T98G-cellijn
T98G cellen vormen een menselijke glioblastoma cellijn die over het algemeen gebruikt wordt in biomedisch onderzoek. Deze cellen worden met name gebruikt in onderzoeken naar hersenkanker om cruciale cellen en moleculaire factoren die daaraan bijdragen te onderzoeken. Bovendien helpen ze onderzoekers bij het screenen en testen van nieuwe medicijnen tegen kanker die kunnen helpen bij de ontwikkeling van medicijnen.
Dit artikel bevat alle essentiële details over de T98G cellijn die je nodig hebt voordat je ermee aan de slag gaat, zoals:
- Algemene kenmerken en oorsprong van de T98G cellijn
- Kweekinformatie over de T98G cellijn
- T98G cellijn: Voordelen & nadelen
- Toepassingen van T98G cellen
- Onderzoek Publicaties met T98G-cellen
- Hulpmiddelen voor T98G-cellen: Protocollen, video's en meer
1. Algemene kenmerken en oorsprong van de T98G-cellijn
Dit gedeelte van het artikel zal je helpen om de fundamentele kenmerken van de T98G cellijn te verkennen. Het bevat informatie over de oorsprong van de cellijn, morfologie, grootte en ploïdie. Bovendien worden de volgende vragen uitgebreid behandeld: Wat zijn T98G-cellen? Wat voor celtype is T98G? Waar komt de T98G vandaan? Wat zijn de kenmerken van de T98G cellijn? Wat is glioblastoomcellijn T98G U87?
- De T98G-cellijn is ontwikkeld door GH Stein. Ze bestaat uit fibroblast-achtige cellen die afkomstig zijn uit het hersenweefsel van een 61-jarige blanke man met glioblastoma multiforme [1].
- T98G-cellen zijn niet-tumorigeen; ze veroorzaken geen tumoren wanneer ze worden geïnjecteerd in naakte muizen. Ze hebben echter de neiging om te woekeren met geschikte verankering in de celkweek.
- Deze cellen hebben een morfologie die op fibroblastcellen lijkt.
- De glioblastoomcellijn T98G vertegenwoordigt hyperpentaploïdie. Het modale chromosoomnummer varieert van 128 tot 132. Hogere ploïdieën kunnen voorkomen in 1,39% van de celpopulatie.
T98 vs T98G
Beide zijn menselijke glioblastoomcellijnen en hebben een vergelijkbare oorsprong. Het enige verschil tussen deze cellijnen is het aantal chromosomen. T98G heeft bijna twee keer zoveel chromosomen als T98. Daarom staat T98G bekend als de polyploïde variant van T98.
T98G vs U87
U87 en T98G zijn beide menselijke glioblastoomcellijnen die worden gebruikt in hersenkankeronderzoek. U87 vertoont een agressiever fenotype in vergelijking met T98G GBM.
2. Kweekinformatie over T98G cellijn
Kweekinformatie over een cellijn is cruciaal om te weten voordat je ermee aan de slag gaat. Het zal je helpen om de cellijn gemakkelijk en handig te hanteren in het laboratorium. Je moet het weten: Wat is de verdubbelingstijd voor de T98G cellijn? Welke groeimedia het beste zijn voor T98G cellen? Wat zijn de groeikenmerken van T98G? Wat is de zaaidichtheid van T98G-cellen? Hoe vries je T98G cellen in?
Belangrijkste punten voor het kweken van T98G-cellen
|
Verdubbelingstijd: |
De geschatte verdubbelingstijd van T98G cellen is 40 uur. Dit kan variëren afhankelijk van de kweekomstandigheden. |
|
Adherent of in suspensie: |
T98G cellen zijn adherent. Ze hechten zich aan de bodem van kweekvaten en vormen monolagen. |
|
Splitsingsverhouding: |
De T98G-cellen worden gesubcultiveerd in een splitratio van 1:2 tot 1:5. Hiervoor worden de cellen eerst gewassen. Hiervoor worden de cellen eerst gewassen met 1 X PBS-buffer en vervolgens geïncubeerd met passagingoplossing (Accutase) gedurende 8 tot 10 minuten bij omgevingstemperatuur. Na incubatie worden de losgemaakte cellen toegevoegd aan vers groeimedium en gecentrifugeerd. Vervolgens wordt de verzamelde celpellet voorzichtig geresuspendeerd en worden de cellen in een kweekfles met groeimedium gedoseerd. |
|
Groeimedium: |
EMEM-medium met 10% foetaal runderserum, 2 mM L-glutamine, 2,2 g/L NaHCO3 en EBSS wordt gebruikt om T98G-cellen te kweken. Het medium moet 3 tot 4 keer per week worden vervangen. |
|
Groeicondities: |
T98G-cellen worden onderhouden in een vochtige incubator die is ingesteld op 37°C en is aangesloten op een CO2-toevoer. |
|
Opslag: |
Bevroren cellen kunnen bewaard worden bij -150°C of in de dampfase van vloeibare stikstof om de levensvatbaarheid van de cellen op langere termijn te beschermen. |
|
Invriesproces en medium: |
T98G cellen worden aanbevolen om in te vriezen in CM-1 of CM-ACF celvriesmedium. Hiervoor wordt een langzaam invriesproces voorgesteld dat slechts een temperatuurdaling van 1 °C per minuut toestaat. Dit voorkomt dat de cellen een schok krijgen en behoudt hun levensvatbaarheid. |
|
Ontdooien Proces: |
Bevroren cellen worden voorzichtig ontdooid door ze 40 tot 60 seconden in een voorverwarmd waterbad van 37 graden Celsius te leggen. Vervolgens worden ze geresuspendeerd in verse groeimedia en overgebracht naar een nieuwe kolf. Na 24 uur incubatie wordt de media vervangen om bevriezende mediacomponenten te verwijderen. |
|
Bioveiligheidsniveau: |
T98G culturen worden onderhouden in bioveiligheid één laboratorium. |
3. T98G-cellijn: Voordelen en nadelen
T98G is een veelgebruikte, van mensen afgeleide glioblastoomcellijn. Het heeft verschillende voor- en nadelen die het onderscheiden van andere cellijnen. Een paar opmerkelijke worden in dit gedeelte van het artikel besproken.
Voordelen
De voordelen van de T98G cellen zijn:
-
Goed gekarakteriseerd
Een gevestigde en goed gekarakteriseerde cellijn. Uitvoerig bestudeerd en gedocumenteerd in de literatuur.
-
In vitro model
Representeert de kenmerken van glioblastoma, de meest agressieve hersentumor. Een waardevol hulpmiddel voor ziekteonderzoek, het begrijpen van de biologie en de ontwikkeling van behandelingen.
Nadelen
De nadelen van T98G cellen zijn:
-
Heterogeniteit
Genetische heterogeniteit in de T98G celpopulatie kan leiden tot inconsistentie in experimentele resultaten en de interpretatie van gegevens bemoeilijken.
4. Toepassingen van T98G-cellen
De T98G-cellijn is een waardevol hulpmiddel voor kankeronderzoek. Enkele belangrijke onderzoekstoepassingen van de T98G-cellen worden hier genoemd:
- Kankeronderzoek: De T98G cellijn is een waardevol instrument voor het onderzoeken van de biologie van glioblastoma tumoren. Deze cellen worden voornamelijk gebruikt om de ingewikkelde moleculaire routes te bestuderen die ten grondslag liggen aan de ontwikkeling en progressie van glioblastoomaandoeningen. Bovendien worden ze gebruikt om genetische mutaties te identificeren die tumorgroei en andere kankercelmechanismen aansturen. Yang Chen en collega's werkten met deze cellen en ontdekten dat overexpressie van miRNA-21 het PDCD4-niveau (Programmed Cell Death Protein 4) in T98G-cellen verlaagt. Dit leidt tot remming van PDCD4-gemedieerde T98G-celapoptose. De studie suggereert dus miRNa-21 als een potentieel doelwit voor het ontwikkelen van therapieën [2]. Vergelijkbaar met dit onderzoek bestudeerden Fanqiang Kong en collega's de rol van microRNA-15a in de proliferatie en invasie van T98G glioblastoomcellen. Ze ontdekten dat miRNA-15a-5p deze celprocessen bevordert door zich te richten op celadhesie molecuul 1 (CADM1) [3].
- Geneesmiddelenonderzoek en therapeutische ontwikkeling: T98G dient als een geweldig glioblastoma in vitro model voor het screenen van nieuwe medicijnen en als platform voor het evalueren van de effectiviteit van potentiële kankertherapieën. Onderzoekers testen ook een verscheidenheid aan verbindingen en therapieën om kandidaat-geneesmiddelen met de meest veelbelovende anti-glioblastoma eigenschappen te identificeren en te ontdekken. Dit leidt tot de ontwikkeling van nieuwe medicijnen en behandelingsstrategieën, die hoop bieden voor glioblastoma-patiënten. In een dergelijk onderzoek werd het antikankerpotentieel onderzocht van een natuurlijke verbinding genaamd corilagine in de temozolomide-resistente T98G GBM-cellijn. De bevindingen van de studie stelden dat corilagine, in combinatie met temozolomide, hogere niveaus van antiproliferatieve en anti-apoptotische effecten in cellen induceert [4].
5. Onderzoekspublicaties met T98G-cellen
Hieronder volgen enkele interessante en vaak geciteerde onderzoekspublicaties over T98G, de glioblastoomcellijn.
Chemotherapeutisch effect van SR9009, een REV-ERB agonist, op het humane glioblastoom T98G cellen
Deze publicatie in ASN Neuro (2019) onderzocht de antikankereffecten van een REV-ERB-agonist genaamd SR9009 op T98G glioblastoomcellen.
In dit onderzoeksartikel in Neurochemical research (2019) wordt voorgesteld dat natriumbutyraat en quercetine synergetisch de beschermende autofagie in T98G-cellen remmen en de celapoptose verhogen.
Deze studie in Genes (2023) onderwierp de aan hypoxie aangepaste T98G-cellijn aan RNA-sequencing en stelde IRE1 (Inositol-requiring enzyme 1) voor als een veelbelovend therapeutisch doelwit.
MicroRNA-548c-3p remt de proliferatie en migratie van T98G glioomcellen door c-Myb te downreguleren
Dit artikel is gepubliceerd in Oncology Letters (2017). De studie onderzocht dat miRNA-548c-3p zich richt op T98G oncogenen (c-Myb) om de proliferatie en migratie van T98G cellen te remmen.
In dit artikel in het Journal of Medicinal Plants Research (2011) wordt voorgesteld dat het chloroformextract van Dracocephalum tanguticum een antiproliferatieve werking heeft op T98G-cellen door de genen caspase-3, Bax en P21 te moduleren.
6. Bronnen voor T98G-cellen: Protocollen, video's en meer
De beschikbare bronnen met de T98G-celkweek- en transfectieprotocollen worden hier genoemd.
- T98G transfectie: Dit onderzoeksartikel bevat het protocol voor T98G-transfectie. Het legt kort de methode en vereiste reagens.
De volgende links zullen je enorm helpen om het T98G celkweekprotocol te leren en je werk ermee te vergemakkelijken.
- T98G cellen: Deze website bevat cruciale informatie over T98G celkweekprotocollen, waaronder subculturen en het omgaan met proliferatieve en gecryopreserveerde culturen. Bovendien leer je er ook de celgroei media, condities en verdubbelingstijd.
Referenties
- Haehl, E., Endothelial-cell induced radioresistance in glioblastoma. 2021, Universität Tübingen.
- Chen, Y., et al., MicroRNA-21 down-regulates the expression of tumor suppressor PDCD4 in human glioblastoma cell T98G. Cancer letters, 2008. 272(2): p. 197-205.
- Kong, F., et al., MicroRNA-15a-5pbevordert de proliferatie en invasie van T98G glioblastoomcellen via targeting van celadhesie molecuul 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): p. 1-1.
- Milani, R., et al., Corilagin induceert hoge niveaus van apoptose in de temozolomide-resistente T98G glioomcellijn. Oncol Res, 2018. 26(9): p. 1307-1315.