Gepubliceerd: 2023 | Laatst herzien: mei 2026

Uitgebreide gids voor best practices op het gebied van celbanking

Overzicht van het beheer van celculturen

Effectief beheer van celculturen is essentieel om hun integriteit te behouden voor onderzoek en therapeutische toepassingen. Continue of langdurige kweek van cellijnen kan leiden tot verschillende complicaties, zoals:

• Microbiële besmetting: Open culturen zijn kwetsbaar voor diverse microbiële infecties die het gedrag en de levensvatbaarheid van cellen kunnen beïnvloeden.
• Verandering van eigenschappen: Belangrijke cellulaire eigenschappen, zoals antigeenexpressie of antilichaamproductie, kunnen na verloop van tijd verloren gaan.
• Genetische variatie: Genomische instabiliteit kan optreden in cellijnen die bekend staan om hun onstabiele karyotypes, wat leidt tot onbetrouwbare experimentele resultaten.
• Beperkte levensduur: Bepaalde celtypen kunnen zich slechts een beperkt aantal keren delen voordat ze verouderen en stoppen met prolifereren.
• Risico op kruisbesmetting: Langdurige kweek verhoogt het risico dat de ene cellijn de andere besmet, wat resulteert in foutieve gegevens.
• Hoge inzet van middelen: Langdurige kweek vereist meer verbruiksartikelen en meer arbeid, waardoor de kosten aanzienlijk stijgen.

Strategische aanpak van celbankieren

Een celbankingsysteem is een strategische aanpak om de bovengenoemde risico's te beperken. Het aanbevolen systeem is het Master Cell Banking-systeem, dat de volgende stappen omvat:

1. Eerste quarantaine: Nieuw verworven celculturen moeten worden geïsoleerd en onder strikte quarantainevoorwaarden worden behandeld om laboratoriumbesmetting te voorkomen.
2. Opzetten van een token stock: Na de eerste kweekuitbreiding moet een klein aantal ampullen (3-5) worden gecryopreserveerd als een token stock voor noodback-up.
3. Oprichting van een Master Cell Bank: Breid culturen uit vanuit een ampul van de Token Stock om een Master Cell Bank op te richten, bestaande uit een groter aantal ampullen (10-20 of meer, afhankelijk van het verwachte gebruik).
4. Strenge kwaliteitscontrole: Een deel van de Master Cell Bank ondergaat grondige kwaliteitscontroletests, waaronder het beoordelen van de levensvatbaarheid van de cellen, het bevestigen van de afwezigheid van microbiële verontreinigingen en het eventueel uitvoeren van virale en authenticiteitstests.
5. Ontwikkeling van een werkcelbank: Een deel van de mastercelbank wordt vervolgens gebruikt om een werkcelbank te creëren, die de primaire bron is voor actief onderzoek en toepassing.

Gedetailleerde protocollen voor kwaliteitscontrole

Kwaliteitscontrole is een cruciaal onderdeel van het onderhoud van een celbank. Het omvat:

• Levensvatbaarheids- en tellingstests: Ervoor zorgen dat de cellen levend zijn en in voldoende aantallen aanwezig zijn.
• Microbiële screening: Regelmatige tests op bacteriën, schimmels en mycoplasma om aangetaste celculturen te voorkomen.
• Authenticatieprocedures: Bevestiging van de identiteit van de cellijnen door middel van methoden zoals DNA-profilering.

Aanbevelingen voor opslag en gebruik

De juiste opslagomstandigheden zijn als volgt:

• Speciale opslagfaciliteiten: Gebruik faciliteiten die specifiek zijn ontworpen voor het opslaan van celbanken, zoals vloeibare stikstoftanks of elektrische vriezers, om kruisbesmetting te voorkomen en de levensvatbaarheid op lange termijn te waarborgen.

Consistentie en kwaliteitsborging:

• Consistent celmateriaal: Een celbanksysteem zorgt ervoor dat al het materiaal dat in experimenten wordt gebruikt, afkomstig is van een consistente bron.
• Gecontroleerde passageaantallen: Door cellen te gebruiken binnen een gecontroleerd bereik van passageaantallen, wordt de variabiliteit in experimenten geminimaliseerd.
• Just-in-time-kweekpraktijk: Door cellen alleen te kweken wanneer dat nodig is, blijven de oorspronkelijke kenmerken van de cellijn behouden en worden de kosten voor het onderhouden van continue kweken verlaagd.