BEWO-cellijn
BeWo is een van menselijk choriocarcinoom afgeleide cellijn die op grote schaal wordt gebruikt in biomedisch onderzoek. Het dient als een waardevol in-vitro-model voor het onderzoeken van het ingewikkelde proces van placentaontwikkeling en syncytialisatie van menselijke trofoblasten. Onderzoekers gebruiken deze cellen ook om het gedrag van trofoblastcellen, de hormoonproductie en het transport van stoffen door de placenta te bestuderen. Daarnaast bieden BeWo-cellen ook toepassingen in toxicologie, infectie- en ziekteoverdrachtsstudies.
Dit artikel bevat fundamentele kennis over de BeWo-cellen die u kan helpen bij het werken met deze cellen in uw onderzoek. Het omvat:
- Algemene kenmerken en oorsprong van BeWo-cellen
- BeWo-cellijn: informatie over het kweken
- Voor- en nadelen van de BeWo-cellijn
- Toepassingen van BeWo-cellen in onderzoek
- Onderzoekspublicaties over BeWo-cellen
- Bronnen voor de BeWo-cellijn: protocollen, video's en meer
Algemene kenmerken en oorsprong van BeWo-cellen
Voorkennis over de oorsprong en algemene kenmerken van een cellijn is cruciaal voor het gebruik ervan in uw onderzoek. In dit deel van het artikel worden de oorsprong, kenmerkende eigenschappen en nog veel meer van de BeWo-cellijn besproken. Hier leert u: Wat is de BeWo-choriocarcinoomcellijn? Wat is BeWo-syncytialisatie? Waar komen BeWo-cellen vandaan? Wat is de morfologie van BeWo-cellen? Wat is de ploïdie van BeWo?
- De placentacellijn BeWo is in 1968 ontstaan uit het kwaadaardige gestationele choriocarcinoom van een mannelijke foetale placenta [1]. Daardoor dient deze als een onmisbaar model voor placentaonderzoek.
- BeWo-cellen vertonen een epitheelachtige morfologie.
- BeWo-cellen zijn relatief klein, variërend van 20 tot 30 µm [2].
- BeWo-cellen vertonen een stabiel karyotype. Hun stamlijnaantal is hypo-tetraploïd. Het modale chromosoomgetal van BeWo-cellen is 86. Dit kan variëren van 71 tot 178.
- BeWo-cellen produceren verschillende hormonen, namelijk humaan chorion-somatomammotropine, humaan choriongonadotrofine (hCG) en steroïde hormonen.
- BeWo-cellen brengen moleculaire markers tot expressie, waaronder CK 7, E-cadherine en VE-cadherine.
B30-sublijn
B30 is de sublijn van BeWo-cellen. Deze wordt gebruikt om de opname en het transport van voedingsstoffen te onderzoeken. Dit wordt toegeschreven aan hun krachtige groei op poreuze membranen.
BeWo en JEG-3
BeWo- en JEG-3-cellijnen zijn afgeleid van choriocarcinomen en worden gebruikt in placentaonderzoek. BeWo-cellen produceren minder hormonen dan JEG-3, zoals humaan choriongonadotrofine (hCG) en oestradiol.
BeWo-cellijn: Informatie over het kweken
Het onderhouden van een celkweek kan lastig zijn, tenzij u de belangrijkste details kent. Zoals: Wat is de verdubbelingstijd van BeWo? Wat is BeWo-celmedium? Hoe kweekt u de BeWo-cellijn? En hoe vriest u BeWo-cellen in?
Belangrijke punten voor het kweken van BeWo-cellen
Verdubbelingstijd:
De verdubbelingstijd van de BeWo-cellen bedraagt ongeveer 30 uur.
Hechtend of in suspensie:
BeWo is een hechtende cellijn.
Celdichtheid bij het uitzaaien:
De aanbevolen bezaaidichtheid voor BeWo-cellen is 1 x 10⁴ cellen/cm². Voor het bezaaien wordt het oude medium van de cellen verwijderd en worden de cellen gespoeld met 1x PBS. Vervolgens wordt Accutase (passageoplossing) toegevoegd en worden de cellen 8 tot 10 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd. Daarna worden de losgekomen cellen met kweekmedium gemengd en gecentrifugeerd. De geoogste cellen worden vervolgens opnieuw gesuspendeerd en in een nieuwe kweekfles gegoten.
Groeimedium:
Voor de kweek van BeWo-cellen wordt Ham’s F12K-medium gebruikt dat 10% FBS, 2,0 mM L-glutamine, 2,0 mM natriumpyruvaat en 2,5 g/L NaHCO₃ bevat. Het BeWo-celmedium moet 2 tot 3 keer per week worden ververst.
Groeicondities:
BeWo-cellen worden gekweekt in een bevochtigde incubator die is ingesteld op een temperatuur van 37 graden Celsius en voorzien is van een CO₂-toevoer van 5%.
Opslag:
Ingevroren BeWo-cellen worden bij een temperatuur van minder dan -150 °C bewaard in een elektrische ultralage-temperatuurvriezer of in de dampfase van vloeibare stikstof.
Invriesproces en medium:
Het wordt aanbevolen om BeWo-cellen in te vriezen in CM-1- of CM-ACF-invriesmedium. De cellen worden ingevroren met behulp van een langzame invriesmethode. Bij deze methode daalt de temperatuur slechts met 1 graad per minuut, waardoor de cellen geen schok ondergaan en hun levensvatbaarheid behouden blijft.
Ontdooiproces:
Ingevroren cellen worden ontdooid door ze 40 tot 60 seconden onder te dompelen in een vooraf ingesteld waterbad van 37 °C, totdat er nog slechts een klein klompje ijs overblijft. Vervolgens wordt vers kweekmedium toegevoegd en worden de cellen gecentrifugeerd om de componenten van het invriesmedium te verwijderen. Het verzamelde celpellet wordt opnieuw gesuspendeerd en in een kweekfles gebracht voor verdere groei.
Bioveiligheidsniveau:
Voor het hanteren en onderhouden van BeWo-celculturen is een laboratorium van bioveiligheidsniveau 1 vereist.
Gepubliceerd: 2023 | Laatst herzien: mei 2026
Voor- en nadelen van de BeWo-cellijn
BeWo-cellen vertonen unieke kenmerken en hebben specifieke voor- en nadelen. In dit gedeelte zullen we enkele opmerkelijke daarvan bespreken.
Voordelen
De belangrijkste voordelen van de BeWo-choriocarcinoomcellijn zijn:
-
In-vitro-model van placentacellen
BeWo-cellen bieden een in-vitro-model voor het bestuderen van het gedrag van trofoblastcellen en de syncytiëring van de placenta, waarbij processen worden nagebootst die in vivo moeilijk waar te nemen zijn.
-
Hormoonproductie
BeWo-cellen scheiden hormonen af, zoals hCG en placenta-lactogeen, waardoor ze waardevol zijn voor studies naar hormonale regulatie en onderzoek in de reproductieve biologie.
Nadelen
De nadelen van BeWo-trofoblastcellen zijn:
-
Kankercellijn
BeWo-cellen zijn afkomstig van choriocarcinoom, een placenta-tumor. Deze oorsprong geeft mogelijk geen volledig beeld van de normale functie van placenta-cellen.
Toepassingen van BeWo-cellen in onderzoek
De BeWo-cellijn wordt op grote schaal gebruikt in placentaonderzoek. Hieronder worden enkele specifieke toepassingen van deze cellijn genoemd:
- Placenta- en zwangerschapsgerelateerd onderzoek: BeWo-cellen spelen een cruciale rol in placenta- en zwangerschapsgerelateerd onderzoek. Onderzoekers gebruiken deze cellen bijvoorbeeld om het transport van stoffen, waaronder medicijnen, voedingsstoffen en toxines, door de placentabarrière te bestuderen. Daarnaast onderzoeken ze ook de productie en regulering van hormonen, waaronder humaan choriongonadotrofine (hCG), placenta-lactogeen en steroïde hormonen. Dit is belangrijk voor het begrijpen van hormonale veranderingen tijdens de zwangerschap. In 2018 is onderzoek gedaan naar het effect van broomhoudende vlamvertragers (BFR's) op de activiteit van sulfotransferase in de menselijke trofoblastcellijn (BeWo). Dit enzym is betrokken bij de regulering van de intracellulaire niveaus van het schildklierhormoon [3].
- Onderzoek naar infecties en ziekten: BeWo-cellen worden ook gebruikt om de interactie tussen pathogenen en placentacellen te onderzoeken. Dit onderzoek is waardevol voor het begrijpen van ziekten die van moeder op foetus kunnen worden overgedragen en voor het ontwikkelen van strategieën om de gezondheid van de foetus te beschermen. Bovendien helpt deze cellijn onderzoekers bij het onderzoeken van complicaties die tijdens de zwangerschap optreden, zoals pre-eclampsie. Zo maakte een studie uitgevoerd door Michalina Bralewska in 2023 gebruik van het BeWo-trofoblastcelmodel en ontdekte dat zowel chromogranine A (CgA) als het daarvan afgeleide peptide, catestatine (CST), mogelijk een rol spelen in het ingewikkelde proces van de pathogenese van pre-eclampsie (PE) [4]. In een later stadium onderzocht een andere studie het potentieel van trichosanthin tegen kanker met behulp van de BeWo-choriocarcinoomcellijn. Het onderzoek deed ook extra moeite om biomarkers te ontdekken door vergelijkende proteomische analyse uit te voeren voor en na het experiment [5].
5. Wetenschappelijke publicaties over BeWo-cellen
Hieronder volgen enkele belangrijke onderzoekspublicaties over de BeWo-trofoblastcellen.
Deze studie in Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) stelde dat AMPK-signalering mitofagie activeert in BeWo-trofoblastcellen via door FUNDC1 en PRKN gefaciliteerde mitofagieroutes. Als gevolg daarvan helpt mitofagie de ATP-productie en het mitochondriale membraanpotentieel in stand te houden.
Dit artikel is gepubliceerd in Animal Cells and Systems (2020). De studie stelde dat ethylparaben de apoptose van BeWo-cellen reguleert via het caspase 3-pad.
Deze studie in Drug Metabolism and Disposition (2023) maakte gebruik van placentacellijnen, waaronder BeWo, JAR, JEG-3 en HTR-8/SVneo, om de afzetting van xenobiotica en steroïden in cellen te onderzoeken.
Dit onderzoeksartikel in het International Journal of Molecular Medicine (2020) stelde dat apeline, de ligand van de APJ-receptor, de proliferatie van BeWo-cellen bevordert via APJ- en ERK1/2-, stat3- en AMPK-signalering. Het zou dus een essentieel adipokine kunnen zijn dat de ontwikkeling van de placenta reguleert.
Deze studie in Epilepsia (2021) onderzocht de effecten van foetale voedingsstoffen en anti-epileptica op choline-transporters in de van mensen afkomstige trofoblastische cellijn, BeWo.
Bronnen voor de BeWo-cellijn: protocollen, video's en meer
Hier zijn enkele online bronnen beschikbaar over de BeWo-cellen:
- In-vitrotransfectie: deze video helpt u het protocol voor in-vitrotransfectie van plasmide-DNA voor hechtende cellen te leren.
De volgende link bevat informatie over celculturen voor BeWo-cellen:
- BeWo-cellen: Deze website bevat essentiële informatie over de celkweek van de BeWo-cellijn. Dit omvat informatie over celmedia en kweekomstandigheden. Er zijn ook protocollen voor het subcultiveren en hanteren van cryogepreserveerde en proliferatieve culturen.
Referenties
- Weber, M., et al., Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Characteristics of trophoblasts in long-term culture. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: p. 259-265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt en H.M. Stapleton, Verstoring van de activiteit van schildklierhormoonsulfotransferase door broomhoudende vlamvertragende chemicaliën in de menselijke choriocarcinoom-placenta-cellijn, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha en A. Sakowicz, Vermindering van het CgA-afgeleide CST-eiwitniveau in HTR-8/SVneo- en BeWo-trofoblastcellijnen veroorzaakt door de pre-eclampsieomgeving. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
- Hu, Y., et al., Vergelijkende proteomische analyse van de toevoeging van het geneesmiddel trichosanthine aan de BeWo-cellijn. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.