BxPC-3-cellijn
BxPC-3 is een van mensen afkomstige celijn van alvleesklierkanker. Deze wordt op grote schaal toegepast in kankeronderzoek. Onderzoekers gebruiken deze cellen voornamelijk om de biologie van alvleesklierkanker te bestuderen, therapeutische doelwitten te identificeren en geneesmiddelen tegen kanker te ontwikkelen.
- Groei-medium
- RPMI 1640-medium wordt gebruikt voor het kweken van de BxPC-3-cellijn. Het wordt aangevuld met 10% foetaal runderserum, 2,1 mM stabiel glutamine en 2,0 g/l NaHCO3 om een ideale celgroei te bereiken. Het medium moet 2 tot 3 keer per week worden ververst.
- Verdubbelingstijd
- De verdubbelingstijd van BxPC-3-cellen ligt tussen 48 en 60 uur.
- Groeitype
- BxPC-3 is een hechtende cellijn.
- Bioveiligheidsniveau
- BSL-3
- Verkrijgbaar bij
- Cytion — Bestel BxPC-3
Dit artikel bevat essentiële informatie over de BxPC-3-cellijn die u aanzienlijk kan helpen bij het werken ermee. Het behandelt voornamelijk:
- Algemene informatie en oorsprong van de BxPC-3-cellijn
- Kweek van BxPC-3-cellen
- BxPC-3-cellijn: voordelen en beperkingen
- Toepassingen van BxPC-3-cellen in onderzoek
- Wetenschappelijke publicaties over BxPC-3-cellen
- Bronnen voor de BxPC-3-cellijn: protocollen, video's en meer
Algemene informatie en oorsprong van de BxPC-3-cellijn
Kennis over de oorsprong van een cellijn is cruciaal voor de toepasbaarheid ervan in onderzoek. Bekendheid met de kenmerken, waaronder morfologie, celgrootte en ploïdie, maakt het gebruik ervan eenvoudiger en handiger. Hier leert u de oorsprong en algemene kenmerken van BxPC-3-cellen kennen: Wat zijn BxPC-3-cellen? Wat is de BxPC-3-cellijn? Wat is de oorsprong van de BxPC-3-cellijn? Wat is de morfologie van BxPC-3?
- BxPC-3, menselijke pancreascarcinoomcellen, zijn in 1986 afkomstig van een 61-jarige Europese vrouw met pancreasadenocarcinoom. Deze cellen bleken tumorigenisch te zijn, zelfs nadat de patiënt verschillende bestralings- en chemotherapiebehandelingen had ondergaan. De gevestigde cellijn is dan ook een onmisbaar model voor het bestuderen van de ontwikkeling en progressie van kanker.
- BxPC-3-cellen bezitten een epitheelcelachtige morfologie.
- Het modale chromosoomgetal voor BxPC-3 is 59. Deze cellen hebben een homozygote deletie op chromosoom 18q, dat codeert voor het SMAD4/DPC4-eiwit. Bovendien mist de cellijn de BxPC-3-kras-mutatie die veel voorkomt bij pancreastumoren. In deze alvleesklierkankercellen wordt ook een BxPC-3-braf-deletie aangetroffen.
Wat is het verschil tussen BxPC3 en PANC-1?
BxPC-3 PADC (pancreasductaal adenocarcinoom) en PANC-1-cellen zijn primaire pancreaskankercellijnen met een epitheliale morfologie. Hierbij bezitten de eerstgenoemde cellen meer epitheliale eigenschappen, terwijl de laatstgenoemde meer mesenchymale kenmerken vertonen [1].
Het kweken van BxPC-3-cellen
De BxPC-3-cellijn wordt veel gebruikt in laboratoria voor kankeronderzoek. U moet de volgende belangrijke punten kennen voor een efficiënte kweek van deze alvleesklierkankercellijn. U leert: Wat is de verdubbelingstijd voor BxPC-3? Hoe kweekt u de BxPC-3-cellijn?
Belangrijke punten voor het kweken van BxPC-3-cellen
Verdubbelingstijd van de populatie:
De verdubbelingstijd van BxPC-3-cellen ligt tussen de 48 en 60 uur.
Hechtend of in suspensie:
BxPC-3 is een hechtende cellijn.
Splitsingsverhouding:
BxPC-3-cellen worden gesubcultiveerd in een verhouding van 1:2 tot 1:4. De cellen worden gewassen met 1 x PBS en geïncubeerd met een passageringoplossing genaamd accutase. Na 8-10 minuten wordt vers medium aan de cellen toegevoegd en worden de cellen gecentrifugeerd. Het pellet wordt opnieuw gesuspendeerd in medium en de cellen worden in een nieuw kweekvat gegoten om te groeien.
Groeimedium:
RPMI 1640-medium wordt gebruikt voor het kweken van de BxPC-3-cellijn. Het wordt aangevuld met 10% foetaal runderserum, 2,1 mM stabiel glutamine en 2,0 g/l NaHCO3 om een ideale celgroei te bereiken. Het medium moet 2 tot 3 keer per week worden ververst.
Groeicondities:
BxPC-3-celculturen worden gehouden in een bevochtigde incubator bij 37 °C die is aangesloten op een 5% CO2-toevoer.
Opslag:
Ingevroren cellen worden over het algemeen bewaard bij een temperatuur van minder dan -150 °C of in de dampfase van vloeibare stikstof om de levensvatbaarheid van de cellen te beschermen.
Invriesproces en medium:
CM-1 of CM-ACF kan worden gebruikt om BxPC-3-celculturen in te vriezen. Er wordt een langzaam invriesproces gevolgd waarbij de temperatuur slechts met 1 °C daalt, om te voorkomen dat de cellen een schok ondergaan.
Ontdooiproces:
Ingevroren BxPC-3-cellen worden gedurende 40 tot 60 seconden ontdooid in een vooraf ingesteld waterbad van 37 °C. Nadat er een klein klompje ijs is achtergebleven, worden de cellen toegevoegd aan vers kweekmedium en gecentrifugeerd om de elementen van het invriesmedium te verwijderen. Vervolgens wordt het celpellet opnieuw gesuspendeerd en worden de cellen in de kweekfles gedoseerd voor groei.
Bioveiligheidsniveau:
BxPC-3-celculturen worden onderhouden in laboratoria met bioveiligheidsniveau 1.
BxPC-3-cellijn: voordelen en beperkingen
BxPC-3 is een bekende celijn van pancreasadenocarcinoom die verschillende voordelen en beperkingen kent. De belangrijkste voor- en nadelen van de celijn staan hier vermeld.
Voordelen
De belangrijkste voordelen van BxPC-3-cellen zijn:
-
In-vitro-model van alvleesklierkanker
BxPC-3-cellen, afkomstig van patiënten met pancreasadenocarcinoom, vertonen relevante kenmerken, waardoor ze een geschikt model zijn voor het bestuderen van het gedrag van pancreaskanker in vitro.
-
Tumorogene cellijn
BxPC-3-cellen bezitten tumorogene eigenschappen en kunnen tumoren vormen wanneer ze worden geïnjecteerd in naakte of immuungecompromitteerde muizen. Deze tumoren lijken sterk op primaire alvleesklieradenocarcinoomtumoren, waardoor het BxPC-3-xenotransplantaatmodel ideaal is voor het bestuderen van de groei en progressie van kanker.
Beperkingen
De beperkingen van de BxPC-3-cellijn zijn:
-
Kruisbesmetting
De BxPC-3-cellijn brengt, net als elke andere, een risico op kruisbesmetting met zich mee. Onderzoekers moeten voorzichtig te werk gaan en zich houden aan strikte protocollen ter voorkoming van besmetting bij het hanteren van deze cellen.
-
Trage groeisnelheid
BxPC-3-cellen vertonen een relatief trage proliferatiesnelheid, met een verdubbelingstijd van 48 tot 60 uur. Deze eigenschap kan voor specifieke experimenten langere incubatieperioden vereisen, wat mogelijk vertragingen in de voortgang van het onderzoek kan veroorzaken.
Toepassingen van BxPC-3-cellen in onderzoek
BxPC-3-cellen bieden tal van toepassingen in kankeronderzoek. De meest voorkomende toepassingen zijn:
- Onderzoek naar alvleesklierkanker: BxPC-3-cellen bootsen alvleesklieradenocarcinoom na en worden daarom gebruikt om de genetische en moleculaire mechanismen te onderzoeken die ten grondslag liggen aan de ontwikkeling en groei van tumoren. Daarnaast ontdekken onderzoekers met behulp van deze cellen nieuwe biomarkers en therapeutische doelwitten. Bovendien brengen BxPC-3-cellen in aanzienlijke mate angiogene factoren tot expressie, namelijk interleukine-8 (IL-8), prostaglandine E2 (PGE2) en vasculaire endotheliale groeifactor (VEGF), waardoor ze geschikt zijn voor het bestuderen van angiogenese. Angiogenese is een cruciaal proces dat verband houdt met de groei en uitzaaiing van kanker. Een in 2022 gepubliceerde studie toonde aan dat overexpressie van laminine-5 gamma-2 (LAMC2) in BxPC3 PDAC (pancreasductaal adenocarcinoom) de tumorigenese versterkt via regulering van de BxPC3 EGFR/ERK1/2/ AKT/mTOR-signaalroute [2].
- Ontdekking en ontwikkeling van geneesmiddelen: de BxPC-3-cellijn dient als een onmisbaar testmodel voor geneesmiddelen tegen kanker. Onderzoekers onderzoeken de cytotoxische, antimetastatische en apoptotische effecten van potentiële geneesmiddelen op BxPC3 PDAC. Een studie uitgevoerd door Alexandria Turner en collega's in 2020 onderzocht de apoptotische eigenschappen van Elaeocarpus reticulatus-vruchtextracten in BxPC-3-alvleesklierkankercellen [3]. Evenzo werd in 2020 onderzoek uitgevoerd om het antikankerpotentieel van een methanolisch extract van een plant genaamd Oxialis obtriangulata in BxPC-3-cellen te bepalen. Daarnaast bestudeerden de onderzoekers ook het cellulaire mechanisme waardoor het plantenextract therapeutische effecten uitoefende [4].
5. Wetenschappelijke publicaties over BxPC-3-cellen
In dit gedeelte worden enkele van de meest geciteerde en interessante publicaties over de BxPC-3-cellijn opgesomd.
Deze publicatie in Chemico-Biological Interactions (2020) onderzocht de apoptotische effecten van een natuurlijk product, licocoumarone, op BxPC-3-cellen van alvleesklierkanker.
Dit onderzoeksartikel is gepubliceerd in Anticancer Research (2022). De studie stelde dat hydroxychloroquine BxPC3-celdood veroorzaakt door het BCL-XL-gen te remmen.
Dit onderzoek werd in 2020 gepubliceerd in het Journal of Cellular Biochemistry. De studie stelt dat een natuurlijke verbinding, salidroside, antikankeractiviteiten vertoont in BxPC-3-cellen door de HIF-1α (hypoxie-induceerbare factor) en LOXL2-signaalcascade te reguleren.
Dit artikel in Biomedicine & Pharmacotherapy suggereert dat ibrutinib kan worden gebruikt als een uitstekende radiosensibilisator bij patiënten met alvleesklierkanker. In vitro onderzoek in BxPC-3-cellen wijst erop dat het de BxPC3 EGFR-fosforylatie en de expressie van pAKT en stroomafwaartse genen die door radiotherapie worden opgereguleerd, vermindert.
Chelidonine induceert apoptose via GADD45a-p53-regulatie in menselijke alvleesklierkankercellen
Deze studie in Integrative Cancer Therapies stelt dat een natuurlijk product, chelidonine, apoptotische activiteit uitoefent in menselijke pancreascellen BxPC-3 via regulering van de BxPC3 p53- en GADD45a-signalering.
Bronnen voor de BxPC-3-cellijn: protocollen, video's en meer
De BxPC-3-cellijn heeft vele aantrekkelijke voordelen die deze geschikt maken voor onderzoeksdoeleinden. Veel online bronnen over de BxPC-3-cellijn vermelden de protocollen voor de hantering, het onderhoud en de transfectie ervan.
- BxPC-3-transfectie: deze video is een stapsgewijze handleiding voor het leren van het transfectieprotocol voor BxPC-3-cellen.
Dit gedeelte van het artikel bevat enkele links met uitleg over BxPC3-celkweekprotocollen.
- BxPC-3-celkweek: Deze website helpt u bij het leren van protocollen voor het subcultiveren en hanteren van cryogepreserveerde en proliferatieve BxPC-3-culturen.
Referenties
- Kim, Y., et al., Vergelijkende proteomische profilering van celijnen van ductaal adenocarcinoom van de alvleesklier. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Overexpressie van laminine-5 gamma-2 bevordert de tumorontwikkeling van ductaal adenocarcinoom van de alvleesklier via de EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR-cascade. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Vruchtextracten van Elaeocarpus reticulatus verminderen de levensvatbaarheid en induceren apoptose in pancreaskankercellen in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Antikankerpotentieel van Oxialis obtriangulata in alvleesklierkankercellen via regulering van de ERK/Src/STAT3-gemedieerde route. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.