DLD-1-cellen: Toepassingen en inzichten van DLD-1-cellen in onderzoek naar colorectale kanker

DLD-1 is een menselijke colorectale carcinoomcellijn die vaak wordt gebruikt in kankeronderzoek. Het is een waardevol instrument voor het onderzoeken van verschillende aspecten van darmkanker, waaronder tumorontwikkeling, progressie, onderliggende moleculaire mechanismen en de respons op therapeutische middelen. DLD-1 is dus bij uitstek geschikt voor het begrijpen van de ziekte en het ontwikkelen van potentiële behandelingsstrategieën.

Dit artikel geeft belangrijke informatie over de DLD-1 cellijn die je moet weten voordat je ermee gaat werken. Aan bod komen:

Algemene kenmerken en oorsprong van DLD-1 cellen
Informatie over het kweken van de DLD-1 cellijn
DLD-1 cellijn: Voordelen & beperkingen
Onderzoekstoepassingen van DLD-1 cellijn
Onderzoekspublicaties over DLD-1 cellen
Hulpmiddelen voor DLD-1-cellijn: Protocollen, video's en meer

1. Algemene kenmerken en oorsprong van DLD-1 cellen

Voordat een onderzoeker met een cellijn aan de slag gaat, moet hij in de eerste plaats kijken naar de oorsprong en de algemene eigenschappen ervan. Dit artikel geeft een gedetailleerde introductie tot de DLD-1 cellijn. De volgende veelgestelde vragen worden behandeld: Wat zijn DLD-1 cellen? Wat is een DLD-1 kankercellijn? Wat zijn de mutaties in de DLD-1 cellijn? Wat is de grootte van een DLD-1-cel? Wat is de morfologie van DLD-1-cellen?

DLD-1, een darmkankercellijn, is afkomstig uit de dikke darm van een 67-jarige mannelijke patiënt met colorectaal adenocarcinoom. Ze werd geïsoleerd door D.L. Dexter en collega's in 1977-1979. Deze cellijn heeft dezelfde oorsprong als de HCT-8, HCT-15 en HRT-18 cellijnen.
Net als colorectale kankers hebben DLD-1 cellen een fenotype van microsatellietinstabiliteit [1].
DLD-1-mutaties omvatten KRAS, P53, BRAF, BRCA1 en BRCA2. Vanwege de DLD-1 P53-status, DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 en DLD-1 KRAS-mutatie worden deze cellen beschouwd als ideaal voor kankeronderzoek.
Deze cellen hebben een epitheliale morfologie.
De DLD-1 cellijn is ongeveer 15 µm groot.
De menselijke colorectale kankercellijn DLD-1 heeft een pseudodiploïd karyotype. Ongeveer 86% van de cellen heeft een modaal chromosoomnummer van 46. Er kan echter ook polyploïdie optreden. Polyploïdie kan echter ook voorkomen bij 17,1% van de celpopulatie.

3D-weergave van een CT-colonografie of CT-scan van de dikke darm weergegeven op het scherm voor de diagnose van dikke darmkanker, darmkanker en colorectale kanker.

2.informatie over het kweken van de DLD-1 cellijn

Voordat je een cellijn gaat kweken, moet je de basisvereisten voor de celkweek kennen. In dit gedeelte worden de belangrijke punten belicht die je moet leren voordat je met de DLD-1 cellijn aan de slag gaat. Dit omvat: Wat is de DLD-1 verdubbelingstijd? Wat is het DLD-1 kweekmedium? Wat is de zaaidichtheid van DLD-1 cellen? Hoe kweek je DLD-1 cellen?

Belangrijke punten voor het kweken van DLD-1 cellen

Verdubbelingstijd:	De DLD-1 verdubbelingstijd is ongeveer 15 uur.
Adherent of in suspensie:	DLD-1 is een adherente menselijke darmkankercellijn. De cellen groeien in monolayers.
Zaaidichtheid:	DLD-1 cellen worden uitgezaaid bij een dichtheid van 1 tot 2 x¹⁰⁴ ^cellen/cm2. Adherente cellen worden gewassen met 1x fosfaatbuffer zoutoplossing (PBS) en geïncubeerd met passagingoplossing (Accutase) bij kamertemperatuur. Na incubatie van 8 tot 10 minuten worden losgemaakte cellen toegevoegd aan het kweekmedium en gecentrifugeerd. De celpellet wordt vervolgens voorzichtig geresuspendeerd en de cellen worden in nieuwe kweekvaten met groeimedium gegoten.
Groeimedium:	RPMI 1640 met mediumsupplementen, waaronder 10% foetaal runderserum FBS, 2,1 mM stabiele glutamine en 2,0 g/L NaHCO3 wordt gebruikt om DLD-1 cellen te kweken. Het medium moet 2-3 keer per week worden vervangen.
Groeicondities:	DLD-1 culturen worden onderhouden in een 37 ° C vochtige incubator met een 5% CO2 toevoer.
Opslag:	DLD-1-cellen worden opgeslagen in de dampfase van vloeibare stikstof of in een elektrische vriezer voor ultralage temperaturen (bij temperaturen lager dan -150°C).
Invriesproces en medium:	CM-1 of CM-ACF invriesmedium kan gebruikt worden om de DLD-1 cellen in te vriezen. Er wordt altijd een langzaam vriesproces aanbevolen, waarbij de temperatuur geleidelijk met 1°C daalt, zodat de cellen niet in shock raken en hun levensvatbaarheid wordt beschermd.
Ontdooiproces:	Bevroren cellen worden ontdooid in een waterbad dat vooraf is ingesteld op een temperatuur van 37 °C gedurende 40 tot 60 seconden totdat er een klein ijsklontje overblijft. Daarna worden de cellen toegevoegd aan een vers medium en gecentrifugeerd. Deze stap is nodig om bestanddelen van het vriesmedium uit de cellen te verwijderen. De verzamelde cellen worden geresuspendeerd in een groeimedium en in de kolf gedoseerd om te groeien.
Bioveiligheidsniveau:	De DLD-1 cellijn wordt onderhouden in de bioveiligheidsniveau 1 laboratoria.

DLD-1 cellen waargenomen bij een vergroting van 10x en 20x, waarbij hun karakteristieke epitheliale morfologie zichtbaar is.

3.dLD-1 cellijn: Voordelen en beperkingen

In dit gedeelte van het artikel bespreken we de voordelen en beperkingen van de DLD-1 darmkankercellijn.

Voordelen

De belangrijkste voordelen van de DLD-1 cellijn zijn:

Colorectaal Kanker Model	DLD-1 cellen bezitten mutaties die vaak worden aangetroffen bij patiënten met dikkedarmkanker, zoals de DLD-1 KRAS-mutatie, DLD-1 BRCA en DLD-1 BRCA2. Deze relevantie maakt ze tot een klinisch geschikt celmodel voor het bestuderen van deze ziekte.
Tumorigene cellijn	DLD-1 cellen zijn tumorigeen. Ze kunnen tumoren veroorzaken wanneer ze in naakte muizen worden geïnjecteerd. Daarom gebruiken onderzoekers deze cellen om xenograft-tumormodellen te ontwikkelen die helpen bij het onderzoeken van tumorvorming, -ontwikkeling en -progressie in vivo.

Beperkingen

De beperkingen van de DLD-1 cellen zijn:

Heterogeniteit

DLD-1 colonkankercelpopulaties vertonen genetische en fenotypische heterogeniteit. Dit kan de generaliseerbaarheid van onderzoeksresultaten beïnvloeden.

4.onderzoekstoepassingen van DLD-1 cellijn

DLD-1 cellijn biedt een scala aan toepassingen in kankeronderzoek. Enkele prominente toepassingen worden in dit gedeelte besproken.

Kankeronderzoek: DLD-1 cellen dienen als een waardevol in vitro model voor het begrijpen van de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan de groei, ontwikkeling en progressie van colorectale kanker. Bovendien worden ze gebruikt voor het bestuderen van genexpressie, signaalroutes en de invloed van specifieke genetische mutaties op het gedrag van kankercellen. Onderzoek uit 2022 toonde aan dat de PI3K/Akt/YAP signaleringscascade de migratie en invasie van de DLD-1 colorectale kanker cellijn reguleert [2].
Ontwikkeling van geneesmiddelen: Onderzoekers gebruiken de DLD-1 cellijn om de effectiviteit van anti-kanker medicijnen te testen en hun potentieel voor de behandeling van darmkanker te evalueren. Dit helpt bij het ontwikkelen van medicijnen en het efficiënt bestrijden van de ziekte. In een onderzoek uit 2022 werd de DLD-1 kankercellijn gebruikt en werd de antikankeractiviteit onderzocht van silicium ftalocyaninen, chemisch gesynthetiseerde verbindingen. De onderzoeksresultaten suggereerden dat deze verbindingen krachtige antikankermiddelen zijn [3]. Interessant genoeg werd in een ander onderzoek het antikankerpotentieel gevonden van een probiotisch afgeleid P8-eiwit met behulp van DLD-1-cellen [4].

€ 430,00*

Inhoud: 1.5 milliliter

Prijzen excl. btw plus verzendkosten

cryovial

Productnummer: 300220

5.onderzoekspublicaties over DLD-1 cellen

In dit gedeelte worden enkele interessante en vaak geciteerde publicaties met de DLD-1 coloncarcinoomcellijn uitgelicht.

Flavonoïde glycoside diosmine induceert apoptose en celcyclusstilstand in DLD-1 menselijke colonkanker cellijn

Deze publicatie staat in het Journal of Biologically Active Products van Nature (2022). Uit het onderzoek bleek dat diosmine, een flavonoïde, celdood induceerde in DLD-1-cellen en ook celcyclusstilstand veroorzaakte; het kan dus een potentieel middel tegen kanker zijn.

Bromelaïne onderdrukt effectief Kras-mutante colorectale kanker door ferroptose te stimuleren

Deze studie in Animal Cells and Systems (2018) stelde voor dat bromelaïne, een enzym, de DLD-1 KRAS-mutatie onderdrukt en krachtige cytotoxische effecten uitoefent.

Bergapten induceert G1-stilstand en pro-apoptotische cascade in colorectale kankercellen die samenhangen met de p53/p21/PTEN-as

Dit onderzoeksartikel werd in 2019 gepubliceerd in het tijdschrift "Environmental Toxicology". De studie onderzocht de anti-tumor effecten van een natuurlijke verbinding, Bergapten, met behulp van een DLD-1 corectale cellijn.

Milieuvriendelijke fabricage van nanocurcumine/Nano ijzeroxide composiet: Verbeterde in-vitro antikankeractiviteit tegen DLD-1 cellijnen

Deze studie in het Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) ontdekte dat curcumine/ijzeroxide nanocomposieten zeer effectief zijn tegen DLD-1 colorectale kankercellen.

Epibrassinolide activeert AKT om autofagie te activeren met polyaminemetabolisme in SW480 en DLD-1 darmkankercellijnen

Dit onderzoeksartikel werd in 2020 gepubliceerd in het Turkish Journal of Biology. De studie stelde voor dat een natuurproduct, epibrassinolide-gemedieerde activering van AKT in DLD-1 cellen, autofagie stimuleert die gerelateerd is aan polyamines.

6.bronnen voor DLD-1 cellijn: Protocollen, video's en meer

Hieronder volgen enkele bronnen over DLD-1 cellen:

DLD-1 transfectie: Deze video tutorial is een uitgebreide gids over DLD-1 in vitro transfectie protocol.
DLD-1 cellen: Dit onderzoeksartikel beschrijft in het kort de vereisten voor DLD-1 celkweek, inclusief media en kweekomstandigheden. Daarnaast kan het helpen bij het leren van het transfectieprotocol dat wordt gebruikt voor DLD-1 cellen.

De volgende links bevatten het protocol voor het kweken van DLD-1, van mensen afkomstige darmkankercellen.

DLD-1 cellijn: Deze website geeft basisinformatie over de DLD-1 cellijn. U leert er verschillende protocollen voor het kweken van DLD-1 cellen, waaronder subkweken en het omgaan met gecryopreserveerde en prolifererende kweken.

Referenties

Gavrilas, L.I., et al., Pro-apoptotische genen als nieuwe doelwitten voor enkelvoudige en combinatorische behandelingen met resveratrol en curcumine bij colorectale kanker. Food & function, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
Takeda, T., et al., PI3K/Akt/YAP signalering bevordert migratie en invasie vanDLD-1colorectale kankercellen. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
Farajzadeh, N., et al., Anticancer activity of novel silicon phthalocyanines against the colorectal adenocarcinoma cell line (DLD-1). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
An, B.C., et al., Anti-Cancer Roles of Probiotic-Derived P8 Protein in Colorectal Cancer Cell Line DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.