AGS-cellen - Verkenning van maagadenocarcinoom AGS-cellen in kankeronderzoek

AGS cellen vormen een menselijke adenocarcinoom cellijn die veel wordt gebruikt in biomedisch onderzoek. Ze wordt met name gebruikt om de biologie van maagkanker te bestuderen, waaronder tumorgroei, ontwikkeling, progressie en therapeutische interventies. Daarnaast wordt het gebruikt om gastheer-pathogeen interacties te onderzoeken.

Dit artikel bespreekt de basisprincipes van maasepitheliale AGS-cellen. In het bijzonder wordt ingegaan op:

  1. Algemene kenmerken en oorsprong van AGS-cellen
  2. Kweekinformatie over AGS cellijn
  3. AGS cellijn: Voordelen & beperkingen
  4. Toepassingen van AGS cellen
  5. Onderzoekspublicaties over AGS cellijn
  6. Bronnen voor AGS cellijn: Protocollen, video's en meer

1.algemene kenmerken en oorsprong van AGS cellen

Kennis over de oorsprong en algemene kenmerken van een cellijn is noodzakelijk voordat je ermee gaat werken. In dit gedeelte wordt het volgende behandeld: Wat zijn AGS-cellen? Wat is de oorsprong van de AGS cel? Wat is de morfologie van de AGS kankercel lijn?

  • De AGS cellijn is afgeleid van het maagweefsel van een 54-jarige Kaukasische vrouw met maagadenocarcinoom. Ze werd geïsoleerd in 1979 [1].
  • AGS-cellen hebben een epitheliale morfologie.
  • De maagepitheelcellen van AGS zijn hyperdiploïd. Het modale chromosoomnummer voor AGS-cellen is 49, wat in bijna 60% van de cellen voorkomt. Polyploïdie komt ook voor in ongeveer 3,6% van de cellen.

Carcinoom van de maag in dwarsdoorsnede onder de microscoop.

2.kweekinformatie over AGS cellijn

Voor een juiste behandeling en beheer van een cellijn moet je de basisbegrippen over het kweken kennen. In het bijzonder moet je het volgende leren: Wat is de AGS celverdubbelingstijd? Wat is het AGS celmedium? Hoe subcultureer je AGS cellen? Welke invriesmedia worden gebruikt voor maagepitheel AGS cellen?

Belangrijke punten voor het kweken van AGS cellen

Verdubbelingstijd:

De AGS celverdubbelingstijd varieert tussen 24 en 48 uur.

Adherent of in suspensie:

AGS cellen zijn adherent. Ze groeien in monolayers.

Zaaidichtheid:

AGS cellen worden gezaaid met een celdichtheid van 1 x104 cellen/cm2. Bij deze dichtheid vormen de cellen binnen 3 tot 5 dagen een confluente monolaag. Na het verwijderen van oude media worden de cellen gespoeld met 1 x PBS en geïncubeerd met Accutase-dissociatieoplossing. De losgemaakte cellen werden geresuspendeerd in kweekmedia en gecentrifugeerd. De celpellet werd opnieuw geresuspendeerd en na het tellen van de AGS-cellen werden ze in de nieuwe kolf gedoseerd om te groeien.

Groeimedium:

DMEM media met 10% FBS, 4 mM L-Glutamine, 4,5 g/L Glucose, 1,5 g/L NaHCO3 en 1,0 mM natriumpyruvaat wordt gebruikt om AGS cellen te kweken. Het medium moet 2 tot 3 keer per week worden vervangen.

Groeicondities:

AGS cellen worden bewaard in een vochtige incubator (bij 37°C temperatuur) met een 5% CO2 toevoer.

Opslag:

Bevroren AGS cellen worden voor langere tijd bewaard in elektrische vriezers bij een temperatuur onder -150°C of in de dampfase van vloeibare stikstof.

Invriesproces en medium:

CM-1 of CM-ACF medium wordt gebruikt om AGS cellen in te vriezen. Het invriezen van de cellen gebeurt via een langzaam vriesproces dat slechts een temperatuurdaling van 1°C per minuut toestaat en de levensvatbaarheid van de cellen beschermt.

Ontdooiproces:

Bevroren maagepitheelcellen worden snel geroerd in een waterbad van 37°C gedurende 40 tot 60 seconden. Ontdooide cellen worden geresuspendeerd in verse kweekmedia en in nieuwe kolven gegoten om te groeien. Na 24 uur incubatie wordt de media vernieuwd om bevriezende mediacomponenten te verwijderen. In tegenstelling hiermee worden ontdooide cellen gecentrifugeerd en worden de vriesmedia-elementen verwijderd. Vervolgens worden de geoogste cellen opnieuw gesuspendeerd en in de kolf met het kweekmedium gedoseerd.

Bioveiligheidsniveau:

Laboratoriuminstellingen met bioveiligheidsniveau 2 zijn essentieel voor het kweken van AGS-cellen.

AGS-cellen bij 20x vergroting.

3.aGS-cellijn: Voordelen en beperkingen

In dit artikel worden enkele van de belangrijkste voordelen en beperkingen van AGS cellen toegelicht.

Voordelen

De belangrijkste voordelen van maagepitheel AGS cellen zijn:

Gemakkelijk te kweken

De AGS-cellijn voor maagcarcinoom is gemakkelijk te onderhouden in celkweeklaboratoria. Er zijn geen ingewikkelde en lastige eisen aan de celkweek. Bovendien vertoont het goede groeikenmerken, waardoor het een ideale keuze is voor het bestuderen van de biologie van maagkanker.

Relevantie voor maagkanker

AGS-cellen zijn afkomstig van humaan maagadenocarcinoom, waardoor ze op grote schaal worden gebruikt om de biologie van maagcarcinoom en therapeutische interventies te bestuderen.

Beperkingen

De beperkingen van de AGS-cellijn zijn:

In vitro celmodel

AGS cellen worden gekweekt in biomedische onderzoekslaboratoria onder kunstmatige omstandigheden. Daarom repliceren ze mogelijk niet volledig de in vivo maagkankermicro-omgeving en andere cel- en moleculaire interacties.

4.toepassingen van AGS-cellen

AGS cellen worden specifiek gebruikt om de biologie van maagkanker te bestuderen. Ze hebben veel andere veelbelovende toepassingen op biomedisch gebied. Enkele van de interessante onderzoekstoepassingen van AGS cellen zijn:

  • Maagkankeronderzoek: AGS-cellen zijn een uitstekend onderzoeksinstrument om cel- en moleculaire mechanismen te onderzoeken die ten grondslag liggen aan de groei, metastase en invasie van maagkanker. Onderzoekers gebruiken maagepitheelcellen ook om verschillende cellulaire processen, genetische mutaties en signaalwegen in de ontwikkeling van maagkanker te bestuderen. Uit een studie in Oncology Reports (2019) bleek dat microRNA-183-5p.1 de proliferatie, migratie en invasie van tumorcellen bevordert door de Bcl 2/P53-signaleringscascade te remmen. Daarnaast downreguleert het ook het TPM1-gen om deze effecten uit te oefenen. Daarom worden zowel microRNA als TPM1 voorgesteld als effectieve moleculaire doelwitten voor de ontwikkeling van gerichte anti-maagkankertherapieën [2].
  • Screening op geneesmiddelen: AGS cellen zijn vaak gebruikt om nieuwe en effectieve medicijnen tegen maagkanker te screenen. Onderzoekers evalueren de cytotoxiciteit en werkzaamheid van potentiële medicijnen met behulp van de AGS-cellijn. Er is ook onderzoek gedaan naar het identificeren van nieuwe moleculaire doelwitten en het ontwikkelen van nieuwe doelgerichte therapieën om maagcarcinomen te bestrijden. Onderzoek uit 2021 maakte gebruik van AGS maagkankercellen en bestudeerde het therapeutische effect van het geneesmiddel paclitaxel. De bevindingen onthulden dat paclitaxel een mitotische catastrofe induceert, een integraal mechanisme van apoptose of celdood in AGS-cellen. Daarnaast bevorderde het ook autofagie in maagkankercellen [3].
  • Gastheer-pathogeen interacties: De AGS kankercellijn bestudeert ook gastheer-pathogeen interacties. Dit helpt onderzoekers om de cellulaire mechanismen en reacties te begrijpen die betrokken zijn bij een infectie. In een onderzoek uit 2020 werd bijvoorbeeld waargenomen dat kleine niet-coderende RNA's die aanwezig zijn in buitenmembraanblaasjes van Helicobacter pylori de afscheiding van interleukine 8 in menselijke AGS-cellen verminderen [4].

5.onderzoekspublicaties over AGS-cellijn

Dit gedeelte van het artikel gaat over een aantal interessante en meest geciteerde onderzoekspublicaties over AGS cellen.

Salidroside induceert apoptose en beschermende autofagie in menselijke maagkankercellen AGS via de PI3K/Akt/mTOR-route

In deze studie in Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) wordt voorgesteld dat salidroside, een natuurlijke verbinding, beschermende autofagie en celdood in maagepitheelcellen AGS induceert via modulatie van de PI3K/AKT/mTOR-signaleringsroute.

Astragalus polysaccharide versterkt antitumoreffecten van apatinib in AGS-cellen van maagkanker door AKT-signaleringsroute te remmen

Deze studie werd gepubliceerd in Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). Het onderzocht de synergetische antikankereffecten van astragalus polysaccharide en het geneesmiddel apatinib in AGS-cellen. Uit de bevindingen van het onderzoek bleek dat astragalus de antitumoreffecten van apatinib versterkt via het onderdrukken van AKT-signalering.

Curcuzedoalide draagt bij aan de cytotoxiciteit van Curcuma zedoaria wortelstokken tegen menselijke maagkanker AGS cellen door inductie van apoptose

Dit onderzoek in het Journal of Ethnopharmacology (2018) stelde dat curcuzedoalide, een natuurlijke verbinding uit de Curcuma zedoaria Roscoe plant, bijdraagt aan het cytotoxische potentieel tegen AGS-cellen.

Overexpressie van FOXA1 remt celproliferatie en EMT van menselijke maagkanker AGS-cellen

Deze publicatie in Gene (2018) stelde voor dat FOXA1-uptregulatie de proliferatie van AGS-gastrische adenocarcinoomcellen en de epitheliale naar mesenchymale transitie (EMT) en invasie onderdrukt.

sncRNA's verpakt door Helicobacter pylori-buitenmembraanblaasjes verminderen IL-8-secretie in menselijke cellen

Dit onderzoeksartikel werd in 2020 gepubliceerd in het International Journal of Medical Microbiology. In dit onderzoek werden AGS-cellen gebruikt om gastheer-pathogeen interacties te bestuderen. De bevindingen toonden aan dat Helicobacter pylori een aantal niet-coderende RNA bevat in zijn buitenste membraanblaasjes die de IL-8 niveaus in AGS-cellen beïnvloeden.

6.bronnen voor AGS-cellijn: Protocollen, video's en meer

Hieronder volgen enkele bronnen met AGS cellen.

De volgende link bevat het AGS celcultuur protocol.

  • AGS celcultuur protocol: Deze website bevat nuttige informatie over AGS celmedia en celkweekprotocollen. In het kort biedt het een protocol voor het subkweken van maagepitheel AGS-cellen en het hanteren van woekerende en gecryopreserveerde AGS-culturen.
  • Het subkweken van AGS-cellen: Op deze site wordt de subcultuurprocedure voor AGS-cellen in detail uitgelegd.

Referenties

  1. Phuc, B.H., et al., Comparative genomics of two Vietnamese Helicobacter pylori strains, CHC155 from a non-cardia gastric cancer patient and VN1291 from a duodenal ulcer patient. Scientific Reports, 2023. 13(1): p. 8869.
  2. Lin, J., et al., miRNA-183-5p. 1 bevordert de migratie en invasie van maagkankercellen AGS door zich te richten op TPM1 Corrigendum in/10.3892/or. 2020.7902. Oncologie rapporten, 2019. 42(6): p. 2371-2381.
  3. Khing, T.M., et al., Het effect van paclitaxel op apoptose, autofagie en mitotische catastrofe in AGS-cellen. Scientific Reports, 2021. 11(1): p. 23490.
  4. Zhang, H., et al., sncRNA's verpakt door buitenmembraanblaasjes van Helicobacter pylori verminderen IL-8-secretie in menselijke cellen. Internationaal Tijdschrift voor Medische Microbiologie, 2020. 310(1): p. 151356.

We hebben vastgesteld dat u zich in een ander land bevindt of een andere browsertaal gebruikt dan momenteel is geselecteerd. Wilt u de voorgestelde instellingen accepteren?

Sluit