NCI-H460-cellen - Longkankeronderzoek met inzichten uit NCI-H460
NCI-H460 zijn van mensen afkomstige niet-kleincellige longkankercellen die vaak worden gebruikt bij longcarcinoom- en toxicologisch onderzoek. Deze cellijn is een waardevol hulpmiddel voor het bestuderen van verschillende aspecten van kankerbiologie, zoals tumorontwikkeling, groei en resistentie tegen geneesmiddelen. Bovendien zijn NCI-H460 cellen een geschikt model voor de ontwikkeling van antikankerreagentia.
NCI-H460 cellen: Oorsprong en algemene kenmerken
De oorsprong en algemene kenmerken van een cellijn dragen in belangrijke mate bij aan de onderzoekstoepassingen ervan. Dit deel van het artikel zal je helpen om de oorsprong en de meest opvallende kenmerken van NCI-H460 longkankercellen te leren kennen. Je zult het weten: Wat zijn NCI-H460 cellen? Wat is het type NCI-H460 cellijn? Wat is de morfologie van NCI-H460?
- De NCI-H460 cellijn is ontstaan uit de pleurale effusie van een Europese man met grootcellig longkanker. De lijn werd in 1982 ontwikkeld door A.F. Gazdar en collega's.
- NCI-H460 longkankercellen hebben een epitheliale morfologie.
- NCI-H460 is een tumorigene cellijn met een hypotriploïd karyotype. Het modale chromosoomnummer voor deze cellen is 57. NCI-H460 cellen bezitten ook 58 modale chromosoomnummers in vergelijkbare mate.
- Deze longkankercellen hebben veel NCI-NCI-H460-mutaties zoals niet-kleincellige longtumoren, zoals de NCI-H460 KRAS-mutatie, die betrokken zijn bij celproliferatie, groei, invasie en metastase.
Informatie over het kweken van NCI-H460 cellen
U dient op de hoogte te zijn van de volgende belangrijke punten voor een juiste behandeling en onderhoud van de NCI-H460 cellijn. U wordt geïnformeerd over de verdubbelingstijd van NCI-H460, het NCI-H460 kweekmedium en de basisprocedures voor het kweken van NCI-H460 longkankercellen.
Belangrijke punten voor het kweken van NCI-H460 cellen
|
Verdubbelingstijd: |
De verdubbelingstijd van NCI-H460 is ongeveer 33 uur. |
|
Adherent of in suspensie: |
De NCI-H460 longkankercellen zijn adherent. |
|
Sub-kweek Ratio: |
De splitsingsverhouding die wordt aanbevolen voor de NCI-H460 cellijn is 1:2 en 1:4. Na het verwijderen van het oude medium worden de adherente cellen gespoeld met 1 x fosfaatbuffer zoutoplossing. Daarna worden de cellen geïncubeerd met Accutase passaging-oplossing gedurende 8 tot 10 minuten bij omgevingstemperatuur. Gedissocieerde cellen worden geresuspendeerd in een kweekmedium en gecentrifugeerd. Geoogste cellen worden opnieuw gesuspendeerd en in een nieuwe kolf gegoten om te worden gekweekt. |
|
Groeimedium: |
RPMI 1640 wordt gebruikt als NCI-H460 kweekmedium. Het wordt aangevuld met 10% foetaal runderserum, 2,1 mM stabiele glutamine en 2,0 g/L NaHCO3. Het medium moet 2 tot 3 keer per week worden vervangen. |
|
Groeicondities: |
NCI-H460 culturen worden onderhouden bij 37°C temperatuur in een bevochtigde incubator met een continue 5% CO2 toevoer. |
|
Opslag: |
NCI-H460 longkankercellen kunnen worden opgeslagen in de dampfase van vloeibare stikstof of bij een temperatuur van minder dan -150°C in een elektrische vriezer voor ultralage temperaturen voor de lange termijn. |
|
Invriesproces en medium: |
CM-1 of CM-ACF medium wordt gebruikt om NCI-H460 cellen in te vriezen en op te slaan. Een langzame vriesmethode wordt aanbevolen om maximale levensvatbaarheid van de cellen te beschermen. |
|
Ontdooiproces: |
Bevroren NCI-H460 cellen worden ontdooid in een voorverwarmd waterbad (bij 37°C temperatuur) gedurende 40 tot 60 seconden totdat er een klein ijsklontje overblijft. Ontdooide cellen worden toegevoegd met verse media en gecentrifugeerd om bevroren mediacomponenten te verwijderen. De verzamelde celpellet wordt opnieuw gesuspendeerd en de cellen worden overgebracht in nieuwe kolven met media voor groei. Het kan bijna 24 uur duren voordat NCI-H460-cellen zich hechten aan het oppervlak van de kolf. |
|
Bioveiligheidsniveau: |
NCI-H460 longkankercellen worden gehanteerd en onderhouden in laboratoria met bioveiligheidsniveau 1. |
Voordelen en nadelen van NCI-H460 cellen
NCI-H460 is een veelgebruikte cellijn in longkankeronderzoek. In deze paragraaf worden de algemene voor- en nadelen van NCI-H460 longkankercellen besproken.
Voordelen
De voordelen van de NCI-H460 niet-kleincellige longkankercellijn zijn:
-
Tumoroorsprong
De NCI-H460 cellijn is afkomstig van een grootcellig longcarcinoom patiënt en vertegenwoordigt dit specifieke longkankertype. Ze worden gebruikt als model om de biologie van longkanker te bestuderen en nieuwe en effectieve behandelingen te ontwikkelen. NCI-H460 cellen hebben een tumorigene potentie en kunnen worden geïnjecteerd in immunodeficiënte muizen om in vivo tumormodellen te creëren voor het bestuderen van tumorgroei, ontwikkeling en werkzaamheid van potentiële medicijnen.
-
Hoge proliferatie
NCI-H460 heeft een hogere groeisnelheid dan andere niet-kleincellige longkanker cellijnen, zoals A549. Dit voordeel vergroot hun beschikbaarheid en helpt onderzoekers bij het uitvoeren van reproduceerbare en tijdgevoelige experimenten.
Nadelen
De nadelen van NCI-H460 longkankercellen zijn:
-
Homogeniteit
NCI-H460 cellen zijn homogeen omdat ze zijn verkregen uit een tumor van één patiënt. Daarom missen ze over het algemeen de complexiteit en heterogeniteit die in patiëntentumoren worden waargenomen.
Onderzoekstoepassingen van NCI-H460 cellen
De NCI-H460 longkankercellen worden veel gebruikt in onderzoeken naar longcarcinoom. Hier volgen enkele belangrijke onderzoekstoepassingen van NCI-H460 cellen:
- Longkankeronderzoek: NCI-H460 cellen zijn een model van onschatbare waarde voor het onderzoeken van cel- en moleculaire mechanismen die betrokken zijn bij de ontwikkeling, groei en uitzaaiing van tumoren. Bovendien wordt het gebruikt om dwingende signaalwegen, moleculaire doelwitten en verschillende genetische mutaties te bestuderen die geassocieerd worden met de progressie van longkanker. Er zijn verschillende onderzoeken uitgevoerd op NCI-H460-cellen om deze factoren effectief te bestuderen. Een studie uitgevoerd in 2019 stelde voor dat overexpressie van nucleaire ubiquitaire caseïne en cycline-afhankelijke kinasesubstraten (NUCKS) betrokken zijn bij tumorcelgroei via regulatie van de PI3K/AKT-signaleringsroute [1]. Op dezelfde manier werd in een in vitro en in vivo onderzoek met NCI-H460 cellen de rol van het eIF4E gen bestudeerd. De bevindingen onthulden dat het eIF4E-gen betrokken is bij de groei van longcarcinomen en angiogenese, en dat het gericht kan worden ingezet om veelbelovende medicijnen tegen longkanker te ontwikkelen [2].
- Ontdekking en ontwikkeling van medicijnen: NCI-H460, een menselijke longkankercellijn, wordt veel gebruikt bij het ontdekken en ontwikkelen van medicijnen. Onderzoekers gebruiken deze cellen om de toxiciteit en werkzaamheid te onderzoeken van nieuwe kandidaat-geneesmiddelen, doelgerichte therapieën en behandelingen die voornamelijk gericht zijn op NCI-H460 KRAS-mutaties. Een onderzoek uitgevoerd door Haoyue Hu en collega's in 2023 gebruikte NCI-H460 cellen om de antikankereffecten van het geneesmiddel anlotinib te bestuderen. De resultaten toonden aan dat anlotinib de groei van KRAS-mutante longkankercellen gedeeltelijk beïnvloedde door de MEK/ERK-signaleringscascade te remmen [3]. Ook werd een fenolverbinding, carnosinezuur, onderzocht op antiproliferatieve en proapoptotische activiteiten met NCI-H460 cellen [4].
- Geneesmiddelenresistentie: De NCI-H460-cellijn is ideaal voor het bestuderen van het resistentiemechanisme van longcarcinomen tegen geneesmiddelen. Onderzoekers gebruiken deze cellen om modellen voor geneesmiddelenresistentie te ontwikkelen om onderliggende genen, moleculaire factoren en signaalroutes te identificeren. In een studie werden bijvoorbeeld pemetrexed, een multitargeted antifolaatmiddel, resistente NCI-H460-cellen ontwikkeld om onderliggende moleculaire mechanismen van pemetrexed-resistentie in niet-kleincellige longkankercellen te bestuderen [5].
Koop de NCI-H460-cellijn: Uw toegangspoort tot longkankeronderzoek
Onderzoekspublicaties met NCI-H460-cellen
Hier volgen enkele interessante onderzoekspublicaties over de NCI-H460 longcarcinoom cellijn.
Dit onderzoek in Molecules (2023) stelt dat een natuurlijk α-1,6-glucaan, BBWPW, uit zwarte bonen de proliferatie van NCI-H460 cellen remt via regulering van de PI3K/AKT/MAPK-route.
Dit artikel in Phytomedicine (2019) onderzocht dat dioscin-6′-O-acetaat, een nieuwe natuurlijke verbinding, een antiproliferatief effect uitoefent op NCI-H460 longkankercellen.
miRNA-425-5p versterkt de groei van longkanker via de PTEN/PI3K/AKT-signaalas
Onderzoek van BMC Pulmonary Medicine (2020) stelt dat microRNA-425-5p de tumorigenese van longcarcinomen versterkt via de PTEN/PI3K/AKT-route.
In dit artikel in Molecular Medicine Reports (2017) worden het antitumorpotentieel en de onderliggende mechanismen van de verbinding quinalizarine in NCI-H460 en andere longkankercellen voorgesteld.
Dit onderzoek in Food and Function (2019) belicht het potentiële antikankereffect van Eucalyptus globulus labill. extract met behulp van NCI-H460 cellen. De bevindingen toonden aan dat het plantenextract deze effecten vertoonde door de expressie van NCI-H460 p53 te verhogen en het celcyclusprofiel te moduleren.
Bronnen voor NCI-H460-cellijn: Protocollen, video's en meer
Hier zijn enkele online bronnen met de NCI-H460 longkankercellen.
- NCI-H460 celtransfectie: Deze video tutorial is een stap-voor-stap handleiding voor het transfecteren van NCI-H460 cellen met plasmide DNA.
De volgende links bevatten dwingende informatie over celkweek voor H460 cellen.
- NCI-H460 cellen: Op deze website vindt u belangrijke informatie over NCI-H460-celmedia, subcultuur-, invries- en ontdooiprocedures.
- Passaging van NCI-H460 cellen: Dit document zal u begeleiden bij het passeren en subkweken van de NCI-H460 cellijn. Daarnaast helpt het je ook bij het leren van het transfectieprotocol voor NCI-H460 cellen.
Onderzoek van de NCI-H460-cellijn: Veelgestelde vragen en inzichten
Referenties
- Hu, C., et al., NUCKS bevordert de proliferatie, migratie en invasie van longkankercellen via de Pi3k/Akt signaleringsroute. Klinische en onderzoeksgeneeskunde, 2021. 44(2): p. E55-61.
- Qi, X., et al., EGPI-1, een nieuwe eIF4E/eIF4G-interactieremmer, remt de groei van longkankercellen en angiogenese via de Ras/MNK/ERK/eIF4E-signaleringsroute. Chemisch-biologische interacties, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotinib oefent antikankereffecten uit op KRAS-gemuteerde longkankercel via onderdrukking van de MEK/ERK-route. Cancer Management and Research, 2020: p. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Carnosic acid exhibits antiproliferative and proapoptotic effects in tumoral NCI-H460 and nontumoral IMR-90 lung cells. Tijdschrift voor Toxicologie en Milieuhygiëne, Deel A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al., Establishment and characterization of pemetrexed-resistant NCI-H460/PMT cells. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (voorheen Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.