MCF-7 cellijn: Een hoeksteen in borstkankeronderzoek en medicijntesten
De MCF-7 cellijn, die in 1973 werd ontwikkeld uit menselijke borstadenocarcinoomcellen, staat aan de top van het borstkankeronderzoek en vormt een cruciaal model voor het ontrafelen van de complexe biologie van oestrogeen- en progesteronreceptor-positieve borstkankers. Deze cellen dienen als een microkosmos van menselijke borstkanker en vertonen kenmerken die cruciaal zijn voor het bestuderen van zowel hormoonafhankelijke als onafhankelijke tumorgroei. Onderzoekers gebruiken MCF-7 cellen om de ingewikkelde dans van hormonen zoals oestrogeen en tamoxifen in het reguleren van de proliferatie van kankercellen te onderzoeken, waarbij ze zich verdiepen in de moleculaire fijne kneepjes van sferoïdevorming tot klinische borstkankerprogressie
In onderzoeken naar uitgezaaide borstkanker zijn MCF-7 cellen van cruciaal belang. Deze worden gebruikt in geavanceerde benaderingen zoals het inbedden in microweefsels in scaffolds of vrije hydrogels, waarbij de natuurlijke omgeving van de tumor wordt nagebootst. Dit helpt bij het onderzoeken van metastatische ziekte, vooral bij postmenopauzale vrouwen, en de verschillende effecten op de linker- en rechterborst. Farmacogenetische en farmaco-epigenetische overwegingen vormen de kern van dit onderzoek, waarbij MCF-7 cellen licht werpen op stadiapecifieke ziektekenmerken en reacties op behandeling in vivo.
MCF-7 cellen dienen ook als basis in oncologiestudies voor het testen van innovatieve therapieën, zoals elektrochemotherapie met hoog voltage, en in diermodellen die menselijke borsttumorcellen nabootsen. De rol van mesenchymale stamcellen bij het moduleren van het gedrag van deze tumorcellen is een ander aspect dat onderzocht wordt. Bovendien biedt het begrijpen van de interactie tussen oestrogeen, androgeen en de groei van borstkankercellen door middel van MCF-7 inzichten van onschatbare waarde, die de voortdurende zoektocht naar kennis in het zich steeds verder ontwikkelende kankeronderzoek voeden.
MCF-7 cellijn: Oorsprong en algemene informatie
Voordat we met de MCF-7 cellijn gaan werken, is het essentieel om de morfologie, celgrootte en andere algemene kenmerken te begrijpen.
De naam 'MCF-7' staat voor Michigan Cancer Foundation - 7. Deze cellijn werd opgericht door Dr. Soulele. Deze cellijn is ontwikkeld door Dr. Soule van de Michigan Cancer Foundation in Detroit, Michigan. Deze cellijn werd in 1970 geïsoleerd uit de pleurale effusie van een 69-jarige Kaukasische vrouw met uitgezaaid adenocarcinoom van de borst. De MCF-7 is een Luminal A subtype van borstkanker dat oestrogeen-, progesteron- en glucocorticoïdreceptoren tot expressie brengt [1, 2].
MCF-7 cellen zijn hormoonafhankelijke borstkankercellen. Deze mamma-epitheelcellen hebben een laag metastatisch potentieel en zijn minder agressief in vergelijking met hormoononafhankelijke MDA-MB-231 cellen [3].
- Morfologie van MCF-7 cellen:Epitheliale morfologie; cellen groeien als monolagen met sterke cel-cel adhesies; kassei-achtig uiterlijk
- Celgrootte: Varieert tussen 19,9 μm en 33,9 μm
- Genoom en ploïdie: Modaal aantal chromosomen: 82; Ploïdie bereik: 66 tot 87
- MCF-7 cellijn varianten: Er zijn meerdere KO varianten die verschillende genetische profielen en gen expressies vertonen in vergelijking met de originele MCF-7 cellen [4]
Informatie over de celkweek van MCF-7 cellen
MCF-7 is een veel gekweekte cellijn in laboratoria voor borstkankeronderzoek. Voordat je deze cellen kweekt, kunnen er veel vragen bij je opkomen, zoals wat is de verdubbelingstijd van MCF-7 cellen? Zijn MCF-7 cellen adherent? En wat is het kweekmedium voor MCF-7 cellen? In dit gedeelte bespreken we de volgende belangrijke punten:
|
Aspect |
Beschrijving |
|
Verdubbelingstijd |
De gemiddelde verdubbelingstijd van MCF-7 cellen is 24 uur |
|
Adherent of in suspensie |
MCF-7 cellen zijn adherente cellen die groeien als monolayers en celaggregaten vormen |
|
Zaaidichtheid |
Langzaam groeiende MCF-7 cellen worden uitgezaaid bij een dichtheid van 3 x 10^4 cellen/cm^2. Na het verwijderen van de media worden de aanhangende MCF-7 cellen gewassen met 1 x PBS. Cellen worden losgemaakt met behulp van Accutase passaging-oplossing. Kweekmedia wordt toegevoegd en de cellen worden gecentrifugeerd. Celpellets worden geresuspendeerd en overgebracht naar nieuwe kolven met vers groeimedium |
|
Groeimedium |
Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) aangevuld met 10% FBS en 2,5 mM L-glutamine wordt gebruikt voor het kweken van MCF-7 cellen. Het medium wordt 2 tot 3 keer per week vernieuwd |
|
Groeicondities |
MCF-7 cellen worden gekweekt in een vochtige incubator bij 37°C met 5% CO2 |
|
Opslag |
De cellen worden opgeslagen in de dampfase van vloeibare stikstof (-195°C) om de levensvatbaarheid van de cellen te behouden |
|
Invriesproces en medium |
Voor het invriezen van MCF-7 cellen wordt de voorkeur gegeven aan een langzame invriesmethode, waarbij de temperatuur geleidelijk met 1°C wordt verlaagd om de levensvatbaarheid van de cellen te beschermen. De voor MCF-7 cellen gebruikte vriesmedia zijn CM-1 of CM-ACF |
|
Ontdooi proces |
Bevroren MCF-7 cellen worden snel geroerd in een voorverwarmd waterbad (37°C) gedurende 40-60 seconden. Een klein ijsklontje wordt in het flesje gelaten om het koel te houden. De cellen kunnen direct in een kolf met vers groeimedium worden gekweekt of worden gecentrifugeerd om het vriesmedium te verwijderen. De resulterende celpellet wordt voorzichtig geresuspendeerd in verse media en in kolven gedistribueerd voor groei |
|
Bioveiligheidsniveau |
Bioveiligheidsniveau 1 wordt gebruikt voor het hanteren van drievoudig positieve MCF-7 cellen |
MCF-7 cellen: Voordelen en beperkingen
Alle kankercellijnen hebben voor- en nadelen. Dus, wat zijn de voordelen van MCF-7 cellen die het aantrekkelijk maken voor onderzoek? En wat zijn de beperkingen van de MCF-7 cellijn?
Voordelen
Er zijn veel voordelen verbonden aan de MCF-7 cellijn. Hier zijn er een paar impera:
- Goed gekarakteriseerd: De MCF-7 cellijn is goed gekarakteriseerd, waardoor het een veelgebruikte keuze is in kankeronderzoekslaboratoria
- Responsief voor oestrogeen: MCF-7 zijn oestrogeengevoelige borstkankercellen. Ze zijn afhankelijk van oestrogeen voor groei en proliferatie en brengen hogere mRNA-niveaus van oestrogeenreceptor-alfa (ERα) tot expressie dan ERβ. Dit maakt MCF-7 cellen zeer bruikbaar voor het bestuderen van de rol van oestrogeenreceptorsignalering in de biologie van borstkanker.
- Hormoonafhankelijk: MCF-7 cellen zijn representatieve modellen van receptor-positieve, hormoonafhankelijke borstkanker.
Beperkingen
De beperkingen die vaak worden toegeschreven aan MCF-7 cellen zijn:
- Trage groeisnelheid: Vergeleken met andere borstkankercellijnen groeien MCF-7 cellen langzaam. Daarom worden deze cellen bij relatief hoge celdichtheden uitgezaaid om verschillende celkweekexperimenten uit te voeren.
MCF-7 cellen: Multidisciplinair onderzoek en implicaties voor borstkanker
Borstkanker karakteriseren met MCF-7 cellen
MCF-7 cellen zijn een hoeksteen in borstkankeronderzoek en zijn afkomstig van menselijk borstadenocarcinoomweefsel uit 1973. Deze cellen zijn vooral belangrijk in het onderzoek naar oestrogeenreceptor-positieve borstkanker vanwege hun expressie van oestrogeenreceptoren. Ze stellen onderzoekers in staat om de nuances van oestrogeen-afhankelijke groei en de werkzaamheid van hormonale therapieën zoals tamoxifen te onderzoeken en zo de werkingsmechanismen en resistentie tegen deze behandelingen verder op te helderen
Naast hormoongerelateerde studies zijn MCF-7 cellen cruciaal voor het onderzoeken van borstkanker op moleculair niveau. Hun toepassing varieert van het analyseren van het moleculaire profiel van tumoren tot het bestuderen van de proliferatie en progressie van kankercellen in 2D-culturen en driedimensionale microweefsels in scaffolds, die de in vivo tumormicro-omgeving nauwkeurig weerspiegelen
Bestrijding van geneesmiddelenresistentie in borstkanker
MCF-7 cellen hebben aanzienlijk bijgedragen aan het begrijpen en overwinnen van medicijnresistentie bij de behandeling van borstkanker. Door resistentie te induceren door blootstelling aan hoge doses chemotherapeutische medicijnen, kunnen onderzoekers de mechanismen onderzoeken die leiden tot het terugvallen van kanker en een verminderde overleving van patiënten. Diepgaand onderzoek met MCF-7 cellen heeft de rol van lang niet-coderend RNA HOTAIR in geneesmiddelenresistentie aan het licht gebracht, wat een potentieel doelwit vormt voor therapeutische interventie
De voortdurende ontwikkeling van chemotherapeutische medicijnen steunt ook op MCF-7 cellen om het antikankerpotentieel van verschillende stoffen te screenen, waaronder natuurlijke producten, synthetische verbindingen en nanodeeltjes. Deze inspanningen zijn essentieel voor het creëren van effectievere borstkankerbehandelingen die resistente stammen van kankercellen kunnen aanpakken
Bevorderen van therapeutische ontwikkeling en klinische toepassingen
De inzichten die zijn verkregen uit onderzoek met MCF-7 cellen worden uitgebreid naar de therapeutische ontwikkeling van borstkanker. MCF-7 cellen fungeren als een cruciaal hulpmiddel voor preklinische testen en worden gebruikt om verbindingen te screenen, cytotoxiciteit te bepalen en apoptose-inductie te evalueren. Dit onderzoek heeft diepgaande implicaties voor toekomstige klinische toepassingen, waarbij de bevindingen van studies met MCF-7 cellen informatie zullen blijven verschaffen over innovatieve strategieën om de patiëntenzorg en behandelingsresultaten te verbeteren
Ontgrendel uw onderzoekspotentieel: Koop vandaag nog MCF-7 celproducten!
MCF-7 cellen: Publicaties
Er is een overvloed aan publicaties over MCF-7 cellen. Deze sectie zal slechts enkele opmerkelijke voorbeelden behandelen:
Dit artikel is gepubliceerd in Experimental and Therapeutic Medicine in 2019 door Zhixiang Li en collega's. De studie stelde voor dat het uitschakelen van lang niet-coderend RNA HOTAIR doxorubicineresistentie in MCF-7 borstkankercellen elimineert door de PI3K/AKT/mTOR-signaleringsroute te reguleren.
In deze publicatie in het tijdschrift Chemico-Biological Interactions werden ouder- en geneesmiddelresistente MCF-7 cellen gebruikt om het effect van de verbinding Guajadial op geneesmiddelenresistentie te bestuderen. Deze verbinding remt de expressie van ABC-transporter en downreguleert de PI3K/AKT-route om multi-geneesmiddelresistentie om te keren.
Dit gepubliceerde artikel beschrijft de synergetische interactie van cannabidiol en vijf chemotherapeutische geneesmiddelen in MCF-7 cellen. Het onderzoek suggereert op cannabidiol gebaseerde synergetische adjuvante therapieën voor de behandeling van borstkanker.
In dit artikel, gepubliceerd in The EuroBiotech Journal, werden MCF-7 cellen gebruikt voor het evalueren van het antitumoreffect van fenolverbindingen die aanwezig zijn in enkele Tunesische medicinale planten.
Het onderzoek stelde groene nanodeeltjes geladen met Allium cepa bladextract voor als kandidaat-geneesmiddel. Deze nanodeeltjes vertonen antikanker- en antioxidantwerking in MCF-7 cellen.
MCF-7 cellen Bronnen: Protocollen, video's en meer
MCF-7 is een vaak gekweekte borstkankercellijn. Er zijn verschillende bronnen beschikbaar over deze cellijn waarin de behandeling, kweek- en transfectieprotocollen worden uitgelegd.
Protocollen voor celkweek
Hieronder volgen enkele bronnen met informatie over het kweken van MCF-7 cellen.
- Celsplitsing: Dit document helpt u bij het leren van het celpassageproces en het ontdooiproces voor MCF-7.
- MCF-7 cellen: Dit artikel biedt alle basis- en geavanceerde kennis over MCF-7 cellen. Het bevat ook het kweekprotocol voor MCF-7 cellen.
Transfectie protocollen
Hier zijn enkele bronnen met transfectiemethoden voor de MCF-7 cellijn.
- Transfectie van plasmide DNA in MCF-7 cellen: Deze website link geeft u een gedetailleerd transfectieprotocol voor MCF-7 cellen.
- Transfectie van MCF-7 cellen: Deze link bestaat uit geoptimaliseerde transfectieprotocollen met betrekking tot de MCF-7 cellijn, gedeeld door wetenschappers van over de hele wereld.
Video's over de MCF-7 cellijn
Er zijn veel video's over MCF-7 cellen. Hier bespreken we een aantal video's over de transfectie en kweek van MCF-7.
- MCF-7 cel transfectie: Deze video toont het transfectieprotocol voor MCF-7 cellen.
- Het doorgeven van cellen: Deze video legt het basisprotocol uit dat wordt gevolgd voor het kweken van cellijnen.
- Invriezen van adherente cellen: Deze video bevat informatie over het invriezen van adherente cellijnen.
We verwachten dat dit artikel je goed heeft begeleid bij het hanteren, subkweken en onderhouden van MCF-7 cellen. Daarnaast kan het je helpen meer te weten te komen over de voordelen en onderzoekstoepassingen van deze cellijn. Als je van plan bent om met MCF-7 cellen te werken, bestel dan bij ons.
Antwoorden op veelgestelde vragen: Het verkennen van MCF-7 cellijnen
Referenties
- Moon, H.-r., et al., "Subtype-specifieke karakterisering van borstkankerinvasie met behulp van een microfluïdisch tumorplatform." PloS one, 2020, 15(6)
- Hegde, S.M., et al., "Samenspel van nucleaire receptoren (ER, PR en GR) en hun steroïde hormonen in MCF-7 cellen." Mol Cell Biochem, 2016, 422(1-2)
- Comşa, Ş., A.M. Cimpean, en M. Raica, "Het verhaal van MCF-7 borstkankercellijn: 40 jaar ervaring in onderzoek." Antikankeronderzoek, 2015, 35(6)
- Lee, A.V., S. Oesterreich, and N.E. Davidson, "MCF-7 cells-changing the course of breast cancer research and care for 45 years." JNCI: Journal of the National Cancer Institute, 2015, 107(7)
- Li, Z., et al., "Knockdown van lncRNA-HOTAIR downreguleert de geneesmiddelresistentie van borstkankercellen tegen doxorubicine via de PI3K/AKT/mTOR-signaleringsroute." Experimentele en therapeutische geneeskunde, 2019, 18(1)
- Li, Y., et al., "Guajadial keert multidrugresistentie om door ABC-transportexpressie te remmen en de PI3K/Akt-pathway te onderdrukken in geneesmiddelresistente borstkankercellen." Chemisch-biologische interacties, 2019, 305
- Ruenraroengsak, P., et al., "Frizzled-7-gerichte toediening van zinkoxide nanodeeltjes aan geneesmiddelresistente borstkankercellen." Nanoscale, 2019, 11(27)
- Shrihastini, V., et al., "Plantaardige afgeleide bioactieve verbindingen, hun antikankereffecten en in silico benaderingen als alternatieve doelwit behandelingsstrategie voor borstkanker: Een geactualiseerd overzicht." Kanker, 2021, 13(24)
- Erdogan, O., et al., "Groene synthese van zilveren nanodeeltjes via Cynara scolymus bladextracten: De karakterisering, antikankerpotentieel met fotodynamische therapie in MCF7-cellen." PloS one, 2019, 14(6)
- Barbosa, A.M. en F. Martel, "Targeting glucose transporters for breast cancer therapy: Het effect van natuurlijke en synthetische verbindingen." Kanker, 2020, 12(1)
