THP-1-cellen onthuld: Baanbrekend onderzoek naar leukemie
DeTHP-1 cellijn, bekend als Tohoku Hospital Pediatrics-1, is een spontaan geïmmortaliseerde cultuur van menselijke monocytaire leukemiecellen. Het is een veelzijdig model voor het bestuderen van de biologie van monocyten, macrofaagactiviteiten en hun rol bij kanker en immuuntherapie. De menselijke leukemie THP1 cellijn weerspiegelt de fysiologische en functionele eigenschappen van monocyten uit perifeer bloed, waardoor het een onschatbare bron is voor het onderzoeken van monocyt differentiatie antigenen en de bredere aspecten van monocyt fysiologie. Dit artikel geeft een fundamenteel overzicht van de THP1 cellijn.
Algemene informatie en oorsprong van de THP-1 cellijn
Voor degenen die nieuw zijn in het werken met de THP-1 cellijn is het essentieel om de basiskenmerken te begrijpen. We zullen de definitie, oorsprong, morfologie, grootte en genomische eigenschappen bespreken.
THP-1 cellijn: THP-1 is een menselijke monocytaire leukemie cellijn afgeleid uit het perifere bloed van een 1-jarige patiënt gediagnosticeerd met acute monocytaire leukemie (M5 subtype) in 1980.
Morfologie: THP-1 cellen vertonen een ronde, grote en enkelvoudige celmorfologie.
Celgrootte: Deze cellen zijn relatief groot, met een gemiddelde diameter van meer dan 21 µm.
Genoom en mutatie: THP-1 is een bijna-diploïde cellijn, met een karyotype analyse die een diploïde chromosoomnummer (n = 46) laat zien.
De humane leukemiecellijn THP-1 kweken
Een goede kennis van de eigenschappen van een cellijn vereenvoudigt het kweekproces. Dit gedeelte bevat cruciale details voor de kweek en het onderhoud van de THP-1 cellijn, waaronder verdubbelingstijd, kweekmedia, hechtingseigenschappen, dichtheid van zaaien, groeicondities, opslag en de processen van invriezen en ontdooien.
Verdubbelingstijd: De verdubbelingstijd van THP-1 cellen is ongeveer 35 uur, hoewel dit kan variëren van 19 tot 50 uur afhankelijk van de kweekomstandigheden.
Hechting: THP-1 cellen groeien in suspensie, maar kunnen zich onder bepaalde omstandigheden differentiëren in adherente macrofaagachtige cellen.
Zaaidichtheid: De ideale zaaidichtheid varieert van 1,0x10^5 tot 1,5x10^6 levensvatbare cellen/mL. Dit wordt bereikt door cellen van een gegroeide cultuur te verdunnen tot de gewenste dichtheid.
Groeimedium: Het aanbevolen medium is RPMI 1640 aangevuld met 10% FBS, 1 mM natriumpyruvaat en 2,5 mM L-glutamine.
Groeicondities: Cellen moeten worden gekweekt in een bevochtigde incubator met 5% CO2 toevoer bij 37°C.
Opslag: Voor langdurige bewaring moeten de cellen worden bewaard bij -150°C om de levensvatbaarheid te behouden.
Invriesproces: Gebruik CM-1 of CM-ACF media voor een langzame invriesmethode, met een temperatuurdaling van 1°C per minuut.
Ontdooiproces: Snel roeren gedurende 40-60 seconden in een waterbad van 37°C dat een antimicrobieel middel bevat en vervolgens overbrengen naar kolven met groeimedia.
Bioveiligheidsniveau: THP-1 cellen moeten worden gehanteerd in laboratoria met bioveiligheidsniveau 1.
Deze gestroomlijnde en wetenschappelijk nauwkeurige beschrijving verschaft essentiële informatie over de THP-1 cellijn en helpt onderzoekers bij hun werk met dit waardevolle onderzoeksinstrument.
Onderzoek naar macrofaagbiologie met de THP-1-cellijn: Inzichten in differentiatie, functie en immuundynamiek
THP-1-cellen als model voor de differentiatie en functieanalyse van macrofagen
In relatie tot THP-1-cellen krijgen macrofaagdifferentiatie en -functies een unieke betekenis. THP-1-cellen zijn een menselijke leukemiemonocytlijn die vaak wordt gebruikt als model om monocyt- en macrofaagbiologie in vitro te bestuderen. Ze kunnen zich differentiëren in macrofaagachtige cellen wanneer ze behandeld worden met phorbol 12-myristaat 13-acetaat (PMA), wat de overgang nabootst die perifere monocyten ondergaan om macrofagen te worden in het lichaam. Na differentiatie kunnen THP-1-afgeleide macrofagen door specifieke stimuli worden gepolariseerd in M1- of M2-macrofagen, die de M1-geassocieerde pro-inflammatoire of de M2-geassocieerde anti-inflammatoire en weefselherstellende toestanden weerspiegelen.
Deze gedifferentieerde THP-1 macrofagen behouden belangrijke functies zoals fagocytose, antigenpresentatie en cytokineproductie, waardoor ze een in vitro systeem van onschatbare waarde zijn voor het onderzoeken van de moleculaire en cellulaire mechanismen die ten grondslag liggen aan macrofaagreacties op verschillende signalen. Studies met THP-1 cellen hebben inzichten verschaft in macrofaagactiviteiten, waaronder reacties op infectieuze agentia, interacties met kankercellen en de rol van macrofagen in immuunregulatie en ontsteking. THP-1 cellen dienen ook als een krachtig instrument voor het screenen van potentiële therapeutische verbindingen die macrofaagactiviteit kunnen moduleren en voor het onderzoeken van de immunologische aspecten van macrofaagbetrokkenheid bij ziektepathogenese en -oplossing.
Onderzoek naar macrofaagpolarisatie en -activiteiten met THP-1
THP-1 cellen zijn essentieel in de studie van menselijke macrofaag polarisatie, een proces dat cruciaal is voor het begrijpen van immuunreacties in gezondheid en ziekte. Door THP-1 cellen te differentiëren in M0, M1 en M2 macrofagen, kunnen onderzoekers de klassieke macrofaagactivering (M1) onderzoeken die geassocieerd wordt met pro-inflammatoire reacties en M2 macrofaagpolarisatie, die gekoppeld is aan anti-inflammatoire of genezingsprocessen. Dit model van macrofaagpolarisatie maakt een beter begrip mogelijk van de weergavefuncties van macrofagen in verschillende contexten, waaronder de ontwikkeling van tumoren en de respons van kankercellen op therapieën.
THP-1 in kankeronderzoek: Van apoptose tot chemoresistentie
De THP-1 cellijn is een belangrijke speler in het bestuderen van apoptose van kankercellen en de mechanismen die ten grondslag liggen aan de respons van tumorcellen op behandelingen. Assays die gebruik maken van THP-1 cellen, zoals ADCP assays gericht op specifieke kankercellen, helpen bij het ophelderen van de interacties tussen macrofagen en tumorcellen, waaronder HepG2 cellen. Bovendien draagt het onderzoek naar caspase-activiteit in THP-1 cellen bij aan ons begrip van apoptose, een cruciaal proces in de progressie en behandeling van kanker. De invloed van chemotherapeutische middelen, zoals etoposide, op THP-1 cellen biedt inzicht in de rol van deze cellen in chemoresistentie, wat hun relevantie in kankeronderzoek verder benadrukt.
THP-1-cellen en immunotherapie: Doelwit en respons
Op het gebied van immuuntherapie worden THP-1 cellen gebruikt om de interactie tussen immuuncellen en kanker te modelleren, waarbij wordt onderzocht hoe macrofagen kunnen worden ingezet om kankercellen, zoals Raji-cellen, aan te pakken. De studie van mRNA- en eiwitexpressie in THP-1 cellen helpt bij het begrijpen van de ingewikkelde signaalroutes die betrokken zijn bij de immuunrespons en het potentieel voor therapeutische interventie. Dit onderzoek is cruciaal voor het ontwikkelen van strategieën om macrofaagactiviteiten te manipuleren voor betere immunotherapeutische resultaten.
De THP-1 cellijn, door zijn vermogen om perifere monocyten na te bootsen en macrofaagpolarisatie te ondergaan, is een hoeksteen geworden in de studie van humane leukemie, macrofaagbiologie en hun implicaties in kanker en immuuntherapie. Zijn veelzijdigheid en relevantie in verschillende testen maken het een essentieel instrument voor het bevorderen van ons begrip van de rol van het immuunsysteem in gezondheid en ziekte.
Ontdek onze THP-1-cellijncollectie
Onderzoekstoepassingen van THP-1-cellen
Voordat u met een cellijn gaat werken, moet u de onderzoekstoepassing ervan doornemen en begrijpen hoe u deze cellen in uw onderzoek kunt gebruiken. Hier hebben we een paar prominente onderzoekstoepassingen van de THP-1 cellijn genoemd.
De THP-1 cellijn wordt veel gebruikt in immunologisch onderzoek omdat het kan differentiëren in verschillende immuuncellen. Hier zijn enkele voorbeelden van onderzoeken die THP-1 cellen hebben gebruikt:
- Een studie uit 2018 gebruikte THP-1 cellen om macrofaagcellen af te leiden en ontstekingsroutes en gerelateerde mechanismen te onderzoeken. De onderzoekers ontdekten dat een eiwit genaamd apolipoproteïne A-1-bindend eiwit (AIBP) ontstekingsroutes kon stoppen door te binden aan apoA-1 en ATP-bindende cassettetransporter A1 (ABCA1) te stabiliseren [3].
- Een andere studie gebruikte THP-1 cellen om monocyt-achtige cellen te ontwikkelen en de effecten van het neuroprotectieve docosahexaeenzuur (DHA) op deze cellen te onderzoeken in de context van de ziekte van Alzheimer. De studie onderzocht potentiële mechanismen die ten grondslag liggen aan de interactie van het amyloïde beta (Aβ) eiwit [4].
- Van THP-1 cellijnen afgeleide macrofagen werden in een andere studie gebruikt om het tumorbevorderende potentieel van exosomen, afgescheiden door cellen van het pancreatisch ductaal adenocarcinoom (PDAC), te onderzoeken [5].
Publicaties waarin THP-1-cellen in wetenschappelijk onderzoek naar voren komen
Er is een veelheid aan studies over THP-1 cellen. Hier hebben we een paar relevante voorbeelden opgesomd:
- Apolipoproteïne A-1-bindend eiwit remt ontstekingssignaleringsroutes door binding aan apolipoproteïne A-1 in THP-1-macrofagen. Dit onderzoek werd in 2018 gepubliceerd in het Circulation Journal. Dit onderzoek behandelde THP-1 cellijn-afgeleide macrofagen met lipopolysaccharide om ontstekingsroutes te induceren. De studie stelde voor dat Apolipoproteïne A-1-bindend eiwit ontstekingscascades voorkomt door zich te binden aan Apolipoproteïne A-1-eiwit.
- DHA vermindert Aβ-geïnduceerde necroptose via de RIPK1/RIPK3 signaalroute in THP-1 monocyten. Dit onderzoek stelde voor dat docosahexaeenzuur (DHA) necroptose, geïnduceerd door amyloïde bèta-eiwit, remt in THP-1-afgeleide monocyten in de context van de ziekte van Alzheimer
- Tumorbevorderende effecten van exosomen van alvleesklierkankercellen op THP-1-afgeleide macrofagen: In deze publicatie observeerden Linton en collega's het kankerbevorderende effect van pancreas ductaal adenocarcinoom cel-gescheiden exosomen op THP-1 cellijn-geproduceerde macrofagen.
- De effecten van afvalsortering in het omgevingsmicrobioom, de levensvatbaarheid van THP-1 cellen en ontstekingsreacties: Deze studie maakte gebruik van macrofagen afkomstig van de THP-1 cellijn en bestudeerde het effect van het microbioom dat aanwezig is in de afvalsorteerindustrie op de afscheiding van pro-inflammatoire cytokines door deze cellen.
- Gestandaardiseerde protocollen voor differentiatie van THP-1 cellen tot macrofagen met verschillende M (IFNγ+ LPS), M (IL-4) en M (IL-10) fenotypen: Deze studie beschreef protocollen voor het induceren van differentiatie in THP-1 cellen en het ontwikkelen van macrofagen met bepaalde fenotypen.
- Pro-atherogeen proteoglycanase ADAMTS-1 wordt neerwaarts gereguleerd door laurinezuur via PI3K en JNK signaalwegen in THP-1 macrofagen. Dit artikel werd in 2019 gepubliceerd in Molecular Biology Reports. Deze studie onderzocht het therapeutische potentieel van laurinezuur op THP-1-afgeleide macrofagen. De resultaten toonden aan dat laurinezuur atherosclerose plaque stabiliseert en trombose remt door ADAMS-1 (pro-atherogene proteoglycanase) expressie te moduleren.
Bronnen voor de THP-1 cellijn
Deze sectie behandelt alle beschikbare online bronnen over THP-1 cellen. Dit zal je aanzienlijk helpen bij het leren van kweek-, differentiatie- en transfectieprotocollen.
Protocollen voor celkweek
Dit zijn een paar bronnen die de kweek- en hanteringsprotocollen voor THP-1 cellen uitleggen.
- Kweek- en differentiatieprotocol: Dit document bevat gedetailleerde en uitgebreide informatie over celkweekmedia, subculturen, invriezen en ontdooien en differentiatieprotocollen van deze cellen.
- Subculturen van THP-1 cellen: Dit document bevat een subcultuurprotocol voor THP-1 cellen.
Transfectieprotocollen
- Transfectie van THP-1 cellen: Deze link gaat over het transfecteren van THP-1 cellen met plasmide DNA.
- Dit document beschrijft een transfectieprotocol van THP-1 cellen.
Video's over THP-1 cellen
THP-1 is een veel gekweekte cellijn. Er zijn veel video's beschikbaar waarin de behandeling en kweek van deze cellijn wordt uitgelegd:
- THP-1 cellen kweken: Deze video gaat over het kweken van de THP-1 cellijn.
- Transfectie van de THP-1 cellijn: Deze video toont een protocol voor zeer efficiënte transfectie van THP-1 cellen.
We hopen dat dit artikel de juiste informatie bevat over het kweken van THP-1 cellen, differentiatie, voordelen en onderzoekstoepassingen. Als u van plan bent om dit in vitro celmodel van acute myeloïde leukemie in uw onderzoek te gebruiken, overweeg dan om bij ons te bestellen.
FAQ's voor de THP-1-cellijn
THP-1-cellen zijn een menselijke monocytaire cellijn afkomstig van een patiënt met acute monocytaire leukemie. Ze worden veel gebruikt in onderzoek om monocyt/macrofaagfuncties, mechanismen van immuniteit en ontsteking en monocytische leukemie te bestuderen.
THP-1 macrofagen zijn gedifferentieerde vormen van THP-1 monocyten. Wanneer ze behandeld worden met bepaalde stoffen zoals Phorbol 12-myristaat 13-acetaat (PMA), differentiëren THP-1 cellen in macrofagen, waardoor ze nuttige modellen worden voor het bestuderen van macrofaagbiologie en -functie.
In onderzoek worden THP-1 cellen gebruikt om verschillende aspecten van de biologie van monocyten/macrofagen te bestuderen, waaronder differentiatie, activatie, reactie op infecties en de rol van macrofagen in ziekteprocessen, zoals kanker en ontsteking.
Referenties
- Chanput, W., J.J. Mes, en H.J. Wichers, THP-1 cell line: an in vitro cell model for immune modulation approach. Internationale immunofarmacologie, 2014. 23(1): p. 37-45.
- Chanput, W., V. Peters en H. Wichers, THP-1- en U937-cellen. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: p. 147-159.
- Zhang, M., et al., Apolipoproteïne A-1-bindend eiwit remt ontstekingssignaleringsroutes door binding aan apolipoproteïne A-1 in THP-1 macrofagen. Circulation Journal, 2018. 82(5): p. 1396-1404.
- Yuan, S., et al., DHA dempt Aβ-geïnduceerde necroptose via de RIPK1/RIPK3-signaleringsroute in THP-1-monocyten. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2020. 126: p. 110102.
- Linton, S.S., et al., Tumorbevorderende effecten van exosomen van alvleesklierkankercellen op THP-1-afgeleide macrofagen. PLoS One, 2018. 13(11): p. e0206759.