PANC1-cellen: hun cruciale rol in het onderzoek naar alvleesklierkanker ontrafeld
PANC1 is een menselijke epithelioïde tumorcellijn die veel wordt gebruikt in kankeronderzoek. Deze wordt ingezet als in-vitromodel om de biologie van alvleesklierkanker, carcinogenese en de onderliggende cellulaire en moleculaire mechanismen te bestuderen en om potentiële antikankertherapieën te evalueren.
- Groeimedium
- Voor het kweken van PANC1-cellen wordt DMEM gebruikt met 10% foetaal runderserum (FBS), 4,5 g/l glucose, 4 mM L-glutamine, 1,5 g/l NaHCO₃ en 1,0 mM natriumpyruvaat. Het Panc1-celmedium moet 2-3 keer per week worden ververst.
- Verdubbelingstijd
- De pancreascellijn PANC 1 vertoont een matige proliferatiesnelheid met een verdubbelingstijd van 25,83 ± 2,03 uur.
- Groeitype
- PANC1 is een epitheliale, aanhechtende cellijn.
- Bioveiligheidsniveau
- BSL-1
- Verkrijgbaar bij
- Cytion — Bestel PANC1
Algemene kenmerken en oorsprong van de PANC1-cellijn
Dit artikel geeft basisinformatie over de PANC1-cellijn. Bijvoorbeeld: waar staat PANC-1 voor? Wat zijn PANC-1-cellen? Wat is de oorsprong van PANC1? Wat is de morfologie van PANC1? Hoe groot zijn PANC1-cellen?
- De PANC1-celijn van alvleesklierkanker is afkomstig van een 56-jarige blanke man met pancreaskanaalkanker. Deze continue tumorcellijn werd in 1975 door Michael Lieber en collega’s opgezet [1].
- PANC1-cellen hebben een slecht differentiatievermogen, maar kunnen mogelijk uitzaaien.
- Deze menselijke alvleesklierkankercellen vertonen een epitheelcelachtige morfologie.
- Panc 1 bezit een hypertriploïd karyotype. Het gerapporteerde modale chromosoomaantal voor de Panc 1-cellijn is 63. Het genoom bevat een klein ringchromosoom en drie afzonderlijke markerchromosomen.
Informatie over PANC1-celculturen
In dit gedeelte gaat het helemaal over informatie over PANC1-celcultuur. Als u de kweekomstandigheden van een cellijn kent, kunt u er gemakkelijker mee werken. We zullen het volgende bespreken: Wat is de verdubbelingstijd van PANC-1? Hoe kweek je PANC1-cellen? Zijn PANC1-cellen hechtend? Wat is PANC1-celmedium?
Belangrijke punten voor het kweken van PANC1-cellen
Verdubbelingstijd:
De pancreascellijn PANC-1 vertoont een matige proliferatiesnelheid met een verdubbelingstijd van 25,83 ± 2,03 uur.
Hechtend of in suspensie:
PANC-1 is een epitheliale, hechtende cellijn.
Bezaaidichtheid:
PANC1-cellen worden uitgezaaid met een dichtheid van 1 x 10⁴ cellen/cm². Voor het uitzaaien worden de cellen gewassen met PBS (fosfaatbufferzoutoplossing) en gedurende 8 tot 10 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd met een dissociatieoplossing, namelijk Accutase. Losgekomen cellen worden opnieuw gesuspendeerd in vers medium en gecentrifugeerd. Het celpellet wordt zorgvuldig opnieuw gesuspendeerd in kweekmedium en de cellen worden overgebracht naar nieuwe kweekflessen voor verdere groei.
Kweekmedium:
Voor het kweken van PANC1-cellen wordt DMEM gebruikt met 10% foetaal runderserum (FBS), 4,5 g/L glucose, 4 mM L-glutamine, 1,5 g/L NaHCO₃ en 1,0 mM natriumpyruvaat.
Het kweekmedium voor Panc1-cellen moet 2-3 keer per week worden ververst.
Kweekomstandigheden:
PANC1-cellen worden gekweekt in een bevochtigde incubator bij een temperatuur van 37 °C en met een CO₂-concentratie van 5%.
Opslag:
Panc-cellen worden bewaard in de dampfase van vloeibare stikstof of in een elektrische ultravriezer (bij een temperatuur van minder dan -150 °C) om de levensvatbaarheid van de cellen te behouden.
Invriesproces en medium:
PANC1-cellen worden ingevroren in CM-1- of CM-ACF-media. Voor het invriezen van PANC1-cellen wordt een langzame invriesmethode gebruikt, waarbij de temperatuur slechts met 1 °C per minuut daalt.
Ontdooiproces:
De cellen worden ontdooid in een waterbad van 37 °C totdat er nog slechts een klein klompje ijs overblijft. De ontdooide cellen worden opnieuw gesuspendeerd in medium en gecentrifugeerd om de inhoud van het invriesmedium te verwijderen. De celpallet wordt zorgvuldig opnieuw gesuspendeerd en de cellen worden met een dichtheid van 5 x 10⁴ cellen/cm² in nieuwe kweekflessen gedoseerd voor kweek. Het duurt bijna 48 uur voordat PANC1-cellen hechten.
Bioveiligheidsniveau:
Voor de PANC1-celkweek wordt bioveiligheidsniveau 1 aanbevolen.
Voordelen van PANC1-cellen
Elke cellijn heeft bepaalde voor- en nadelen die haar onderscheiden van andere. In dit gedeelte worden de voor- en nadelen van de Panc1-cellijn toegelicht.
Voordelen
De belangrijkste voordelen van de PANC1-cellen zijn:
-
In-vitro-model voor alvleesklierkanker
PANC1 vertoont kenmerken van humaan adenocarcinoom van de pancreasgang. Daarom wordt het gebruikt als in-vitromodel om de ontwikkeling en groei van pancreastumoren en de daarmee samenhangende moleculaire mechanismen te bestuderen.
-
Genetische mutaties
PANC1-cellen bezitten veel mutaties die ook in pancreastumoren worden aangetroffen, waardoor ze waardevol zijn voor het bestuderen van ziektegerelateerde signaalwegen. Deze mutaties omvatten voornamelijk PANC1 KRAS en PANC1 P53.
De menselijke kankercellijn PANC1 wordt vaak toegepast in onderzoek naar alvleesklierkanker. Hieronder noemen we enkele veelvoorkomende onderzoeksgebieden.
- Kankerbiologie: PANC1-cellen worden gebruikt om de ontwikkeling en groei van alvleesklierkanker en vele andere celprocessen te bestuderen, waaronder proliferatie, invasie, migratie en celdood. Daarnaast worden ook verschillende celsignaalroutes, genetische mutaties en moleculaire mechanismen onderzocht die een rol spelen bij de carcinogenese van de alvleesklier. Een in 2018 uitgevoerd onderzoek maakte gebruik van PANC1-cellen en toonde aan dat omeprazol de invasie van alvleeskliertumorcellen onderdrukt via de door de arylhydrocarbontreceptor gemedieerde inductie van JNK. JNK-activering moduleert op haar beurt andere celgenen en leidt tot remming van pro-oncogene factoren [3]. Evenzo bleek uit een ander onderzoek dat de AKT- en ERK-signaalroutes betrokken zijn bij de proliferatie, invasie en migratie van PANC1-cellen bij menselijke alvleesklierkanker [4].
- Geneesmiddelenscreening: De PANC1-cellijn dient als een waardevol hulpmiddel voor het screenen van potentiële geneesmiddelen of therapieën tegen kanker. Onderzoekers onderzoeken doorgaans de resistentie tegen geneesmiddelen en bestuderen de werkingsmechanismen van potentiële kandidaat-geneesmiddelen. Onderzoek uitgevoerd door Samira Alipour en collega’s in 2022 suggereerde dat Portulaca oleracea-extract apoptotische en cytotoxische effecten uitoefent op PANC1-cellen en daarmee een potentiële behandeling voor alvleesklierkanker kan zijn. De plant oefent deze antitumorale effecten uit door de CDK1- en P53-genen te reguleren [5].
PANC-1-cellen aanschaffen: uw toegang tot onderzoek naar alvleesklierkanker
Publicaties over PANC1-cellen
In dit hoofdstuk worden enkele interessante en veel geciteerde onderzoekspublicaties over PANC1-cellen genoemd.
Dit onderzoek werd in 2019 gepubliceerd in het internationale tijdschrift “Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology”. De studie stelde dat goudnanodeeltjes, groen gesynthetiseerd uit de plant Scutellaria barbata, antitumorale effecten uitoefenen tegen de alvleesklierkankercellijn PANC1.
Deze publicatie in „Toxicology and Environmental Health Sciences“ (2020) onderzocht het antikankerpotentieel van Delonix regia-extract en zilvernanodeeltjes op twee menselijke kankercellijnen, namelijk PANC1 en MCF7.
Synthese van gouden nanodeeltjes uit bladeren van Panax notoginseng en de antikankeractiviteit ervan in PANC-1-cellijnen van alvleesklierkanker
Dit artikel verscheen in 2019 in het internationale tijdschrift *Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology*. In deze studie werden de therapeutische effecten onderzocht van gouden nanodeeltjes, gesynthetiseerd uit bladextract van de Panax notoginseng-plant, tegen de PANC1-alvleesklierkankercellijn.
Ontwikkeling van KS-58 als het eerste K-Ras (G12D)-remmende peptide met antikankeractiviteit in vivo
Deze studie werd gepubliceerd in *Nature Scientific Reports* (2020). Hierin hebben de onderzoekers het peptide KS-58 ontwikkeld dat in vitro selectief de KRAS G12D-mutatie in PANC-1 remt.
Dit onderzoek werd in 2018 gepubliceerd in het tijdschrift *Biomedicine & Pharmacotherapy*. De studie stelde dat isorhamnetine, een flavonoïde, de proliferatie van PANC-1-cellen remt via S-fase-arrestatie in de celcyclus.
Nieuwe LIMK2-remmer remt de groei van Panc-1-tumoren in een xenotransplantaatmodel bij muizen
Deze studie, gepubliceerd in het tijdschrift Oncoscience (2014), stelde dat een nieuwe LIMK2-remmer de tumorgroei onderdrukt in een PANC-1-xenotransplantaatmodel bij muizen.
Bronnen voor de PANC-1-cellijn: protocollen, video’s en meer
Hieronder vindt u een aantal beschikbare bronnen over Panc-1-cellen.
- Panc-1-transfectie: Deze video is een tutorial om het Panc-1-transfectieprotocol te leren.
- Een cellijn subcultiveren: Deze video legt een algemeen protocol uit voor het subcultiveren van hechtende cellijnen.
De volgende links bevatten een celkweekprotocol voor PANC1-cellen.
- Panc1-cellen: Deze link bevat het protocol voor het ontdooien en subcultiveren van de Panc1-cellijn.
- PANC 1-celkweek: Op deze website vindt u alle belangrijke informatie over de PANC 1-celkweek, waaronder PANC 1-celmedia, het ontdooien en invriezen van cellen en het subcultiveringsprotocol.
Veelgestelde vragen: Inzicht in PANC-1-cellen en hun toepassingen
Referenties
- Lieber, M., et al., Establishment of a continuous tumor‐cell line (PANC‐1) from a human carcinoma of the exocrine pancreas. International journal of cancer, 1975. 15(5): p. 741-747.
- Kim, Y., et al., Vergelijkende proteomische profilering van celijnen van ductaal adenocarcinoom van de alvleesklier. *Mol Cells*, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Jin, U.-H., et al., Remming van de migratie van Panc1-cellen van alvleesklierkanker door omeprazol is afhankelijk van de activering van JNK door de arylhydrocarbonaatreceptor. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2018. 501(3): p. 751-757.
- Yuetong, L., et al., Salidroside remt de proliferatie, migratie en invasie van menselijke PANC1- en SW1990-cellen van alvleesklierkanker via de AKT- en ERK-signaalroute. Die Pharmazie – An International Journal of Pharmaceutical Sciences, 2020. 75(8): p. 385-388.
- Alipour, S., L. Pishkar en V. Chaleshi, Cytotoxisch effect van Portulaca oleracea-extract op de regulatie van de CDK1- en P53-genexpressie in een alvleesklierkankercellijn. Nutrition and Cancer, 2022. 74(5): p. 1792-1801.