Het "passagegetal" begrijpen

Het begrip "passagegetal" staat centraal in de celkweek en verwijst naar het aantal keren dat een cellijn is gesubcultureerd of overgebracht naar een vers groeimedium na de eerste opwekking uit cryopreservatie of ontvangst uit een referentiecelbank. Deze metriek is cruciaal voor het volgen van de afstamming en geschiedenis van een celkweek.

Procesoverzicht

• Wanneer cellen een bepaalde dichtheid bereiken, worden ze overgeplaatst naar een nieuw medium om de groei te ondersteunen en overbevolking te voorkomen. Elke overdracht wordt geregistreerd als een passage.
• Van oudsher, wanneer we een cellijn ontvingen, bijvoorbeeld bij passage 60 van de bewaargever, gingen we verder vanaf dit passage nummer, oplopend met elke subcultuur. Deze praktijk, met behoud van een historische rode draad, leidde vaak tot hoge passagegetallen vanaf het begin. Gezien het uitgebreide en vaak decennialange gebruik van bepaalde cellijnen, zoals de HeLa-lijn uit 1951, is het niet haalbaar om het totale aantal passages sinds het begin van de cellijn te bepalen.
• Om de duidelijkheid en kwaliteit van onze celkweekprocessen te verbeteren, hebben we deze aanpak begin 2023 herzien. Wanneer we nu een kweek opstarten vanuit een nieuw flesje, ongeacht het passagegetal van de indiener, resetten we het aantal en beginnen we opnieuw te tellen vanaf passage één voor elke geproduceerde batch

Reden

Passaging is een vitale procedure om de gezondheid en bruikbaarheid van celculturen voor onderzoek te garanderen. Wanneer cellen te groot worden, ondervinden ze contactremming, waardoor hun proliferatiesnelheid afneemt, wat de experimentele resultaten negatief kan beïnvloeden. Om deze problemen te beperken, past Cytion strenge controles toe op de celdichtheid waarbij subculturen plaatsvinden, waardoor lage passage-aantallen worden gehandhaafd tijdens de productie van hun cellijnen. Deze voorzorgsmaatregel helpt de nadelige effecten van overmatig doorkweken te voorkomen, zoals morfologische afwijkingen, veranderingen in de groeisnelheid en genetische drift, waardoor de cellen sterk kunnen verschillen van hun oorspronkelijke staat. Langdurige subculturen kunnen ook het risico op microbiële besmetting verhogen.

Onze belofte

We zorgen ervoor dat de cellen die aan onderzoekers worden geleverd zo dicht mogelijk bij de oorspronkelijke genetische make-up en fenotypische kenmerken liggen, waardoor de betrouwbaarheid van experimentele gegevens wordt vergroot. Bovendien draagt Cytion, door elke passage nauwgezet te documenteren, bij aan de traceerbaarheid en reproduceerbaarheid van onderzoek, een toewijding die de hoge praktijknormen in celkweek weerspiegelt. Onderzoekers worden aangemoedigd om nauwkeurig de passage-nummers bij te houden, zowel op de kweekvaten als in hun laboratoriumnotitieboeken, als referentie voor de gezondheid en geschiedenis van hun celculturen.