NCI-H460-cellen – Inzicht in longkankeronderzoek met NCI-H460
NCI-H460 zijn van mensen afkomstige niet-kleincellige longkankercellen die veel worden gebruikt in onderzoek naar longcarcinoom en toxicologie. Deze cellijn is een waardevol hulpmiddel voor het bestuderen van diverse aspecten van de kankerbiologie, waaronder tumorontwikkeling, groei en resistentie tegen geneesmiddelen. Bovendien vormen NCI-H460-cellen een geschikt model voor de ontwikkeling van antikankermiddelen.
- Kweekmedium
- RPMI 1640 wordt gebruikt als kweekmedium voor NCI-H460. Het wordt aangevuld met 10% foetaal runderserum, 2,1 mM stabiele glutamine en 2,0 g/L NaHCO₃. Het medium moet 2 tot 3 keer per week worden ververst.
- Verdubbelingstijd
- De verdubbelingstijd van de NCI-H460 bedraagt ongeveer 33 uur.
- Groeitype
- De NCI-H460-longkankercellen zijn hechtend.
- Bioveiligheidsniveau
- BSL-4
- Verkrijgbaar bij
- Cytion — Bestel NCI-H460
NCI-H460-cellen: Oorsprong en algemene kenmerken
De oorsprong en algemene kenmerken van een cellijn dragen in belangrijke mate bij aan de toepassingen ervan in onderzoek. Dit gedeelte van het artikel helpt u meer te weten te komen over de oorsprong en opvallende kenmerken van NCI-H460-longkankercellen. U komt het volgende te weten: Wat zijn NCI-H460-cellen? Wat is het type van de NCI-H460-cellijn? Wat is de morfologie van NCI-H460?
- De NCI-H460-cellijn is afkomstig uit de pleurale effusie van een Europese man met grootcellige longkanker. De cellijn werd in 1982 opgericht door A.F. Gazdar en collega’s.
- NCI-H460-longkankercellen hebben een epitheliale morfologie.
- NCI-H460 is een tumorogene cellijn met een hypotriploïd karyotype. Het modale aantal chromosomen voor deze cellen is 57. NCI-H460-cellen vertonen ook in vergelijkbare mate een modaal aantal van 58 chromosomen.
- Deze longkankercellen vertonen veel NCI-H460-mutaties die ook bij niet-kleincellige longtumoren voorkomen, zoals de NCI-H460 KRAS-mutatie, die een rol speelt bij celproliferatie, groei, invasie en metastase.
Informatie over het kweken van NCI-H460-cellen
U dient de volgende belangrijke punten te kennen voor een correcte omgang met en het onderhoud van de NCI-H460-cellijn. Hier vindt u informatie over de verdubbelingstijd van NCI-H460, het kweekmedium voor NCI-H460 en de basisprocedures voor het kweken van NCI-H460-longkankercellen.
Belangrijke punten voor het kweken van NCI-H460-cellen
Verdubbelingstijd:
De verdubbelingstijd van NCI-H460 bedraagt ongeveer 33 uur.
Hechtend of in suspensie:
De NCI-H460-longkankercellen zijn hechtend.
Subcultiveringsverhouding:
De aanbevolen subcultiveringsverhouding voor de NCI-H460-cellijn is 1:2 en 1:4. Na het verwijderen van het oude medium worden de hechtende cellen gespoeld met 1 x fosfaatgebufferde zoutoplossing. Daarna worden de cellen gedurende 8 tot 10 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd met Accutase-passageoplossing. De gedissocieerde cellen worden opnieuw gesuspendeerd in een kweekmedium en gecentrifugeerd. De geoogste cellen worden opnieuw gesuspendeerd en in de nieuwe kweekfles gegoten voor verdere kweek.
Groeimedium:
RPMI 1640 wordt gebruikt als kweekmedium voor NCI-H460. Dit wordt aangevuld met 10% foetaal runderserum, 2,1 mM stabiele glutamine en 2,0 g/l NaHCO₃. Het medium moet 2 tot 3 keer per week worden ververst.
Groeicondities:
NCI-H460-culturen worden bij een temperatuur van 37 °C gehouden in een bevochtigde incubator met een continue toevoer van 5% CO₂.
Opslag:
NCI-H460-longkankercellen kunnen voor langdurige opslag worden bewaard in de dampfase van vloeibare stikstof of bij een temperatuur van minder dan -150 °C in een elektrische ultralage-temperatuurvriezer.
Invriesproces en medium:
CM-1- of CM-ACF-medium wordt gebruikt voor het invriezen en bewaren van NCI-H460-cellen. Een langzame invriesmethode wordt aanbevolen om de levensvatbaarheid van de cellen zo goed mogelijk te behouden.
Ontdooiproces:
Ingevroren NCI-H460-cellen worden gedurende 40 tot 60 seconden ontdooid in een voorverwarmd waterbad (bij een temperatuur van 37 °C) totdat er nog slechts een klein klompje ijs overblijft. Aan de ontdooide cellen wordt vers medium toegevoegd en ze worden gecentrifugeerd om de componenten van het invriesmedium te verwijderen. Het verzamelde celpellet wordt opnieuw gesuspendeerd en de cellen worden overgebracht naar nieuwe kweekflessen met groeimedium. Het kan bijna 24 uur duren voordat NCI-H460-cellen zich aan het oppervlak van de kweekfles hechten.
Bioveiligheidsniveau:
NCI-H460-longkankercellen worden gehanteerd en gekweekt in laboratoria van bioveiligheidsniveau 1.
Gepubliceerd: 2023 | Laatst herzien: mei 2026
Voor- en nadelen van NCI-H460-cellen
NCI-H460 is een veelgebruikte cellijn in longkankeronderzoek. In dit gedeelte worden de algemene voor- en nadelen van NCI-H460-longkankercellen besproken.
Voordelen
De voordelen van de NCI-H460-cellijn voor niet-kleincellige longkanker zijn:
-
Herkomst van de tumor
De NCI-H460-cellijn is afkomstig van een patiënt met grootcellig longcarcinoom en vertegenwoordigt dit specifieke type longkanker. De cellen worden gebruikt als model om de biologie van longkanker te bestuderen en nieuwe, effectieve behandelingen te ontwikkelen. NCI-H460-cellen hebben tumorigenisch potentieel en kunnen worden geïnjecteerd in immuundeficiënte muizen om in vivo tumormodellen te creëren voor het bestuderen van tumorgroei, -ontwikkeling en de werkzaamheid van potentiële geneesmiddelen.
-
Hoge proliferatiesnelheden
NCI-H460 vertoont hogere groeisnelheden dan andere celijnen van niet-kleincellige longkanker, zoals A549. Dit voordeel vergroot de beschikbaarheid ervan en helpt onderzoekers bij het uitvoeren van reproduceerbare en tijdgevoelige experimenten.
Nadelen
De nadelen van NCI-H460-longkankercellen zijn:
-
Homogeniteit
NCI-H460-cellen zijn homogeen, aangezien ze afkomstig zijn van de tumor van één enkele patiënt. Daardoor missen ze over het algemeen de complexiteit en heterogeniteit die in tumoren van patiënten worden waargenomen.
Onderzoekstoepassingen van NCI-H460-cellen
De NCI-H460-longkankercellen worden op grote schaal gebruikt in studies met betrekking tot longcarcinoom. Hieronder volgen enkele belangrijke onderzoekstoepassingen van NCI-H460-cellen:
- Longkankeronderzoek: NCI-H460-cellen vormen een onmisbaar model voor het onderzoeken van cellulaire en moleculaire mechanismen die een rol spelen bij de ontwikkeling, groei en uitzaaiing van tumoren. Bovendien worden ze gebruikt om cruciale signaalroutes, moleculaire doelwitten en diverse genetische mutaties te bestuderen die verband houden met de progressie van longkanker. Er zijn verschillende studies uitgevoerd met NCI-H460-cellen om deze factoren effectief te onderzoeken. Een in 2019 uitgevoerd onderzoek stelde dat het tot overexpressie gebrachte nucleaire ubiquitaire caseïne- en cycline-afhankelijke kinasen-substraat (NUCKS) betrokken is bij de groei van tumorcellen via regulering van de PI3K/AKT-signaalroute [1]. Evenzo werd in een in vitro- en in vivo-studie gebruikgemaakt van NCI-H460-cellen om de rol van het eIF4E-gen te onderzoeken. De bevindingen toonden aan dat het eIF4E-gen betrokken is bij de groei van longcarcinomen en bij angiogenese, en dat het als doelwit kan dienen voor de ontwikkeling van veelbelovende geneesmiddelen tegen longkanker [2].
- Ontdekking en ontwikkeling van geneesmiddelen: NCI-H460, een menselijke longkankercellijn, wordt op grote schaal gebruikt in onderzoek naar de ontdekking en ontwikkeling van geneesmiddelen. Onderzoekers gebruiken deze cellen om de toxiciteit en werkzaamheid te onderzoeken van nieuwe kandidaat-geneesmiddelen, gerichte therapieën en behandelingen die voornamelijk gericht zijn op NCI-H460 KRAS-mutaties. In een studie die in 2023 door Haoyue Hu en collega’s werd uitgevoerd, werden NCI-H460-cellen gebruikt om de antikankereffecten van het geneesmiddel anlotinib te onderzoeken. Uit de resultaten bleek dat anlotinib de groei van KRAS-mutante longkankercellen gedeeltelijk beïnvloedde door de MEK/ERK-signaalcascade te remmen [3]. Evenzo werd een fenolverbinding, carnosinezuur, gescreend op antiproliferatieve en proapoptotische activiteiten met behulp van NCI-H460-cellen [4].
- Geneesmiddelresistentie: De NCI-H460-cellijn is ideaal voor het bestuderen van het mechanisme van geneesmiddelresistentie bij longcarcinoom. Onderzoekers gebruiken deze cellen om modellen voor geneesmiddelresistentie te ontwikkelen en zo de onderliggende genen, moleculaire factoren en signaalroutes te identificeren. Zo werden in een studie NCI-H460-cellen ontwikkeld die resistent waren tegen pemetrexed, een multitarget-antifolaatmiddel, om de onderliggende moleculaire mechanismen van pemetrexed-resistentie in niet-kleincellige longkankercellen te bestuderen [5].
Koop de NCI-H460-cellijn: uw toegangspoort tot onderzoek naar longkanker
Wetenschappelijke publicaties over NCI-H460-cellen
Hieronder volgen enkele interessante onderzoekspublicaties over de NCI-H460-longcarcinoomcellijn.
Deze studie in het tijdschrift *Molecules* (2023) suggereert dat een natuurlijk α-1,6-glucaan, BBWPW, uit zwarte bonen de proliferatie van NCI-H460-cellen remt door regulering van de PI3K/AKT/MAPK-route.
In dit artikel in Phytomedicine (2019) werd onderzocht dat dioscin-6′-O-acetaat, een nieuwe natuurlijke verbinding, een antiproliferatief effect uitoefent op NCI-H460-longkankercellen.
miRNA-425-5p bevordert de groei van longkanker via de PTEN/PI3K/AKT-signaalroute
Uit onderzoek in BMC Pulmonary Medicine (2020) blijkt dat microRNA-425-5p de tumorontwikkeling bij longcarcinoom bevordert via de PTEN/PI3K/AKT-route.
Dit artikel in *Molecular Medicine Reports* (2017) beschreef het antitumorale potentieel en de onderliggende mechanismen van de verbinding quinalizarine in NCI-H460- en andere longkankercellen.
Dit onderzoek in Food and Function (2019) belicht het potentiële antikankereffect van het extract van Eucalyptus globulus Labill. aan de hand van NCI-H460-cellen. Uit de bevindingen bleek dat het plantenextract deze effecten vertoonde door de p53-expressie in NCI-H460-cellen te verhogen en het celcyclusprofiel te moduleren.
Bronnen voor de NCI-H460-cellijn: protocollen, video’s en meer
Hieronder vindt u enkele online bronnen over de NCI-H460-longkankercellen.
- Transfectie van NCI-H460-cellen: Deze videotutorial is een stapsgewijze handleiding voor het transfecteren van NCI-H460-cellen met plasmide-DNA.
De volgende links bevatten essentiële informatie over het kweken van H460-cellen.
- NCI-H460-cellen: Deze website biedt belangrijke informatie over kweekmedia, subcultiveren, invriezen en ontdooien van NCI-H460-cellen.
- Passageren van NCI-H460-cellen: Dit document begeleidt u bij het passageren en subcultiveren van de NCI-H460-cellijn. Daarnaast helpt het u ook bij het leren van het transfectieprotocol voor NCI-H460-cellen.
De NCI-H460-cellijn onder de loep: veelgestelde vragen en inzichten
De NCI-H460 cellijn is afkomstig van een patiënt met grootcellig longcarcinoom, waardoor het een waardevol model is voor het bestuderen van dit type longkanker.
NCI-H460 cellen worden gebruikt om de biologie van longkanker te onderzoeken, nieuwe behandelingen te ontwikkelen en de werkzaamheid van potentiële medicijnen te beoordelen. Ze kunnen ook worden geïnjecteerd in immunodeficiënte muizen om in vivo tumormodellen te maken voor het bestuderen van tumorgroei en -ontwikkeling.
Zowel NCI-H460 als A549 cellijnen zijn afgeleid van longcarcinomen, maar NCI-H460 vertegenwoordigt grootcelcarcinoom, terwijl A549 staat voor adenocarcinoom. Dit verschil in histologisch subtype beïnvloedt hun karakteristieken en gedrag.
Ja, NCI-H460 cellen hebben tumorigene potentie en kunnen geïmplanteerd worden in immuundeficiënte muizen om xenograft-modellen te maken, wat de studie van grootcellig longcarcinoom in vivo vergemakkelijkt.
Het combineren van paclitaxel met andere verbindingen kan de cytotoxische effecten op NCI-H460-cellen versterken, waardoor de behandelresultaten bij longkanker mogelijk verbeteren.
Ja, NCI-H460 cellen brengen hypoxanthine guanine fosforibosyltransferase tot expressie, wat essentieel is voor het nucleotidenmetabolisme en de celproliferatie.
NCI-H460 cellen worden vaak gebruikt in kanker- en toxicologisch onderzoek om tumorgroei te bestuderen, cytotoxische effecten van verbindingen te beoordelen en mechanismen van geneesmiddelenresistentie te onderzoeken.
NCI-H460 cellen brengen typisch neurofilament triplet eiwitten tot expressie, die betrokken zijn bij het in stand houden van de cytoskeletstructuur en mogelijk een rol spelen bij de migratie en invasie van kankercellen.
Onder andere de κB-route is betrokken bij het reguleren van de proliferatie en overleving van NCI-H460 cellen, wat potentiële doelen biedt voor therapeutische interventie bij longkanker.
Ja, NCI-H460 cellen worden vaak gebruikt in vitro modellen om de cytotoxische effecten van chemotherapeutische middelen te beoordelen, waaronder paclitaxel en carboplatine, wat bijdraagt aan de ontwikkeling van effectieve kankerbehandelingen.
Referenties
- Hu, C., et al., NUCKS bevordert de proliferatie, migratie en invasie van longkankercellen via de Pi3k/Akt-signaalroute. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): p. E55-61.
- Qi, X., et al., EGPI-1, een nieuwe remmer van de interactie tussen eIF4E en eIF4G, remt de groei van longkankercellen en angiogenese via de Ras/MNK/ERK/eIF4E-signaalroute. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotinib oefent antikankereffecten uit op KRAS-gemuteerde longkankercellen door de MEK/ERK-route te onderdrukken. Cancer Management and Research, 2020: p. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Carnosinezuur vertoont antiproliferatieve en proapoptotische effecten in tumorale NCI-H460- en niet-tumorale IMR-90-longcellen. Journal of Toxicology and Environmental Health, Deel A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al., Totstandbrenging en karakterisering van pemetrexed-resistente NCI-H460/PMT-cellen. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (voorheen Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.