BEAS-2B-cellen - Onderzoek naar ademhalingsziekten met BEAS-2B-cellen: Een uitgebreide gids
BEAS-2B is een geïmmortaliseerde en niet-tumorigene menselijke longepitheelcellijn. Het is een uitgebreid gebruikt in vitro model om de respons van longcellen op verschillende carcinogenen en toxische stoffen te bestuderen. Daarnaast is het een waardevol onderzoeksinstrument voor het bestuderen van verschillende luchtweginfecties en ziekten, zoals COVID-19 en longcarcinomen.
In dit artikel bespreken we bijna alle aspecten van de BEAS-2B longcellijn, waaronder de oorsprong, informatie over celkweek, voordelen, nadelen en toepassingen in onderzoek. We gaan met name door:
- Oorsprong en algemene kenmerken van de BEAS-2B cellen
- BEAS-2B cellijn: Kweekinformatie
- Voordelen en nadelen van BEAS-2B cellen
- Toepassingen van de BEAS-2B cellijn in onderzoek
- BEAS-2B cellen: Publicaties
- Protocollen voor celkweek
1. Oorsprong en algemene kenmerken van de BEAS-2B cellen
Het eerste wat je zoekt in een cellijn is de oorsprong en de algemene kenmerken. Hierin leer je de opvallende kenmerken en oorsprong van BEAS-2B humane bronchiale epitheelcellen. Je zult het volgende bestuderen: Wat is de BEAS-2B longcellijn? Wat voor celtype is Beas 2B? Wat is de oorsprong van BEAS-2B cellen?
- BEAS-2B, de bronchiale epitheelcellijn, werd in 1988 ontwikkeld uit een niet-kankerachtig menselijk longweefsel door de groep van Curtis C. Harris [1].
- BEAS-2B cellen hebben een epitheelachtige morfologie.
HBEpC versus BEAS-2B
HBEpC zijn menselijke bronchiale epitheelcellen. Net als BEAS-2B zijn het normale menselijke bronchiale epitheelcellen. Ze hebben echter een beperkte levensduur in vergelijking met geïmmortaliseerde BEAS-2B. Beide cellijnen kunnen worden gebruikt om longbiologie, toxicologie en ziektemodellering te bestuderen.
2.bEAS-2B cellijn: Kweekinformatie
Het kweken van informatie van een cellijn kan je werk ermee vergemakkelijken. In dit artikel leer je alle basisbeginselen voor het kweken van de BEAS-2B longcellijn. We zullen met name weten: Wat is de verdubbelingstijd van BEAS-2B? Wat is BEAS-2B media? Is de BEAS-2B cellijn adherent? Hoe kweek je BEAS-2B cellen?
Belangrijkste punten voor het kweken van BEAS-2B cellen
|
Verdubbelingstijd: |
De verdubbelingstijd van de BEAS-2B populatie is ongeveer 26 uur. |
|
Adherent of in suspensie: |
BEAS-2B is een epitheelachtige adherente cellijn. |
|
Celdichtheid: |
De celdichtheid die wordt aanbevolen voor de BEAS-2B cellijn is 1 tot 2 ×104 cellen/cm2. Adherente BEAS-2B-cellen worden gespoeld met fosfaatbufferzout en enkele minuten bij omgevingstemperatuur met Accutase geïncubeerd. Nadat de cellen loskomen, wordt verse media toegevoegd en worden de cellen verzameld door middel van centrifugeren. De geoogste cellen worden voorzichtig geresuspendeerd en in de nieuwe kolf gegoten om te groeien. |
|
Groeimedium: |
BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) medium met 10% foetaal runderserum wordt gebruikt voor het kweken van de BEAS-2B longcellijn. De media moeten elke 2 tot 3 dagen worden vervangen. |
|
Groeicondities: |
BEAS-2B cultuur wordt onderhouden bij 37 ° C in een vochtige incubator met een continue toevoer van 5% CO2. |
|
Opslag: |
Bevroren BEAS-2B cel flacons kunnen worden opgeslagen in de dampfase van vloeibare stikstof of een elektrische vriezer onder -150°C temperatuur. |
|
Invriesproces en medium: |
CM-1 of CM-ACF invriesmedia worden gebruikt voor het invriezen van de BEAS-2B longcellijn. De cellen worden bevroren door slechts een temperatuurdaling van 1°C per minuut toe te staan om de levensvatbaarheid van de cellen te beschermen. Dit type methode wordt langzaam invriezen genoemd. |
|
Ontdooiproces: |
Bevroren of gecryopreserveerde BEAS-2B-culturen worden ontdooid in een waterbad van 37 °C met een antimicrobiële stof gedurende 40 tot 60 seconden. Daarna worden de cellen toegevoegd met media en kunnen ze direct in nieuwe kolven worden gekweekt of worden gecentrifugeerd om de bestanddelen van de vriesmedia te verwijderen. Daarna worden de verzamelde cellen geresuspendeerd en gekweekt. In het eerste geval wordt het vriesmedium na 24 uur verwijderd. |
|
Bioveiligheidsniveau: |
Biosafety level 1-laboratoria zijn vereist voor het hanteren van BEAS-2B-culturen. |
3.voordelen en nadelen van BEAS-2B cellen
Net als andere cellijnen hebben BEAS-2B cellen ook een aantal voor- en nadelen. Enkele daarvan worden hieronder besproken.
Voordelen
De voordelen van de BEAS-2B cellijn zijn onder andere:
|
Geïmmortaliseerde cellijn |
De BEAS-2B menselijke bronchiale epitheelcellijn is geïmmortaliseerd. Daarom blijft ze groeien zonder senescentie te bereiken. Deze BEAS-2B celkarakteristiek elimineert de noodzaak voor herhaalde extractie van primaire menselijke longepitheelcellen met een kortere levensduur. |
|
Gemakkelijk te kweken |
BEAS-2B culturen zijn gemakkelijk te onderhouden. De cellen groeien en vermeerderen zich moeiteloos in standaard kweekomstandigheden. Er zijn geen moeilijke of gecompliceerde eisen voor het kweken van cellen. |
|
Menselijke oorsprong |
De BEAS-2B cellijn heeft een menselijke oorsprong en relevantie. Daarom is het een ideaal in vitro model om de reacties, het gedrag en de processen van menselijke luchtwegepitheelcellen te bestuderen. |
Nadelen
De nadelen van de BEAS-2B longcellijn zijn:
|
Getransformeerde menselijke longepitheelcellen |
BEAS-2B cellen zijn getransformeerd met Ad12-SV40 2B virus, wat hun gedrag en reacties kan veranderen in vergelijking met de oorspronkelijke bronchiale epitheelcellen uit menselijk longweefsel. |
4.toepassingen van BEAS-2B cellijn in onderzoek
BEAS-2B cellijn biedt verschillende toepassingen in biomedisch onderzoek. Enkele veelvoorkomende toepassingen van BEAS-2B cellen zijn:
- Toxicologie: BEAS-2B cellen worden vaak gebruikt om de genotoxiciteit en cytotoxiciteit van verschillende toxines, milieuverontreinigende stoffen en chemicaliën te onderzoeken. Onderzoekers gebruiken deze bronchiale epitheelcellijn om de schadelijke effecten van deze stoffen op de longgezondheid te evalueren. Daarnaast bestuderen ze ook de onderliggende moleculaire mechanismen. Zo werd in een onderzoek uit 2021 de toxiciteit van metallisch cadmium in de BEAS-2B cellijn beoordeeld. Uit de onderzoeksresultaten bleek dat cadmium celdood en mitochondriale schade in de BEAS-2B longcellijn induceerde via modulatie van de MAPK-signaleringsroute [2]. Een ander onderzoek gebruikte de BEAS-2B cellijn om de toxiciteit van zinkoxide nanodeeltjes onder oxidatieve stress te evalueren [3].
- Modellering van ademhalingsziekten: De BEAS-2B cellijn is een geweldig onderzoeksinstrument en in vitro model voor het bestuderen van ademhalingsaandoeningen zoals chronische obstructieve longziekte (COPD), astma, longkanker en virale infecties zoals SARS-CoV-2. Onderzoekers induceren ziektegerelateerde aandoeningen in de BEAS-2B cellijn en bestuderen onderliggende cellulaire en moleculaire mechanismen. Dit helpt bij het identificeren van potentiële doelwitten voor geneesmiddelen en het ontwikkelen van gepersonaliseerde therapieën. Onderzoek uit 2022 gebruikte de BEAS-2B cellijn en bestudeerde de rol van oestrogeen en zijn receptoren in SARS-CoV-2 infectie. De bevindingen toonden aan dat een hogere expressie van de GPER1 oestrogeenreceptor de virale belasting van BEAS-2B SARS-CoV-2 vermindert. Daarom kan het betrokken zijn bij de SARS-CoV-2 virale infectie of replicatie [4].
5.bEAS-2B cellen: Publicaties
Hieronder volgen enkele interessante en meest geciteerde onderzoeken met BEAS-2B cellen.
Toxiciteit van grafeen in normale menselijke longcellen (BEAS-2B)
Dit onderzoek werd in 2011 gepubliceerd in het Journal of Biomedical Nanotechnology. Het onderzoek stelde dat grafietoxide apoptose en cytotoxiciteit induceert in de normale bronchiale epitheelcellijn (BEAS-2B).
Dit onderzoeksartikel werd gepubliceerd in het Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Deze studie onderzocht het therapeutische potentieel van naringenine, een flavonoïde, in de BEAS-2B cellijn. De bevindingen suggereerden dat naringenine de BEAS-2B longcellen beschermt tegen paraquat-geïnduceerde toxiciteit of oxidatieve schade.
Deze studie werd gepubliceerd in Inhalation Toxicology (2011). Hierin beoordeelden de onderzoekers het toxiciteitseffect van magnetische nanodeeltjes met amorfe silica coatings in de BEAS-2B cellijn in vitro.
In dit artikel in Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) werd voorgesteld dat ursodeoxycholzuur abnormale migratie van luchtwegepitheelcellen kan belemmeren en schade veroorzaakt door de interactie tussen het SARS-CoV-2 spike-eiwit en ACE-2 kan voorkomen. Het kan dus helpen bij het herstel van de epitheliale basale laag.
Effecten van radon op miR-34a-geïnduceerde apoptose in menselijke bronchiale epitheelcellen BEAS-2B
Deze studie werd in 2019 gepubliceerd in het Journal of Toxicology and Environmental Health. De onderzoeksresultaten stellen dat chronische blootstelling aan radon carcinogenese in menselijke bronchiale epitheelcellen (BEAS-2B) kan bevorderen door microRNA-34a te activeren.
6.protocollen voor celkweek
Het celkweekprotocol voor BEAS-2B cellen wordt hier vermeld.
- BEAS-2B subculturen: Dit document helpt je meer te leren over BEAS-2B media en subcultuurprocedures.
- BEAS-2B cellijn: Deze website bevat alle basisinformatie die u nodig hebt om aan de slag te gaan met de BEAS-2B cellijn, inclusief de media en protocollen voor het hanteren van prolifererende en cryopreserve-culturen.
Referenties
- Han, X., et al., Menselijke longepitheelcellen BEAS-2B vertonen kenmerken van mesenchymale stamcellen. PLoS One, 2020. 15(1): p. e0227174.
- Cao, X., et al., Cadmium induced BEAS-2B cells apoptosis and mitochondria damage via MAPK signaling pathway. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., Toxicity of zinc oxide (ZnO) nanoparticles on human bronchial epithelial cells (BEAS-2B) is accentuated by oxidative stress. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, A.J., et al., Overexpressie van oestrogeenreceptor GPER1 en G1-behandeling vermindert SARS-CoV-2-infectie in BEAS-2B bronchiale cellen. Moleculaire en cellulaire endocrinologie, 2022. 558: p. 111775.