KG-1-cellijn
Algemene kenmerken en oorsprong van de KG-1-cellijn
De oorsprong en algemene kenmerken van een cellijn helpen een onderzoeker bij het bepalen van het gebruik ervan in zijn of haar werk. U kunt deze informatie nagaan voordat u ermee aan de slag gaat. Dit artikel gaat volledig over de oorsprong en kenmerken van KG-1-macrofagen. Hier leert u: Wat zijn KG-1-cellen? Wat is de KG-1a-cellijn? Wat is de oorsprong van de KG-1-cellijn? Wat is de morfologie van KG-1?
- KG-1 is een lymfoblastachtige cellijn afkomstig uit het beenmergaspiraat van een blanke man (59 jaar) met acute myeloïde leukemie. De lijn werd in 1978 door Koeffler en Golde opgericht. Deze cellen bevinden zich voornamelijk in het rijpingsstadium van promyelocyten of myeloblasten [1].
- KG-1-cellen hebben een lymfoblastachtige morfologie.
- Het karyotype van de KG-1-cellijn vertoont een pseudodiploïd modaal aantal chromosomen.
KG-1 en KG-1a
KG-1a is een sublijn van de oorspronkelijke KG-1-cellen. Deze sublijn is ontstaan na 35 passages van de KG-1-cellijn. Deze sublijn is minder gedifferentieerd dan de KG-1-cellijn. Bovendien is deze sublijn cytochemisch, morfologisch en functioneel minder volgroeid dan de oorspronkelijke cellijn (KG-1).
Informatie over het kweken van de KG-1-cellijn
In dit deel van het artikel komt alle essentiële informatie over het kweken van KG-1-cellen aan bod die uw werk kan vergemakkelijken. Hier leert u: Wat is de verdubbelingstijd van de KG-1-cellijn? Wat zijn de kweekomstandigheden voor KG-1-macrofagen? Hoe kweekt u KG-1-cellen?
Belangrijke punten voor het kweken van KG-1-cellen
Verdubbelingstijd:
De verdubbelingstijd van KG-1 bedraagt ongeveer 45 uur. Deze kan echter variëren, afhankelijk van de kweekomstandigheden.
Hechtend of in suspensie:
De KG-1-cellen groeien in suspensie.
Celdichtheid:
De optimale celdichtheid voor de KG-1-cellijn ligt tussen 1 en 3 x 10⁵ cellen/ml. Voor het subcultiveren wordt de celsuspensie overgebracht naar een steriele buis en gecentrifugeerd. Aan de geoogste cellen wordt vervolgens vers medium toegevoegd en ze worden zorgvuldig opnieuw gesuspendeerd. Vervolgens worden de cellen in nieuwe kweekflessen verdeeld en bij een optimale celdichtheid gekweekt. De cellen kunnen worden gesplitst wanneer ze een maximale celdichtheid van 1 - 2 x 10⁶ cellen/ml bereiken.
Groeimedium:
IMDM (Iscove’s Modified Dulbecco’s Medium) met 10% FBS, 4,5 g/L glucose, 4 mM L-glutamine, 1,0 mM natriumpyruvaat en 3,0 g/L NaHCO₃ wordt gebruikt voor het kweken van KG-1-cellen. Het medium moet na drie dagen worden ververst.
Groeicondities:
De KG1 AML-cellijn wordt gekweekt in een bevochtigde incubator bij een temperatuur van 37 °C en met een CO₂-toevoer van 5%.
Opslag:
Ingevroren cellen worden bewaard in de dampfase van vloeibare stikstof of bij een temperatuur van minder dan -150 °C in een elektrische ultralage-temperatuurvriezer om de levensvatbaarheid van de cellen te waarborgen.
Invriesproces en medium:
CM-1 of CM-ACF is geschikt voor het invriezen van KG-1-cellen. De cellen worden ingevroren met behulp van een langzaam invriesproces om de cellen tegen schokken te beschermen. Bij deze methode daalt de temperatuur geleidelijk met 1 °C per minuut.
Ontdooiproces:
De cellen worden ontdooid in een voorverwarmd waterbad bij 37 °C totdat er nog slechts een klein klompje ijs overblijft. Aan de ontdooide cellen wordt vers medium toegevoegd en ze worden gecentrifugeerd om de componenten van het invriesmedium te verwijderen. Het celpellet wordt zorgvuldig opnieuw gesuspendeerd en overgegoten in nieuwe kolven met groeimedium.
Bioveiligheidsniveau:
Een laboratorium met bioveiligheidsniveau 1 is essentieel voor het onderhouden van KG-1-celculturen.
Gepubliceerd: 2023 | Laatst herzien: mei 2026
KG-1-cellijn: voordelen en beperkingen
Net als andere cellijnen kent ook de KG-1-cellijn voor myeloïde leukemie tal van voordelen en beperkingen. In dit gedeelte bespreken we enkele opvallende aspecten die van cruciaal belang kunnen zijn bij de beslissing om deze cellijn in uw onderzoek te gebruiken.
Voordelen
De belangrijkste voordelen van KG-1-cellen zijn:
-
Eenvoudige kweek
KG-1-cellen kunnen gemakkelijk worden gekweekt in onderzoekslaboratoria, dankzij de eenvoudige vereisten voor celkweek. Door de eenvoudige onderhouds- en groeicondities zijn ze toegankelijk voor een breed spectrum aan onderzoekers met basisvoorzieningen voor celkweek.
-
Model voor acute myeloïde leukemie (AML)
De KG-1 AML-cellijn, afkomstig van een mannelijke patiënt met acute myeloïde leukemie (AML), dient als een waardevol hulpmiddel voor het onderzoeken van de biologie van AML en het verrichten van onderzoek naar mogelijke therapieën, en biedt inzicht in de onderliggende mechanismen en behandelingsstrategieën van deze ziekte.
Beperkingen
De beperkingen van de KG-1-cellijn zijn:
-
In-vitro-model
KG-1-cellen vormen een waardevol in-vitro-model voor AML-onderzoek; het is echter belangrijk op te merken dat ze de complexiteit van de ziekte in vivo mogelijk niet volledig nabootsen, en dat ze dienen als een vereenvoudigd celmodel dat mogelijk niet alle aspecten van de AML-biologie omvat.
Toepassingen van KG-1-cellen in onderzoek
KG-1 biedt verschillende veelbelovende toepassingen in biomedisch onderzoek. Enkele belangrijke onderzoeksgebieden waarbij KG-1-macrofagen worden gebruikt, zijn:
- Kankeronderzoek: KG-1-cellen zijn afkomstig van een patiënt met acute myeloïde leukemie en worden daarom beschouwd als een waardevol onderzoeksinstrument voor het bestuderen van de biologie van AML. Onderzoekers gebruiken deze cellen om de cellulaire en moleculaire mechanismen te bestuderen die de ontwikkeling, groei en resistentie tegen geneesmiddelen bij AML aansturen. Dit omvat ook het identificeren en ontdekken van nieuwe biomarkers, genetische mutaties en signaalroutes die verband houden met AML. Zo bleek uit een in 2019 uitgevoerd onderzoek dat het lange niet-coderende RNA linc00239 de resistentie tegen doxorubicine en het kwaadaardige gedrag in KG-1-cellen (acute myeloïde leukemiecellen) bevordert. Uit verder onderzoek bleek dat het lncRNA de PI3K/Akt/mTOR-signaalroute activeert om deze effecten in AML-cellen teweeg te brengen [2].
- Toxicologie: De KG1-cellijn wordt op grote schaal gebruikt in toxicologisch onderzoek. Onderzoekers testen de toxiciteit en werkzaamheid van potentiële therapeutische middelen, waaronder chemotherapeutica en gerichte therapieën, op KG1-myeloïde leukemiecellen, om veelbelovende kandidaat-geneesmiddelen te identificeren voor toekomstige preklinische en klinische evaluaties. In 2018 werd onderzoek uitgevoerd naar de toxiciteit van doxorubicine-bevattende nano-niosomen op de KG1-AML-cellijn. De studie stelde dat nano-niosomen een geschikte drager zijn voor medicijnafgifte, aangezien ze de effectiviteit van de behandeling versterken [3]. In een ander onderzoek hebben onderzoekers de therapeutische effecten onderzocht van brandnetelthee, bereid uit de bladeren van de Urtica dioica-plant. Uit de studie bleek dat dit waterige bladextract van de plant antitumorale effecten heeft op acute myeloïde leukemiecellen, KG-1 en U937 [4].
Publicaties over KG-1-cellen
In dit deel van het artikel worden enkele interessante onderzoekspublicaties over KG-1-cellen opgesomd.
Dit artikel is gepubliceerd in het Journal of Cellular Physiology (2019). De studie stelde dat de stof quercetine de KG1-AML-cellijn gevoeliger maakt voor de TNF-gerelateerde apoptose-inducerende ligand (TRAIL) en het effect van TRAIL-geïnduceerde cytotoxiciteit in cellen kan versterken.
KLF8 bevordert de groei en glycolyse van acute myeloïde leukemiecellen via de AKT/mTOR-route
Dit artikel in het *Tropical Journal of Pharmaceutical Research* (2022) stelde dat downregulatie van de krüppel-achtige transcriptiefactor 8 de proliferatie en glycolyse van AML-cellen onderdrukt, waardoor apoptose wordt bevorderd via regulering van de AKT/mTOR-signaalroute.
Effecten van sorafenib en arseentrioxide op de U937- en KG-1-cellijnen: apoptose of autofagie?
Deze studie in het Cell Journal (Yakhteh) (2020) onderzocht de mogelijke effecten van arseentrioxide en sorafenib op U937- en KG-1-cellen.
Deze studie, gepubliceerd in Medical Oncology (2020), evalueerde OXPHOS en glycolyse als therapeutische doelwitten in de AML-cellijn KG-1.
In deze publicatie in Drug Design, Development, and Therapy uit 2020 werd voorgesteld dat curcumine en thalidomide in combinatie synergetisch apoptotische effecten uitoefenen in KG-1-cellen door de expressie van STAT3 en Bcl-xL te verminderen.
6. Bronnen voor de KG-1-cellijn: protocollen, video’s en meer
Hieronder volgen enkele online bronnen over KG-1-cellen.
- Subcultiveren van suspensiecellen: Deze video beschrijft het protocol voor het subcultiveren van suspensiecelculturen zoals KG-1.
De volgende link bevat het kweekprotocol voor de KG-1-cellijn:
- KG-1-cellijn: Deze website staat vol met basisinformatie over celculturen van de KG-1-cellijn. Het bevat informatie over kweekmedia voor de cellijn en protocollen voor het subcultiveren en hanteren van cryogeen bewaarde en proliferatieve culturen.
Referenties
- Pelliccia, F., V. Ubertini en N. Bosco, Het belang van moleculair-cytogenetische analyse voorafgaand aan het gebruik van cellijnen in onderzoek: het geval van de KG-1a-leukemiecellijn. Oncol Lett, 2012. 4(2): p. 237-240.
- Yang, Y., et al., Lang niet-coderend RNA linc00239 bevordert kwaadaardig gedrag en chemoresistentie tegen doxorubicine, deels via activering van de PI3K/Akt/mTOR-route in acute myeloïde leukemiecellen. Oncology Reports, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Bereiding en onderzoek van nano-niosomen die doxorubicine bevatten en evaluatie van de toxiciteit ervan op de acute myeloblastische leukemiecellijn KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): p. 309-323.
- Hodroj, M.H., et al., Brandnetelthee remt de groei van acute myeloïde leukemiecellen in vitro door apoptose te bevorderen. Nutrients, 2020. 12(9): p. 2629.