B16-F10 cellen - Onderzoek naar de B16-F10 melanoomcellijn in metastaseonderzoek
B16-F10 cellen vormen een melanoomcellijn afkomstig van C57BL/6J muizen. Ze worden veel gebruikt in huidkankeronderzoek. Onderzoekers gebruiken deze cellen om de ontwikkeling en progressie van tumoren en therapeutische interventies te bestuderen. Dit artikel behandelt de fundamentele aspecten van B16-F10 melanoomcellen. Met name
- Oorsprong en algemene kenmerken van de B16-F10 cellijn
- Informatie over het kweken van B16-F10 cellen
- B16-F10 cellen: Voordelen & nadelen
- Onderzoekstoepassingen van B16-F10 cellen
- Publicaties met B16-F10 cellijn
- Bronnen voor B16-F10 cellijn: Protocollen, video's en meer
1. Oorsprong en algemene kenmerken van de B16-F10 cellijn
Dit gedeelte geeft u inzicht in de oorsprong en onderscheidende kenmerken van B16F10 melanoom tumorcellen. Het zal je helpen om de cellijn efficiënt te gebruiken in je onderzoekswerk. Je leert vooral Wat zijn B16-F10 cellen? Waar is B16F10 van afgeleid? Wat is de morfologie van de B16F12 cellijn? Wat is de grootte van de B16F10 cel?
- B16-F10 is een subkloon van de B16-tumorcellijn die is afgeleid van huidweefsel van C57BL/6J-muizen. Hierin werden B16F10 melanoomcellen ontwikkeld na intraveneuze injectie van de B16-lijn in immuungecompromitteerde of syngene muizen. Deze cellen werden geselecteerd op hun vermogen om in vivo gemetastaseerde longkolonies te vormen en vervolgens na tien cycli van longkolonievorming in vitro vastgesteld [1]. Het werd ontwikkeld door Fidler en collega's in 1976.
- B16-F10 cellijnen zien er epitheelachtig en spoelvormig uit.
- De geschatte grootte van B16-F10 cellen is 15,4 ± 1,4 μm [2].
B16-F1 en B16-F10 cellen
B16-F1- en B16-F10-cellen zijn afgeleid van de B16-oudercellijn. Beide zijn van dezelfde oorsprong en hebben vrijwel dezelfde kenmerken. Het belangrijkste verschil is echter hun metastatische vermogen. B16-F10 cellen hebben een hoog, terwijl B16-F1 een laag metastatisch vermogen heeft [3].
2.informatie over het kweken van B16-F10 cellen
Voordat je een cellijn behandelt en kweekt, moet je de verdubbelingstijd, groeimedia, condities en celkweekprotocollen kennen. Dit gedeelte bespreekt: Wat is de verdubbelingstijd van b16-f10 cellen? Hoe kweek je B16-F10 cellen? Wat zijn de B16-F10 celmedia? Welke kweekomstandigheden worden aanbevolen voor B16-F10 cellen?
Belangrijkste punten voor het kweken van B16-F10 cellen
|
Verdubbelingstijd: |
De verdubbelingstijd van B16-F10 cellen is ongeveer 20,1 uur. Dit kan variëren van 17 tot 21 uur, afhankelijk van de kweekomstandigheden. |
|
Aanwezig of in suspensie: |
B16-F10 is een adherente cellijn. De cellen groeien snel en maken monolagen. |
|
Splitsingsverhouding: |
B16-F10 cellen worden gesubcultiveerd in een splitratio van 1:2 tot 1:4. De cellen worden gewassen met fosfaatbuffer zoutoplossing (1x) en vervolgens geïncubeerd met Accutase passaging-oplossing gedurende 8 tot 10 minuten bij omgevingstemperatuur. Cellen worden toegevoegd met vers medium en gecentrifugeerd. De geoogste celpellet wordt opnieuw gesuspendeerd en de cellen worden in de nieuwe kolf met vers kweekmedium gedispergeerd volgens de splitsingsverhouding. |
|
Groeimedium: |
B16-F10 cellen worden gekweekt in DMEM-medium. De media is aangevuld met 10% FBS, 4 mM L-Glutamine, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L Glucose en 1,0 mM Natriumpyruvaat voor ideale celgroei. De media moeten 2 tot 3 keer per week worden vervangen. |
|
Groeiconditie: |
B16-F10 cellen worden gekweekt in een vochtige incubator bij 37 °C met 5% CO2. |
|
Opslag: |
Bevroren cellen worden bewaard bij -150 °C in een elektrische vriezer met ultralage temperatuur of in de dampfase van vloeibare stikstof om de levensvatbaarheid van de cellen te behouden. |
|
Invriesproces en medium: |
B16-F10 cellen worden ingevroren in CM-1 of CM-ACF media voor opslag. Hiervoor wordt een langzaam vriesproces aanbevolen dat slechts een temperatuurdaling van 1°C per minuut toestaat om te voorkomen dat de cellen een schok krijgen. |
|
Ontdooiproces: |
Bevroren B16-F10 cellen worden ontdooid in een vooraf ingesteld waterbad van 37°C gedurende 40 tot 60 seconden. Vervolgens worden de cellen toegevoegd aan vers medium en gecentrifugeerd om de bestanddelen van de vriesmedia te verwijderen. De verzamelde cellen worden geresuspendeerd in een groeimedium en in kolven gegoten om gekweekt te worden. |
|
Bioveiligheidsniveau: |
Een laboratorium met bioveiligheidsniveau 1 is vereist voor het hanteren en onderhouden van de B16-F10 cellijn. |
3.b16-F10 cellen: Voor- en nadelen
Net als andere cellijnen heeft ook B16-F10 een aantal voor- en nadelen. Enkele belangrijke voor- en nadelen van deze huidmelanoomcellijn worden in dit gedeelte besproken.
Voordelen
De B16-F10 cellijn wordt veel gebruikt in kankeronderzoek. De voordelen van B16-F10 cellen zijn:
|
Metastatisch potentieel |
Huidmelanoom B16F10 cellen hebben een hoog metastatisch potentieel, waardoor ze waardevol zijn voor het bestuderen van kankermetastase en onderliggende mechanismen. |
|
In vitro tumormodel |
B16-F10 cellen dienen als een in vitro model voor het bestuderen van de progressie en groei van kanker en helpen onderzoekers de cellulaire en moleculaire mechanismen die kanker veroorzaken te begrijpen. |
Nadelen
De nadelen van de B16-F10 cellijn zijn:
|
Van muizen afgeleide cellijn |
B16-F10 is een van muizen afkomstige cellijn, wat de toepasbaarheid beperkt tot studies die specifiek op mensen zijn gericht. Onderzoeksresultaten van deze cellen kunnen niet altijd echt worden vertaald naar de menselijke biologie. |
4.onderzoekstoepassingen van B16-F10 cellen
De B16-F10 cellijn wordt veel gebruikt in kankeronderzoek. Enkele veelbelovende toepassingen van deze cellijn worden hier besproken.
- Kankeronderzoek: De B16-F10 cellijn is een waardevol model om kankercelprocessen te bestuderen, waaronder proliferatie, invasie, migratie en celdood of apoptose. Daarnaast helpt het onderzoekers om inzicht te krijgen in moleculaire mechanismen en routes die deze cellulaire processen sturen. Een onderzoek uit 2018 onderzocht de rol van CCR5 (C-C chemokine receptor type vijf) in de epitheliale naar mesenchymale celtransitie en metastase van melanoomcellen. Uit de bevindingen bleek dat CCR5-deficiëntie de tumorgroei en metastase beperkt, terwijl een hoge expressie leidt tot een versterkte groei en metastase van B16-F10-cellen. Verder onderzoek toonde aan dat CCR5 de TGFβ1 expressie reguleert, die de PI3K/AKT/GSK3β signalering reguleert om de epitheliale naar mesenchymale transitie en celmigratie te bevorderen [4].
- Geneesmiddelenonderzoek en -ontwikkeling: B16F10 melanoom tumorcellen zijn zeer agressief en daarom geschikt voor het testen van potentiële medicijnen en behandelingen tegen tumoren. Onderzoekers gebruiken deze cellen en beoordelen het effect van verschillende verbindingen op celgroei, proliferatie en metastase, wat de ontwikkeling van geneesmiddelen helpt. Een onderzoek dat in 2018 werd uitgevoerd door Valentina Nanni en collega's onderzocht de therapeutische effecten van Spartium junceum bloemen hydroalcoholisch extract. De studie stelde voor dat het bloemenextract effectief was in het induceren van senescentie in B16-F10-cellen, wat leidt tot onderdrukking van celgroei en melanogenese, dus kan het potentiële antikankeractiviteiten uitoefenen [5].
5.publicaties met B16-F10 cellijn
Hier volgen enkele belangrijke onderzoekspublicaties met de B16-F10 melanoomcellijn:
Deze studie werd gepubliceerd in Nutrients (2020). Er werd voorgesteld dat Sorghum bicolor ethanolisch extract een antimelanogene werking heeft in huidmelanoom B16/F10 cellen.
Calcitriol remt proliferatie en induceert mogelijk apoptose in B16-F10 cellen
Het onderzoek gepubliceerd in Medical Science Monitor Basic Research (2022) stelde dat calcitriol antitumoreffecten uitoefent in B16-F10 melanoomcellen door de proliferatie te remmen en apoptose te induceren.
Dit artikel is gepubliceerd in Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). De bevindingen onthulden dat cardolen, resorcinol lipiden, intense cytotoxiciteit uitoefenen op de B16-F10 cellijn.
De studie gepubliceerd in Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) onderzocht het antimetastatische potentieel van Ginkgo biloba exocarp extract met behulp van B16-F10 cellen.
Dit onderzoek in World Neurosurgery (2018) stelde voor dat thymochinon een effectieve therapie kan zijn tegen intracerebrale metastatische laesies, omdat het de groei van B16-F10-cellen onderdrukt en apoptose induceert.
6.bronnen voor B16-F10-cellijn: Protocollen, video's en meer
B16F10 endotheelcellen worden veel gebruikt in huidkankeronderzoek. Hier zijn enkele online bronnen die de kweek- en transfectieprotocollen uitleggen:
- B16F10 melanoomcellen transfectie: Deze videotutorial kan je helpen bij het leren van het transfectieprotocol voor B16-F10 cellen.
- B16-F10 transfectie: Dit document legt het in vitro DNA-transfectieprotocol voor huidmelanoom B16F10-cellen uit.
De volgende link bevat het celkweekprotocol voor B16-F10 cellen:
- B16-F10 subculturen: Deze website bevat nuttige informatie over B16F10 melanoom tumorcellen. Het bevat groeimedia, verdubbelingstijd, kweekomstandigheden en protocol voor het subkweken van cellen en het omgaan met gecryopreserveerde en proliferatieve kweken.
Referenties
- Poste, G., et al., Comparison of the metastatic properties of B16 melanoma clones isolated from cultured cell lines, subcutaneous tumors, and individual lung metastases. Cancer Research, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono, and S. Sugita, Mechanophenotyping of B16 Melanoma Cell Variants for the Assessment of the Efficacy of (-)-Epigallocatechin Gallate Treatment Using a Tapered Microfluidic Device. Micromachines, 2019. 10(3): p. 207.
- Danciu, C., et al., Gedrag van vier verschillende B16 murine melanoom celsublines: C57BL/6J huid. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73-80.
- Liu, J., et al., High expression of CCR5 in melanoma enhances epithelial-mesenchymal transition and metastasis via TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): p. 481-493.
- Nanni, V., et al., Hydroalcoholisch extract van Spartium junceum L. bloemen remt groei en melanogenese in B16-F10 cellen door senescentie te induceren. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.