenteel voor immunologisch onderzoek. Deze cellen zijn afkomstig van een mannelijke BALB/c muis en werden getransformeerd door het Abelson murine leukemievirus, wat resulteerde in een macrofaagachtige cellijn. Vanwege hun functionele stabiliteit en inherente vermogen om zowel fagocytose als pinocytose uit te voeren, zijn RAW 264.7 cellen essentieel voor het bestuderen van gastheer-pathogeen interacties, waardoor ze een hoeksteen vormen in immunologisch onderzoek [1,2].

Morfologische kenmerken en groeigedrag

Bij onderzoek vertonen RAW 264.7 cellen een semi-adherente groei met de neiging om zowel spoelvormige adherente cellen als bolvormige drijvende levensvatbare cellen te vormen, met een celdiameter variërend van 10 tot 20 µm. Deze polymorfe aard en aanpasbaarheid in kweekomstandigheden maken RAW 264.7 cellen tot een veelzijdig instrument voor experimentele manipulatie en observatie.

Immunologische functie en antigeenpresentatie

Als antigeen-presenterende cellen spelen RAW 264.7 cellen een cruciale rol in het immuunsysteem. Hun functie gaat verder dan eenvoudige herkenning van ziekteverwekkers tot de verwerking en presentatie van antigenen aan T-cellen, waardoor een uitgebreide immuunrespons wordt georkestreerd. Deze dynamiek vergemakkelijkt een beter begrip van hoe het immuunsysteem vreemde entiteiten identificeert en neutraliseert.

Macrofaag polarisatie: Het M0, M1 en M2 paradigma

RAW 264.7 cellen, in hun basale staat als M0 macrofagen, bezitten de opmerkelijke capaciteit om te polariseren in ofwel het M1 pro-inflammatoire of het M2 anti-inflammatoire fenotype. Dit polarisatievermogen biedt onderzoekers een model om de invloeden en effecten van verschillende cytokinen en omgevingsfactoren op de macrofaagfunctie en immuunreacties te bestuderen [3,4].

Osteoclastogenese en botopbouw

Hoewel RAW 264.7 cellen zelf geen osteoclasten zijn, hebben ze een belangrijke rol gespeeld bij het bestuderen van osteoclastogenese - het proces van osteoclastvorming. Deze cellen vergemakkelijken het onderzoek naar osteoclastische genexpressie en hun respons op receptoractivatie. Dit onderzoek heeft diepgaande implicaties voor het begrijpen van de pathofysiologie van aandoeningen zoals osteoporose, waarbij ontregelde botopbouw een kenmerk is.

Voordelen en nadelen van RAW 264.7 cellen

Voordelen

• Gemakkelijke kweek: De RAW 264.7 cellijn is gemakkelijk te kweken en te onderhouden in het laboratorium zonder ingewikkelde eisen.
• Goed gekarakteriseerd: RAW 264.7 is een goed gekarakteriseerde cellijn, wat betekent dat het stabiele fenotypische en functionele kenmerken heeft.
• In vitro model van macrofagen: Aangezien RAW 264.7-cellen macrofagen zijn, vertonen ze essentiële macrofaagachtige functies zoals fagocytose en pinocytose. Daarom worden ze vaak gebruikt als een in vitro model van macrofagen.
• Differentiatie tot osteoclasten: RAW 264.7 cellen kunnen worden gedifferentieerd in osteoclasten met behulp van specifieke moleculaire factoren. Deze gedifferentieerde cellen zijn in staat om botopbouw uit te voeren, vergelijkbaar met osteoclasten.

Nadelen

• Slechte representatie van primaire macrofagen: Als getransformeerde cellijn, kan RAW 264.7 niet nauwkeurig de kenmerken van primaire macrofagen vertegenwoordigen en kunnen er enkele verschillen zijn in genexpressie, fenotype en functie.
• Beperkingen bij het screenen van geneesmiddelen: RAW 264.7-cellen zijn mogelijk niet geschikt voor alle soorten testen voor het screenen van geneesmiddelen en hun reacties op bepaalde geneesmiddelen kunnen verschillen van die van primaire macrofagen.
• Sterke celadhesie: RAW 264.7-cellen hechten zich sterk aan het oppervlak van de kweekkolf en zijn soms moeilijk los te maken.

Toepassingen van RAW 264.7 cellen in macrofaag nabootsing en immunologische studies

Modelleren van cellulaire immunologische reacties

De RAW 264.7 cellijn, die de functionaliteit van authentieke macrofagen weerspiegelt, is een belangrijk model voor het onderzoeken van celreacties op pathogenen en immunologische stimuli. Een studie die dit aspect benadrukte, beoordeelde de immunomodulerende en antioxiderende effecten van door warmte gedode melkzuurbacteriën op deze cellen, wat significante bevindingen opleverde in de regulatie van het immuunsysteem[5]

In aanvulling hierop heeft onderzoek uit 2019 de immunologische impact van blootstelling van RAW 264.7 aan polysachariden van de plant Polygonatum sibiricum opgehelderd. De studie concludeerde dat deze verbindingen een immuunrespons uitlokken door de activering van NF-κB/MAPK-signaalroutes, wat een diep moleculair begrip biedt[6]

Verkenning van osteoclastogenese

RAW 264.7-cellen fungeren als een surrogaat voor studies naar differentiatie van osteoclasten en dragen bij aan de opheldering van het gedrag van osteoclasten en differentiatiepaden. Dergelijk onderzoek vergroot onze kennis over botresorptiemechanismen en de pathogenese van osteoporose. Geavanceerde beeldvormingstechnieken worden vaak gebruikt om intracellulaire veranderingen te monitoren en het heemmetabolisme in deze cellen te analyseren

Moleculaire inzichten krijgen in osteoclastogenese

Ondanks hun primaire rol als macrofaagmodel, worden RAW 264.7 cellen ook gebruikt voor in vitro onderzoek naar osteoclastogenese. Door osteoclast-achtige eigenschappen in deze cellen te induceren, krijgen onderzoekers inzicht in het differentiatieproces en pre-osteoclast gedrag, hoewel het cruciaal is om de inherente eigenschappen en oorsprong van de cellijn in deze studies in overweging te nemen

Screening op bioactiviteit van natuurlijke producten

Het screenen op bioactiviteit in natuurlijke producten is een andere toepassing waarin RAW 264.7 cellen uitblinken. Het gebruik ervan in een Koreaanse studie waarin de immunostimulerende eigenschappen van een kruidenmengsel werden onderzocht, toonde bijvoorbeeld aan hoe effectief de cellijn is in het identificeren van bioactieve bestanddelen in natuurlijke stoffen[7]

Pionier je onderzoek met onze RAW 264.7 cellen

Onderzoekspublicaties met RAW 264.7 cellen

Er zijn veel onderzoekspublicaties beschikbaar over de muizenmacrofaagcellijn RAW 264.7:

• Polysacchariden van Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute induceren een immuunrespons in de RAW264.7 cellijn via eenNF-κB/MAPKpathway: Deze studie stelde voor dat polysachariden verkregen uit de Polygonatum sibiricum plant een immuunrespons kunnen opwekken in de muismacrofaagcellijn RAW 264.7 via regulering van de NF-κB/MAPK-signaalcascade.
• Immunomodulerende effecten van Tinospora crispa-extract en de belangrijkste bestanddelen ervan op de immuunfuncties van RAW 264.7 macrofagen: Dit artikel, gepubliceerd in het tijdschrift International Immunopharmacology, beschrijft dat Tinosporacrispa plantenextract en de belangrijkste bestanddelen ervan een immunomodulerend en immuunstimulerend effect hebben op de RAW 264,7 macrofaagcellijn.
• Door verhittinggedode melkzuurbacteriën remmen de productie van stikstofmonoxide via induceerbaar stikstofoxidesynthase en cyclo-oxygenase-2 in RAW 264,7-cellen: Deze studie stelde voor dat hitte-gedode melkzuurbacteriën mogelijk gebruikt kunnen worden in probiotische productsynthese omdat ze immuunmodulerende en antioxiderende eigenschappen bezitten. Onderzoekers gebruikten RAW 264.7-cellen om deze biologische activiteiten te bestuderen.
• Effect van kruidenformulering op verbetering van immuunrespons in RAW 264.7 macrofagen: Dit onderzoek gebruikte RAW 264.7 cellen om het immuunstimulerende effect van een kruidenformulering genaamd KM1608 te bestuderen. Het onderzoek suggereerde dat KM1608 een potentieel middel is om de immuunrespons te versterken.
• Een screening van planten die worden gebruikt in de Colombiaanse traditionele geneeskunde onthulde het ontstekingsremmende potentieel van Physalis angulata kelken: Dit artikel, gepubliceerd in het Saudi Journal of Biological Sciences, onderzocht het ontstekingsremmende potentieel van 10 veelgebruikte traditionele Colombiaanse planten met behulp van LPS-gestimuleerde RAW 264.7-cellen.

RAW 264.7-cellen: Hulpmiddelen, protocollen, video's en meer

RAW 264,7 cellen worden vaak gebruikt in transfectiestudies. De volgende bronnen leggen verschillende transfectiemethoden uit die worden gebruikt voor de RAW 264.7 cellijn.

• Transfectie van RAW 264,7 cellen: Deze website biedt een protocol voor het transfecteren van RAW 264,7 macrofagen met behulp van een lipofectamine-reagens.
• Transfectie protocol: Dit gepubliceerde artikel beschrijft een gedetailleerd protocol voor de transfectie van RAW 264,7 cellen.
• Efficiënte transfectiemethode voor RAW 264,7 cellen: Dit document beschrijft een andere praktische transfectiemethode met RAW 264,7 cellen.

Video's gerelateerd aan RAW 264.7 cellijn

• Het kweken van RAW 264.7-cellen: Deze video legt RAW 264,7 cellen passaging protocol.
• Transfectie methode: Deze video gaat over het transfecteren van RAW 264.7-cellen met een reportergen.

Essentiële vragen over de RAW 264.7 cellijn: Inzichten in macrofaag nabootsing en onderzoek naar osteoclastogenese

Referenties

1. Taciak, B., et al., Evaluatie van fenotypische en functionele stabiliteit van RAW 264.7-cellijn door seriële passages. PloS one, 2018. 13(6): p. e0198943.
2. Wang, S., et al., Inflammatoire macrofagen onderbreken de maturatie en mineralisatie van osteocyten via regulering van de Notch-signaleringsroute. Moleculaire geneeskunde, 2022. 28(1): p. 102.
3. Orekhov, A.N., et al., Monocytendifferentiatie en macrofaagpolarisatie. Vessel Plus, 2019. 3: p. 10.
4. Khabipov, A., et al., RAW 264.7 macrofaagpolarisatie door pancreaskankercellen-een model voor het bestuderen van tumorbevorderende macrofagen. Anticancer Research, 2019. 39(6): p. 2871-2882.
5. Kang, C.-H., et al., Heat-killed lactic acid bacteria inhibit nitric oxide production via inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 in RAW 264.7 cells. Probiotica en antimicrobiële eiwitten, 2021. 13(6): p. 1530-1538.
6. Zhang, J., et al., Polysacchariden uit Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute induceren een immuunrespons in de RAW264. 7 cellijn via een NF-κB/MAPK pathway. RSC advances, 2019. 9(31): p. 17988-17994.
7. Trinh, T.A., et al., effect van kruidenformulering op immuunresponsverbetering in RAW 264.7 macrofagen. Biomoleculen, 2020. 10(3): p. 424.