DU-145 Cellen - Een uitgebreide gids voor onderzoekers

DU-145 is een menselijke prostaatcarcinoom cellijn die breed wordt toegepast in biomedisch onderzoek. Deze cellen dienen als een model van onschatbare waarde voor het bestuderen van de biologie van prostaatkanker, het testen van medicijnen en ontwikkeling. Daarnaast gebruiken onderzoekers DU-145 cellen ook om moleculaire mechanismen te onderzoeken die ten grondslag liggen aan de ontwikkeling, groei en progressie van prostaatkanker.

Dit artikel geeft je waardevolle inzichten in de DU-145 prostaatkankercellen. In het bijzonder zal het gaan over:

Algemene informatie en oorsprong van de DU-145 cellijn
Het kweken van DU-145 cellen
DU-145 cellijn: Voordelen & beperkingen
Onderzoekstoepassingen van DU-145 cellen
Onderzoek Publicaties met DU-145-cellen
Hulpmiddelen voor DU-145-cellijn: Protocollen, video's en meer

1. Algemene informatie en oorsprong van de DU-145 cellijn

Het is essentieel om de fundamentele eigenschappen en oorsprong van een cellijn te begrijpen voordat je ermee gaat werken. Dit gedeelte geeft een uitgebreid inzicht in de eigenschappen en oorsprong van de DU-145 cellijn. Je leert het volgende: Wat zijn DU145 kankercellen? Wat is de morfologie van DU145 cellen? Wat is het verschil tussen PC-3 en DU145?

DU-145, een menselijke prostaatkankercellijn, werd afgeleid uit de hersenen van een blanke man (69 jaar) met uitgezaaid prostaatcarcinoom. Deze cellen werden voor het eerst gedeponeerd door K.R. Stone en collega's in 1978.
Net als PC-3 prostaatkankercellen, brengt DU-145 ook androgeenreceptoren tot expressie. Wanneer deze cellen echter worden behandeld met androgeenligand, vertonen ze geen activiteit van androgeenreceptorresponsieve genen en worden ze dus beschouwd als androgeenonafhankelijke cellen.
DU-145 cellen hebben een epitheliale morfologie.
DU-145 cellen zijn hypotriploïde en hebben een modaal chromosoomnummer van 64. Ze vertonen verschillende markerchromosomen. Ze vertonen verschillende markerchromosomen, zoals del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) en del (9) (p11).

PC-3 vs DU145

Beide prostaatkankercellijnen zijn androgeen receptor-onafhankelijk. Ze verschillen wat betreft hun tumorigene en metastatische potentieel. Bij injectie in een immuungecompromitteerde muis vormt de PC-3 cellijn een sterk metastatisch graad IV adenocarcinoom. De DU-145 cellijn daarentegen ontwikkelt prostaatkanker met een matig metastatisch potentieel [1].

Verstoring van microfilamenten in menselijke prostaatkankercellen PC-3.

2. kweken van DU-145-cellen

De DU-145 cellijn wordt veel gebruikt in prostaatkankeronderzoekslaboratoria. Je moet de volgende belangrijke punten leren om deze cellijn gemakkelijk en efficiënt te kunnen kweken. Dit gedeelte bevat informatie over het DU145 medium, verdubbelingstijd, celkweekcondities en protocollen.

Belangrijke punten voor het kweken van DU-145 cellen

Populatieverdubbelingstijd:	De DU-145 verdubbelingstijd varieert tussen 30 en 40 uur.
Adherent of in suspensie:	DU-145 is een adherente cellijn.
Zaaidichtheid:	DU-145 cellen worden gezaaid bij een aanbevolen celdichtheid van 2 x¹⁰⁴^cellen/cm2. Bij deze dichtheid vormen de cellen een confluente monolaag in bijna 4 dagen. Voor het zaaien worden de cellen gewassen met 1 x fosfaatbuffer zoutoplossing en geïncubeerd met passagingoplossing, Accutase. Na 8 tot 10 minuten incubatie bij kamertemperatuur worden de cellen toegevoegd met verse kweekmedia en gecentrifugeerd. De verzamelde celpellet wordt voorzichtig geresuspendeerd en de cellen worden in nieuwe kweekflesjes gegoten om te groeien.
Groeimedium:	EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) met mediumsupplementen, d.w.z. 10% foetaal runderserum (FBS), 2 mM L-glutamine, 2,2 g/L NaHCO3 en EBSS. Het medium wordt 2 tot 3 keer per week ververst.
Groeicondities:	DU-145 culturen worden bewaard in een 37°C bevochtigde incubator met een 5% CO2 bron.
Opslag:	DU-145 cellen worden opgeslagen in de dampfase van vloeibare stikstof of bij een temperatuur van minder dan -150°C in een elektrische vriezer om de levensvatbaarheid van de cellen voor langere tijd te behouden.
Invriesproces en -medium:	CM-1 of CM-ACF invriesmedia worden aanbevolen voor DU-145 prostaatkankercellen. Er wordt gekozen voor een langzame vriesmethode waarbij de temperatuur geleidelijk met 1 °C daalt om cellen in te vriezen. Dit voorkomt dat cellen een schok krijgen en helpt hun levensvatbaarheid te behouden.
Ontdooiproces:	Bevroren DU-145 celvaatjes worden snel ontdooid in een waterbad van 37 °C gedurende 40 tot 60 seconden. Daarna worden de cellen toegevoegd aan de kweekmedia en gecentrifugeerd om de bestanddelen van de vriesmedia te verwijderen. Geoogste cellen worden geresuspendeerd in een groeimedium en in de kolf gegoten om te groeien. Invriezen duurt bijna 24 uur.
Bioveiligheidsniveau:	Instellingen op bioveiligheidsniveau 1 zijn vereist om de DU145 androgeenreceptoronafhankelijke cellijn te kweken.

DU-145 prostaatkankercellen bij een vergroting van 10x en 20x.

3. dU-145 cellijn: Voordelen en beperkingen

Net als andere cellijnen heeft de prostaatkanker cellijn DU-145 een aantal voor- en nadelen. Deze eigenschappen kunnen je helpen bij het beslissen over het gebruik ervan in je onderzoek. De belangrijkste voor- en nadelen van DU-145 cellen worden hieronder genoemd.

Voordelen

De voordelen van DU-145 cellen zijn:

Tumorigeniciteit	DU-145 is een agressieve tumorigene prostaatkankercellijn met een matig metastatisch potentieel. Wordt gebruikt voor de ontwikkeling van het DU145 xenograft-model in immuungecompromitteerde muizen om de biologie, ontwikkeling en groei van prostaatkanker in vitro en in vivo te bestuderen.
Onafhankelijkheid van androgeenreceptor	DU-145 prostaatkankercellen zijn androgeen receptor-onafhankelijk. Ze zijn voor hun groei niet afhankelijk van androgenen en vertonen geen respons op cel- en moleculair niveau wanneer ze met androgenen worden behandeld. Ideaal voor onderzoek naar hormoononafhankelijke mechanismen van prostaatkanker.

Beperkingen

De beperkingen van de DU-145 cellijn zijn:

In-vitromodel

DU-145 is een in vitro celmodel van uitgezaaid prostaatcarcinoom, dus het is mogelijk dat het de complexiteit van primaire prostaattumoren niet volledig weergeeft. Bovendien is het mogelijk dat ze niet alle prostaatkankertypes en subtypes weergeeft door specifieke kenmerken zoals androgeenreceptor-onafhankelijkheid.

4. onderzoekstoepassingen van DU-145 cellen

De DU-145 prostaatkankercellijn heeft een breed scala aan onderzoekstoepassingen. Enkele veelbelovende toepassingen worden hier genoemd.

Prostaatkankerbiologie: DU-145 is een relevant model om de biologie van prostaatkanker te bestuderen. Onderzoekers gebruiken deze cellen om moleculaire mechanismen te onderzoeken die de ontwikkeling, progressie en metastase van kanker bepalen. Bovendien worden genetische veranderingen die vaak geassocieerd worden met prostaatkanker ook onderzocht. Onderzoek uit 2021 onderzocht de DU-145 cellen om potentiële biomarkers te identificeren voor efficiënte diagnostische en therapeutische implicaties. Het onderzoek suggereerde actine gamma 1 (ACTG1) als een potentiële biomarker voor prostaatkanker, omdat het de proliferatie van kankercellen bevordert en metastase reguleert via activering van de MAPK/ERK-route [2].
Screening en ontwikkeling van geneesmiddelen: DU-145 prostaatkankercellen worden veel gebruikt om de cytotoxiciteit en werkzaamheid van potentiële medicijnen tegen kanker te testen. Dit helpt onderzoekers bij het identificeren van nieuwe geneesmiddelen, het begrijpen van geneesmiddelenresistentie en onderliggende moleculaire mechanismen. Een onderzoek uit 2022 onderzocht het cytotoxische effect van een harsachtig mengsel, propolis of bijenlijm, op prostaatkankercellijnen PC-3 en DU-145. Het onderzoek toonde groeiremmende effecten van propolis op de groei van prostaatkanker. De studie toonde groeiremmende effecten van deze natuurlijke stof in beide cellijnen en stelde het antikankerpotentieel ervan voor [3]. Een andere studie werd uitgevoerd in 2019 en onderzocht de antiproliferatieve effecten van een natuurlijke verbinding, betaïne in DU-145 prostaatkankercellen. Het onderzoek toonde aan dat betaïne antiproliferatieve activiteiten uitoefent door oxidatieve stress-gemedieerde celdood en ontsteking in DU-145 cellen te verhogen [4].

€ 430,00*

Inhoud: 1.5 milliliter

Prijzen excl. btw plus verzendkosten

cryovial

Productnummer: 300168

5.onderzoekspublicaties met DU-145-cellen

Hieronder volgen enkele onderzoekspublicaties over de DU-145 cellijn.

Concentratieafhankelijke effecten van zinksulfaat op de DU-145 menselijke prostaatkankercellijn: oxidatieve, apoptotische, inflammatoire en morfologische analyses

Deze studie in de Biological Trace Element Research, 2020, stelde dat zinksulfaat (_ZnSo4) antiproliferatieve effecten uitoefent in DU-145 cellen via het induceren van apoptose, morfologische veranderingen, oxidatieve schade en ontsteking.

Selectieve cytotoxische en anti-metastatische activiteit in DU-145 prostaatkankercellen geïnduceerd door Annona muricata L. schorsextract en fytochemisch product, annonacine

Dit onderzoeksartikel werd gepubliceerd in BMC Complementary Medicine and Therapies in 2020. Deze studie onderzocht het cytotoxische en anti-metastatische potentieel van een plant, Annona muricata L. schors extract, en haar bioactieve annonacine in de DU-145 cellijn.

LncRNA LOXL1-AS1/miR-let-7a-5p/EGFR-gerelateerderoute reguleert de doxorubicineresistentie van prostaatkankercellen DU-145

Deze publicatie in IUBMB Life (2019) stelde voor dat lang niet-coderend RNA LOXL1-AS1 interactie met miR-let-7a-5p en EGFR-pad de doxorubicineresistentie in DU-145 prostaatkankercellen reguleert.

Downregulatie van DDR1 induceert apoptose en remt EMT via fosforylering van Pyk2/MKK7 in DU-145 en Lncap-FGC prostaatkankercellijnen

In dit artikel in Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) staat dat de downregulatie van het DDR1-gen (Discoidin Domain Receptor1) de dood van DU-145-cellen veroorzaakt en de epitheliale naar mesenchymale overgang (EMT) remt via activering van de Pyk2/MKK7-route.

Casticine remt migratie en invasie van humane prostaatkanker DU-145 cellen via Ras/Akt/NF-κB signaalwegen

Deze studie in het Journal of Food Biochemistry (2019) stelt dat Casticin, een polymethoxyflavon, de migratie en invasie van DU-145 cellen remt door de Ras/Akt/NF-κB signalering te reguleren.

6. hulpmiddelen voor DU-145-cellijn: Protocollen, video's en meer

Er zijn veel online bronnen beschikbaar over de DU-145 prostaatkanker cellijn. Hier worden een paar bronnen genoemd die de behandeling, het onderhoud en het transfectieprotocol voor deze cellen uitleggen:

DU-145 transfectie: Deze video tutorial is een stap-voor-stap handleiding voor het leren van het protocol voor het transfecteren van DU-145 cellen.

Het DU-145 celkweekprotocol wordt hier vermeld.

DU-145 subcultuur: Via deze link leer je het protocol voor het subkweken of subcultiveren van DU-145 cellen.
DU-145 cellen: Deze website bevat veel nuttige informatie over de DU-145 cellijn, inclusief DU145 medium, protocol voor subculturen en het omgaan met proliferatieve en gecryopreserveerde culturen.

Referenties

Lima, A.R., et al., Discrimination between the human prostate normal and cancer cell exometabolome by GC-MS. Wetenschappelijke rapporten, 2018. 8(1): p. 5539.
Xiao, L., et al., Silencing ACTG1 expression induces prostate cancer epithelial mesenchymal transition through MAPK/ERK signaling pathway. DNA en Celbiologie, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
Gogacz, M., et al., Anticancer effects of propolis extracts obtained with the cold separation method on PC-3 and DU-145 prostate cancer cell lines. Moleculen, 2022. 27(23): p. 8245.
Kar, F., et al., Betaine suppresses cell proliferation by increasing oxidative stress-mediated apoptosis and inflammation in DU-145 human prostate cancer cell line. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.