A375 cellijn - Een gids voor melanoomonderzoek

A375 is een humane melanoom cellijn die veel gebruikt wordt in toxicologisch en immuno-oncologisch onderzoek. Onderzoekers gebruiken deze cellijn om kankerbiologie en signaalwegen te bestuderen, potentiële antikankermiddelen te testen of te screenen en nieuwe en effectieve therapeutica te ontwikkelen.

Oorsprong en algemene kenmerken van A375-cellen

Kennis over de oorsprong en algemene eigenschappen van een cellijn kan je helpen bij het plannen van het gebruik ervan in onderzoek. Dit gedeelte van het artikel gaat over de oorsprong en kenmerken van de A375 cellijn. Bijvoorbeeld, wat is de A375 cellijn? Wat zijn de kenmerken van de A375 cellijn? Waar komen A375 cellen vandaan? Wat is de morfologie van A375 melanoomcellen? Wat is de grootte van A375 cellen?

De huidkankercellijn A375 is ontstaan uit de explantaatkweek van een solide tumor van een 54-jarige vrouw met kwaadaardig melanoom [1].
A375 cellen hebben een epitheliale morfologie.
A375-cellen zijn relatief kleiner dan andere cellijnen. Ze hebben ruwweg een diameter van 12 µm.
De A375 melanoomcellen zijn hypotriploïd. Het modale chromosoomnummer voor deze cellijn is 62. Gewoonlijk heeft elke cel negen markerchromosomen en één kopie van de normale N2-, N6- en N22-chromosomen.

Een arts onderzoekt de gezwellen op de huid van een volwassene op huidkanker.

A375-cellen: Informatie over celkweek

A375 celculturen zijn gemakkelijk te onderhouden. Ze hebben geen lastige celkweek eisen. Deze sectie zal je helpen om de benodigde informatie over celkweek te leren. Zoals wat is de A375 verdubbelingstijd? Wat is de media van de A375 cellijn? Wat is de dichtheid van A375? Zijn A375 melanoomcellen adherent?

Belangrijke punten voor het kweken van A375 cellen

Populatieverdubbelingstijd:	De A375 verdubbelingstijd is 20 uur.
Adherent of in suspensie:	A375 is een adherente menselijke melanoomcellijn.
Zaaidichtheid:	1 x¹⁰⁴ cellen/cm2^celdichtheidis ideaal voor A375 celculturen. Adherente cellen worden gespoeld met 1 x fosfaatbuffer zoutoplossing (PBS) en geïncubeerd met passagingoplossing (Accutase). Daarna werden cellen toegevoegd met kweekmedia en gecentrifugeerd. Geoogste cellen werden geresuspendeerd in een kweekmedium en in nieuwe kolven gedistribueerd om te groeien.
Groeimedium:	DMEM wordt aanbevolen als ideale A375 media wanneer aangevuld met 10% foetaal runderserum (FBS), 4,5 g/L Glucose, 1,5 g/L NaHCO3, 4 mM L-Glutamine en 1,0 mM Natriumpyruvaat. A375 media moeten 2-3 dagen per week worden vernieuwd.
Groeicondities:	A375 melanoomcellen worden gekweekt in een vochtige incubator (37°C) met 5% CO2.
Opslag:	Bevroren A375 cellen moeten worden bewaard bij -150°C in de dampfase van vloeibare stikstof of in een elektrische vriezer.
Invriesproces en medium:	CM-1 of CM-ACF media worden gebruikt om de A375 cellijn in te vriezen. Er is gekozen voor een langzaam vriesproces waarbij de temperatuur geleidelijk met 1°C daalt om de levensvatbaarheid van de cellen te beschermen.
Ontdooiproces:	De bevroren A375 melanoomcellenflacon wordt snel gedurende 40 tot 60 seconden in het waterbad geschud totdat er nog maar een klein ijsklontje over is. De cellen worden toegevoegd met verse media en gecentrifugeerd om bevroren media-elementen te verwijderen. De verkregen celpellet werd opnieuw geresuspendeerd en in nieuwe kolven gegoten.
Bioveiligheidsniveau:	A375-culturen worden gehanteerd en onderhouden in laboratoria met bioveiligheidsniveau 1.

Confluente laag aanhangende A375-cellen bij een vergroting van 20x.

Voordelen en beperkingen van de A375 cellijn

Net als andere cellijnen heeft de A375 melanoom cellijn een unieke combinatie van voordelen en beperkingen, waardoor het een waardevol hulpmiddel is voor melanoom kankeronderzoek. In dit gedeelte worden slechts enkele belangrijke voor- en nadelen van de A375 cellijn genoemd.

Voordelen

De belangrijke voordelen van A375 cellen worden hieronder genoemd:

Melanoom tumormodel: De A375 cellijn is afgeleid van een kwaadaardige melanoom tumor en dient dus als een tumormodel van onschatbare waarde voor het onderzoeken van melanoom biologie en therapeutische interventies. Deze cellen vertonen melanoomachtige eigenschappen, zoals een hoge proliferatiesnelheid en invasiviteit.
Tumorigeniciteit: A375 cellen zijn zeer tumorigenic, wat betekent dat ze tumoren kunnen vormen. Er is gemeld dat A375-cellen agressieve amelanotische melanomen produceren in NIH Swiss muizen die behandeld worden met anti-thymocytenserum (een immuunsuppressieve stof).
Goed gekarakteriseerd: A375 is een genetisch goed gekarakteriseerde cellijn. Ze bevat specifieke genetische mutaties zoals melanoom. A375-mutaties omvatten een A375 BRAF-genverandering, waardoor het gevoelig is voor BRAF-specifieke remmers. Dit genetische profiel maakt A375-cellen dus een geweldig instrument voor kankeronderzoek om onderliggende moleculaire routes en doelgerichte therapieën te bestuderen.

Beperkingen

De beperkingen van A375 cellen zijn:

In vitro beperkingen: A375 is een in vitro tumormodel. Hoewel het de kenmerken van melanoom nabootst, kan het de complexiteit van melanoomtumoren niet volledig weergeven. Daarom is voorzichtigheid geboden wanneer bevindingen in vitro worden gegeneraliseerd naar klinische studies.

Koop nu uw A375 cellen

€ 430,00*

Inhoud: 1.5 milliliter

Prijzen excl. btw plus verzendkosten

cryovial

Productnummer: 300110

Onderzoekstoepassingen van de A375 cellijn

De A375 cellijn heeft uitgebreide onderzoekstoepassingen in kankeronderzoek. Hier zijn enkele van de algemene gebieden waar A375 cellen worden gebruikt.

Kankeronderzoek: A375 cellen hebben wijdverspreide toepassingen in melanoom onderzoek. Onderzoekers gebruikten deze cellen om de biologie van huidkanker, processen en onderliggende celsignaleringsmechanismen te onderzoeken, waaronder celproliferatie, migratie en invasie. Dit kan onderzoekers ook helpen bij het identificeren van nieuwe moleculaire therapeutische doelwitten. In een onderzoek dat Lin Zhu en collega's in 2019 uitvoerden, werd gebruik gemaakt van zeer agressieve melanoomcellen A375 en werd de rol van microRNA-3662 op de groei en invasie van A375-melanoomcellen gevonden. De onderzoeksbevindingen stellen dat microRNA-3662 het ZEB1-gen target en de groei van melanoomcellen in vitro en in vivo in het A375-tumormodel reguleert [2]. Evenzo bleek uit onderzoek uit 2018 dat PI3K/AKT- en MAPK/ERK-paden betrokken zijn bij de proliferatie en metastase van de A375-cellijn [3].
Ontdekken en testen van geneesmiddelen: A375-cellijn is een nuttig in vitro tumormodel om potentiële antikankermiddelen te testen en te screenen. Onderzoekers evalueren de toxiciteit en werkzaamheid van nieuwe chemotherapeutische medicijnen, verbindingen en andere therapieën met behulp van deze A375 melanoomcellen. In een onderzoek werden bijvoorbeeld de antikankereigenschappen van microdeeltjes en nanoveeltjes afgeleid van grapefruit op A375 menselijke melanoomkankercellen onderzocht. De resultaten toonden aan dat micro- en nanovezels celcyclusstilstand en apoptose induceren en de genexpressie in celproliferatie, migratie en invasie belemmeren [4].

A375 cellen: Publicaties

Enkele belangrijke onderzoekspublicaties met A375 cellen worden hier genoemd.

Vitamine D en zijn lage calcemische analogen moduleren de antikankereigenschappen van cisplatine en dacarbazine in de humane melanoom A375-cellijn

Deze studie werd in 2019 gepubliceerd in het Journal of Oncology. De studie stelde voor dat co-behandeling met vitamine D en analogen de antikankeractiviteit van cisplatine en dacarbazine in A375 melanoomcellen verbetert.

In vitro evaluatie van de anti-melanoom effecten (A375 cellijn) van de gel en hele blad extracten van geselecteerde aloë soorten

Dit onderzoek werd in 2022 gepubliceerd in het Journal of Herbal Medicine. Deze studie onderzocht de anti-melanoom effecten van aloë vera gel in A375 melanoomcellen.

Fermitin family member 2 bevordert melanoomprogressie door de binding van p-α-Pix aan Rac1 te versterken om de MAPK-route te activeren

Deze studie in Oncogene (2021) stelde voor dat fermitin family member 2 (FERMT2 of kindlin-2) melanoomprogressie bevordert via activering van MAPK door binding met p-α-Pix en Rac1.

FARP1 bevordert celproliferatie door modulatie van MAPK-signalering in cutaan melanoom

Deze studie in The American Journal of Dermatopathology (2019) stelde voor dat FARP1 de ontwikkeling en progressie van cutane melanomen kan bevorderen. Het kan dus een nuttig therapeutisch doelwit zijn.

Cytotoxisch en apoptotisch potentieel van Phyllodium elegans-extracten op menselijke kankercellijnen

Dit onderzoeksartikel werd gepubliceerd in Bioengineered (2019). Deze studie onderzocht de cytotoxische en apoptotische activiteit van een plantenextract van Phyllodium elegans op menselijke carcinoomcellijnen, waaronder A375.

Hulpbronnen voor A375-cellijn: Protocollen, video's en meer

Hieronder volgen enkele online bronnen met A375 cellen.

A375 celtransfectie: Deze video tutorial zal u helpen A375 cel transfectie stap voor stap te leren.
Celcultuur: Deze video bevat zeer nuttige informatie over het kweken van cellijnen.

De celkweek protocollen voor A375 cellen staan hier vermeld.

A375 cellijn: Deze link bevat nuttige informatie over het kweken en onderhouden van A375 cellijnen, inclusief A375 media en het omgaan met bevroren en prolifererende A375 culturen.

Veelgestelde vragen (FAQ) voor A375 Cellen

Referenties

Avram, S., et al., Standardization of A375 human melanoma models on chicken embryo chorioallantoic membrane and Balb/c nude mice. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 richt zich tegen ZEB1 en vermindert de invasie van de zeer agressieve melanoomcellijn A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C remt melanoom A375-celproliferatie en metastase via onderdrukking van PI3K/Akt- en MAPK/ERK-paden. Levenswetenschappen, 2018. 206: p. 35-44.
Stanly, C., et al., Grapefruit-derived micro and nanovesicles show distinct metabolome profiles and anticancer activities in the A375 human melanoma cell line. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.