Terreno di coltura cellulare

Le cellule coltivate richiedono un controllo ambientale meticoloso per una crescita e un mantenimento di successo. Un approccio completo prevede la garanzia della sterilità, dell'apporto di nutrienti, della stabilità del pH e del controllo della temperatura.

Condizioni di sterilità e apporto di nutrienti

Per prevenire la contaminazione e garantire la vitalità delle cellule, è fondamentale un ambiente sterile. Questo si ottiene in genere con tecniche asettiche e apparecchiature specializzate, come le cappe a flusso laminare. I nutrienti vengono forniti attraverso i terreni di coltura, che contengono una miscela di ingredienti essenziali, tra cui:

  • Sali inorganici: Vitali per mantenere l'equilibrio osmotico e per fornire gli ioni necessari alle attività cellulari.
  • Carboidrati: Servono come fonti di energia; il glucosio è lo zucchero più comunemente usato.
  • Aminoacidi: sono i mattoni delle proteine; alcuni sono essenziali e non possono essere sintetizzati dalle cellule.
  • Vitamine: Agiscono come cofattori per le reazioni enzimatiche; le vitamine del gruppo B sono essenziali per il metabolismo cellulare.
  • Acidi grassi e lipidi: Componenti essenziali per l'integrità e la funzione della membrana cellulare.
  • Proteine e peptidi: Nei terreni di coltura privi di siero, sostituiscono i fattori di crescita e le proteine leganti tipicamente fornite dal siero.
  • Siero: Spesso incluso come fonte di fattori di crescita, anche se le alternative prive di siero si stanno diffondendo per ridurre la variabilità e i rischi di contaminazione.
  • stabilità del pH e della temperatura: Le cellule necessitano di un intervallo di pH compreso tra 7,2 e 7,4 per una crescita ottimale. Questo intervallo è regolato da sistemi tampone, che possono essere a base di CO2/bicarbonato o ottenuti chimicamente con agenti come l'HEPES. La temperatura viene mantenuta intorno ai 37°C per imitare le condizioni fisiologiche.

Varianti di terreno e ottimizzazione

Nel corso degli anni, sono stati sviluppati diversi terreni di coltura basali per soddisfare specifici tipi di cellule:

  • Soluzioni saline bilanciate: Costituiscono la base di formulazioni di terreni più complesse.
  • Iterreni di base, come il Minimum Essential Medium (MEM), sono utilizzati per le colture primarie e le cellule diploidi.
  • Terreni complessi: Come RPMI 1640, sono adatti per una gamma più ampia di cellule di mammifero.
  • Terreni privi di siero: Sono studiati su misura per applicazioni specifiche, riducendo il rischio di contaminazione da componenti di origine animale.

Preparazione dei terreni e controllo di qualità

I terreni di coltura possono essere preparati internamente a partire da ingredienti essenziali o acquistati come soluzioni già pronte. Il controllo di qualità prevede l'assenza di contaminanti e la corretta concentrazione degli ingredienti. La ricostituzione dei terreni in polvere richiede acqua di alta qualità e i terreni preparati devono essere sterilizzati, in genere per filtrazione.

Uso del siero e considerazioni sulla sicurezza

L'uso del siero, in particolare del siero fetale bovino (FBS), è comune grazie al suo ricco contenuto di fattori di crescita. Tuttavia, a causa delle preoccupazioni per malattie come la BSE, vengono seguiti rigorosi protocolli di analisi e di approvvigionamento per garantire la sicurezza.

Linee guida e tendenze normative

Le normative guidano i materiali di origine animale nelle colture, sottolineando l'importanza dell'approvvigionamento e dei test. La tendenza a eliminare tali materiali, ove possibile, si riflette nello sviluppo di alternative di terreni di coltura privi di siero e di animali.

In conclusione, i terreni di coltura cellulare svolgono un ruolo fondamentale nella crescita e nel mantenimento delle cellule in vitro. Ogni componente viene accuratamente selezionato e ottimizzato per imitare l'ambiente in vivo, garantendo alle cellule condizioni di crescita, sopravvivenza e funzionalità.

DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di Sodio piruvato
Il DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) è un terreno di coltura di base altamente versatile e ampiamente utilizzato, progettato per supportare la crescita di una vasta gamma di cellule di mammifero nella ricerca biologica. È un terreno ideale per la coltura di fibroblasti primari, neuroni, cellule gliali, HUVEC, cellule muscolari lisce, nonché linee cellulari popolari come HeLa, 293, Cos-7 e PC-12.
Ciò che distingue il DMEM dagli altri terreni di coltura è la sua composizione unica. Contiene una concentrazione di aminoacidi e vitamine quattro volte superiore a quella del terreno minimo essenziale originale di Eagle. Sviluppato inizialmente con un basso contenuto di glucosio (1 g/L) e piruvato di sodio, il DMEM viene spesso utilizzato con livelli di glucosio più elevati, con o senza piruvato di sodio. In particolare, il DMEM non contiene proteine, lipidi o fattori di crescita, il che rende necessaria un'integrazione. Per ottenere una crescita ottimale, un approccio comune è quello di integrare il DMEM con il 10% di siero bovino fetale (FBS). Inoltre, il DMEM impiega un sistema tampone a base di bicarbonato di sodio, che richiede un ambiente con il 5-10% di CO2 per mantenere un pH fisiologico.
Il Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) è molto apprezzato tra i terreni definiti per la coltura di cellule e tessuti, in quanto soddisfa le esigenze di crescita di vari fenotipi di cellule aderenti. Supera l'originale Eagle's Medium, sviluppato negli anni '50 per la coltivazione di cellule di pollo, grazie alla formulazione supplementare migliorata nota come modifica di Dulbecco. Questa modifica aumenta significativamente il contenuto di alcuni aminoacidi e vitamine fino a quattro volte rispetto al terreno originale.
Nel campo della coltura cellulare, il DMEM svolge un ruolo fondamentale come terreno di crescita per diversi tipi di cellule, tra cui cellule primarie, cellule staminali e cellule trasformate. I ricercatori utilizzano la versione modificata del DMEM anche per un'ampia gamma di applicazioni di ricerca, come la scoperta di farmaci, l'ingegneria dei tessuti e lo studio delle vie di segnalazione cellulare.

Controllo di qualità

Filtrato sterile


Conservazione e durata di conservazione

Conservare a +2°C a +8°C, al riparo dalla luce.
Una volta aperto, conservare a 4°C e utilizzare entro 6-8 settimane.


Condizioni di spedizione

Temperatura ambiente


Manutenzione

Conservare in frigorifero a +2°C a +8°C al buio. Evitare il congelamento e il riscaldamento frequente a +37°C, in quanto riduce la qualità del prodotto.
Non riscaldare il terreno di coltura oltre i 37°C e non utilizzare fonti di calore non controllate come le microonde.
Se si deve utilizzare solo una parte del terreno di coltura, prelevare la quantità necessaria e riscaldarla a temperatura ambiente prima dell'uso.


Composizione



Categoria
Componenti
Concentrazione (mg/L)


Aminoacidi
Glicina
30.00



L-Arginina HCl
84.00



L-cistina 2 HCl
62.57



L-Glutammina
584.00



L-istidina HClH2O
42.00



L-Isoleucina
105.00



L-Leucina
105.00



L-lisina HCl
146.00



L-metionina
30.00



L-fenilalanina
66.00



L-Serina
42.00



L-treonina
95.00



L-triptofano
16.00



L-Tirosina 2 Na 2H2O
103.79



L-Valina
94.00


Vitamine
Cloruro di colina
4.00



D-pantotenato di calcio
4.00



Acido folico
4.00



mio-inositolo
7.20



Nicotinamide
4.00



Piridossale HCl
4.00



Riboflavina
0.40



Tiamina HCl
4.00


Sali inorganici
CaCl2 2H2O
265.00



Fe(NO3)3 9H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Altri componenti
D-Glucosio
4500.00



Sale di sodio di rosso fenolo
15.90



Sodio piruvato
110.00

25,00 €*
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Uno dei terreni di coltura cellulare sintetici più utilizzati è il Minimum Essential Medium Eagle (MEM). Sviluppato da Harry Eagle, questo terreno è stato introdotto per la prima volta nel 1959 e da allora è diventato una scelta popolare per vari tipi di cellule coltivate in monostrato e linee cellulari aderenti.
Cosa contiene l'EMEM?
L'EMEM è una versione modificata del terreno minimo essenziale di Eagle, contenente soluzione salina bilanciata di Earle, aminoacidi non essenziali, L-glutammina, piruvato di sodio e bicarbonato di sodio. È importante notare che questo livello di bicarbonato di sodio è destinato all'uso in presenza di un 5% di CO2 nell'aria. Per mantenerne l'efficacia, si consiglia di conservare il terreno di coltura a una temperatura compresa tra 2°C e 8°C, al buio, quando non viene utilizzato.
A cosa serve l'EMEM?
Il terreno minimo essenziale di Eagle (EMEM) è un terreno di coltura cellulare in grado di mantenere le cellule in coltura tissutale. Il terreno contiene concentrazioni più elevate di aminoacidi, consentendo un'approssimazione più accurata della composizione proteica delle cellule di mammifero in coltura. L'EMEM può essere utilizzato per coltivare varie cellule, tra cui fibroblasti, cellule di cancro al fegato umano (HepG2) e cellule astrocitarie derivate da progenitori cerebrali fetali (PDA). In genere viene utilizzato in presenza di siero fetale bovino (FBS), siero di vitello o di cavallo.
In cosa si differenzia l'EMEM dagli altri terreni di coltura cellulare?
L'EMEM e il Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) presentano alcune somiglianze, ma anche differenze. Entrambi i terreni sono privi di proteine e contengono gli aminoacidi, i sali, il glucosio e le vitamine necessari per fornire energia alle cellule e mantenerle in coltura. Tuttavia, la formulazione del DMEM è modificata per contenere fino a quattro volte più vitamine e aminoacidi e da due a quattro volte più glucosio rispetto all'EMEM. Vale la pena notare che anche l'EMEM è diverso dalla formulazione originale del MEM.


Controllo di qualità

Filtrato sterile


Conservazione e durata di conservazione

Conservare a +2°C a +8°C, al riparo dalla luce.
Una volta aperto, conservare a 4°C e utilizzare entro 6-8 settimane.


Condizioni di spedizione

Temperatura ambiente


Manutenzione

Conservare in frigorifero a +2°C a +8°C al buio. Evitare il congelamento e il riscaldamento frequente a +37°C, in quanto riduce la qualità del prodotto.
Non riscaldare il terreno di coltura oltre i 37°C e non utilizzare fonti di calore non controllate come le microonde.
Se si deve utilizzare solo una parte del terreno di coltura, prelevare la quantità necessaria e riscaldarla a temperatura ambiente prima dell'uso.



Composizione



Categoria
Componenti
Concentrazione (mg/L)


Aminoacidi
L-Arginina HCl
126.00


L-cistina 2 HCl
31.30


L-Glutammina
292.00


L-istidina HClH2O
42.00


L-Isoleucina
52.00


L-Leucina
52.00


L-lisina HCl
72.50


L-metionina
15.00


L-fenilalanina
32.00


L-treonina
48.00


L-triptofano
10.00


L-Tirosina 2 Na 2H2O
51.90


L-Valina
46.00


Vitamine
Cloruro di colina
1.00


Vitamine
Pantotenato di D-Calcio
1.00


Acido folico
1.00


myo-Inositolo
2.00


Nicotinamide
1.00


Piridossale HCl
1.00


Riboflavina
0.10


Tiamina HCl
1.00


Sali inorganici
CaCl2 2H2O
265.00


Sali inorganici
KCl
400.00


MgSO4
97.67


NaCl
6800.00


NaHCO3
2200.00


NaH2PO4
122.00


Altri componenti
D-Glucosio
1000.00


Altri componenti
Sale sodico di rosso fenolo
11.00

25,00 €*
Ham's F12 Medium, w: 1,0 mM di glutammina stabile, w: 1,0 mM di piruvato di sodio, w: 1,176 g/L NaHCO3
L'Ham's F-12 Medium, noto anche come Ham's F-12 Nutrient Mix, è un terreno di coltura basale ampiamente utilizzato, progettato specificamente per la coltura cellulare. È stato ampiamente utilizzato per il piastrellamento senza siero di cellule di ovaio di criceto cinese (CHO), cellule polmonari e cellule L di topo. Inoltre, Ham's F-12 è il terreno di coltura preferito per il test di tossicità clonale (CTA).
Uno dei suoi notevoli vantaggi è la capacità di supportare la crescita cellulare senza la necessità di integrare il siero. Questo elimina le potenziali interferenze causate dai componenti del siero, garantendo risultati sperimentali coerenti e affidabili. Fornendo un ambiente di coltura privo di siero, Ham's F-12 Medium offre ai ricercatori un maggiore controllo sulle loro indagini.
Un'altra caratteristica fondamentale del terreno Ham's F-12 è la sua idoneità alla piastratura di singole cellule. Questo lo rende una scelta eccellente per una varietà di linee cellulari, tra cui cellule CHO, cellule polmonari e cellule L di topo. La composizione nutritiva ottimizzata del terreno facilita l'attacco e la crescita efficiente delle singole cellule, consentendo la creazione di colture cellulari omogenee con una migliore riproducibilità.
Inoltre, il terreno Ham's F-12 è stato riconosciuto come il terreno preferito per il test di tossicità clonale (CTA). Questo test svolge un ruolo fondamentale nella valutazione degli effetti citotossici delle sostanze sulle cellule. Utilizzando Ham's F-12 Medium nel CTA, i ricercatori possono valutare con precisione l'impatto di vari composti o trattamenti su singole cellule, fornendo preziose informazioni sui profili tossicologici.
Controllo di qualità

pH = 7,2 +/
- 0,02 a 20-25°C.
Ogni lotto è stato testato per la sterilità e l'assenza di micoplasmi e batteri.

Manutenzione

Conservare in frigorifero a +2°C a +8°C al buio. Il congelamento e il riscaldamento fino a +37°C riducono la qualità del prodotto.
Non riscaldare il terreno di coltura a più di 37° C e non utilizzare fonti di calore incontrollabili (ad es. apparecchi a microonde).
Se si deve utilizzare solo una parte del terreno di coltura, prelevare questa quantità dal flacone e riscaldarla a temperatura ambiente.
La durata di conservazione di qualsiasi terreno, ad eccezione del terreno di base, è di 8 settimane dalla data di produzione.

Composizione




Componenti
mg/L


Sali inorganici
Cloruro di calcio x 2H2O
44,00



Solfato di rame(II) x 5H2O
0,00



Solfato di ferro (II) x 7H2O
0,83



Cloruro di magnesio x 6H2O
122,00



Cloruro di potassio
223,65



Cloruro di sodio
7599,00



idrogeno fosfato di sodioanidro
142,04



Solfato di zinco x 7H2O
0,86


Altri componenti
D(+)-Glucosio anidro
1801,60



Ipossantina
4,08



Acido linoleico
0,08



Acido DL-α-Lipoico
0,21



Rosso fenolo
1,20



Putrescina x 2HCl
0,16



Sodio piruvato
110,00



Timidina
0,73



NaHCO3
1176,00


Aminoacidi
L-alanina
8,91



L-Arginina x HCl
210,70



L-Asparagina x H2O
15,01



Acido L-aspartico
13,31



L-cisteina x HCl x H2O
35,12



L-alanil-L-glutammina
217,30



Acido L-Glutammico
14,71



Glicina
7,51



L-istidina x HCl x H2O
20,96



L-Isoleucina
3,94



L-leucina
13,12



L-lisina x HCl
36,54



L-metionina
4,48



L-fenilalanina
4,96



L-Prolina
34,53



L-Serina
10,51



L-treonina
11,91



L-triptofano
2,04



L-Tirosina
5,44



L-Valina
11,71


Vitamine
D(+)-Biotina
0,01



D-pantotenato di calcio
0,24



Cloruro di colina
13,96



Acido folico
1,32



mio-inositolo
18,02



Nicotinamide
0,04



Piridossina x HCl
0,06



Riboflavina
0,04



Tiamina x HCl
0,34



Vitamina B12
1,36

25,00 €*
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3
DMEM:Ham's F12 è un terreno di coltura basale ampiamente riconosciuto e utilizzato nella ricerca biologica. Serve come fonte fondamentale di nutrienti per la crescita di varie linee cellulari di mammifero, in particolare se integrato con siero bovino fetale (FBS).

Questa formulazione unica combina il Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) e l'Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) in un preciso rapporto di 1:1. L'aggiunta di L-glutammina ne migliora ulteriormente la composizione.

Il DMEM, derivato dall'Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), offre una maggiore concentrazione di aminoacidi e vitamine rispetto al suo predecessore. Ham's F-12, invece, è basato sul terreno Ham's F-10 e fornisce un insieme complementare di componenti essenziali.

Per favorire una crescita cellulare ottimale, è prassi comune integrare il DMEM:Ham's F12 con FBS a una concentrazione tipica del 5-10%. Questa aggiunta è necessaria in quanto il terreno di coltura manca di ormoni della crescita, lipidi e proteine fondamentali per lo sviluppo cellulare.

Il DMEM:Ham's F12 incorpora un sistema tampone di pH e viene spesso integrato con il rosso fenolo, un indicatore di pH. Le cellule coltivate in DMEM:Ham's F12, o in qualsiasi terreno che utilizzi il sistema tampone del bicarbonato, richiedono un ambiente controllato con CO2 del 5-10% per mantenere livelli di pH appropriati.


Controllo di qualità

Filtrato sterile


Conservazione e durata di conservazione

Conservare a +2°C a +8°C, al riparo dalla luce.
Una volta aperto, conservare a 4°C e utilizzare entro 6-8 settimane.


Condizioni di spedizione

Temperatura ambiente


Manutenzione

Conservare in frigorifero a +2°C a +8°C al buio. Evitare il congelamento e il riscaldamento frequente a +37°C, in quanto riduce la qualità del prodotto.
Non riscaldare il terreno di coltura oltre i 37°C e non utilizzare fonti di calore non controllate come le microonde.
Se si deve utilizzare solo una parte del terreno di coltura, prelevare la quantità necessaria e riscaldarla a temperatura ambiente prima dell'uso.


Composizione



Categoria
Componenti
Concentrazione (mg/L)


Aminoacidi
Glicina
18.75


L-alanina
4.45


L-Arginina HCl
147.50


L-Asparagina H₂O
7.50


Acido L-Aspartico
6.65


L-Cisteina HCl H₂O
17.56


L-cistina 2 HCl
31.29


Acido L-Glutammico
7.35


L-Glutammina
365.00


L-istidina HCl H₂O
31.48


L-Isoleucina
54.47


L-Leucina
59.05


L-lisina HCl
91.25


L-metionina
17.24


L-fenilalanina
35.48


L-Prolina
17.25


L-Serina
26.25


L-treonina
53.45


L-triptofano
9.02


L-tirosina sale disodico
48.10


L-Valina
52.85


Vitamine
D-Biotina
0.0035


Cloruro di colina
8.98


D-pantotenato di calcio
2.24


Acido folico
2.66


mio-inositolo
12.60


Nicotinamide
2.02


Piridossina HCl
0.031


Piridossale HCl
2.00


Riboflavina
0.219


Tiamina HCl
2.17


Vitamina B12
0.68


Sali inorganici
CaCl₂ 2 H₂O
154.50



CuSO₄ 5 H₂O
0.0013



Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05



FeSO₄ 7 H₂O
0.417



KCl
311.80



MgCl₂ 6 H₂O
61.20



MgSO₄
48.84



NaCl
6996.00



NaHCO₃
1200.00



Na₂HPO₄
71.02



NaH₂PO₄
54.30



ZnSO₄ 7 H₂O
0.432


Altri componenti
D-Glucosio
3151.00


Ipossantina
2.40


HEPES
3574.50


Acido linoleico
0.042


Acido lipoico
0.105


Sale sodico di rosso fenolo
8.63


Putrescina 2 HCl
0.081


Sodio piruvato
55.00


Timidina
0.365

25,00 €*
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutammina, w: 2,0 mM Sodio piruvato, w: 2,5 g/L NaHCO3
Vi presentiamo il terreno Ham's F-12K (Kaighn's), una modifica specializzata del terreno Ham's F-12 progettata per soddisfare i requisiti unici della ricerca biologica. Questo terreno avanzato offre vantaggi distinti, migliorando la coltivazione di epatociti umani primari, nonché di cellule epatiche di ratto e di pollo, in particolare in condizioni di siero ridotto.

Il terreno Ham's F-12K (Kaighn's) è stato accuratamente formulato per ottimizzare le condizioni di coltura cellulare. Presenta una composizione arricchita, che fornisce livelli elevati di componenti essenziali come aminoacidi e piruvato di sodio, oltre a elementi aggiuntivi come putrescina, timidina, ipoxantina e zinco. Queste aggiunte consentono ai ricercatori di integrare il terreno di coltura con una quantità minima di siero o di componenti definiti per specifici tipi di cellule, facilitando condizioni sperimentali precise.

In particolare, il terreno Ham's F-12K (Kaighn's) non contiene proteine o fattori di crescita. Di conseguenza, spesso è necessaria un'integrazione con fattori di crescita e siero bovino fetale (FBS), consentendo ai ricercatori di adattare il terreno di coltura ai requisiti delle loro specifiche linee cellulari. Per ottenere prestazioni ottimali, la concentrazione di FBS deve essere accuratamente ottimizzata per ogni linea cellulare, garantendo una crescita e una funzionalità ottimali.

Per mantenere il pH fisiologico, il terreno Ham's F-12K (Kaighn's) impiega un sistema tampone di bicarbonato di sodio (2,5 g/L), che richiede un ambiente controllato al 5-10% di CO2 durante la coltivazione. Ciò garantisce che il pH del terreno rimanga nell'intervallo ideale per la crescita e la vitalità delle cellule
Controllo di qualità

pH = 7,2 +/
- 0,02 a 20-25°C.
Ogni lotto è stato testato per verificare la sterilità e l'assenza di micoplasmi e batteri.

Manutenzione

Conservare in frigorifero a +2°C a +8°C al buio. Il congelamento e il riscaldamento fino a +37°C riducono la qualità del prodotto.
Non riscaldare il terreno di coltura a più di 37°C e non utilizzare fonti di calore incontrollabili (ad esempio, apparecchi a microonde).
Se si deve utilizzare solo una parte del terreno di coltura, prelevare questa quantità dal flacone e riscaldarla a temperatura ambiente.
La durata di conservazione di qualsiasi terreno di coltura, tranne quello di base, è di 8 settimane dalla data di produzione.

Composizione




Componenti
mg/L


Sali inorganici
Cloruro di calcio x 2H2O
135,24



Solfato di rame(II) x 5H2O
0,00



Solfato di ferro (II) x 7H2O
0,83



Cloruro di magnesio x 6H2O
105,72



Solfato di magnesio x 7H2O
394,49



Cloruro di potassio
283,29



Potassio diidrogeno fosfato
58,52



Cloruro di sodio
7597,20



idrogeno fosfato di sodioanidro
115,02



Solfato di zinco x 7H2O
0,14


Altri componenti
D(+)-Glucosio anidro
1260,00



Ipossantina
4,08



Acido DL-α-Lipoico
0,21



Rosso fenolo
3,00



Putrescina x 2HCl
0,32



Sodio piruvato
220,00



NaHCO3
2500,00



Timidina
0,73


Aminoacidi
L-alanina
17,82



L-Arginina x HCl
421,40



L-Asparagina x H2O
30,02



Acido L-aspartico
26,62



L-cisteina x HCl x H2O
70,24



L-Glutammina
292,20



Acido L-Glutammico
29,42



Glicina
15,01



L-istidina x HCl x H2O
41,92



L-Isoleucina
7,87



L-leucina
26,24



L-lisina x HCl
73,04



L-metionina
8,95



L-fenilalanina
9,91



L-Prolina
69,06



L-Serina
21,02



L-treonina
23,82



L-triptofano
4,08



L-tirosina
10,87



L-Valina
23,42


Vitamine
D(+)-Biotina
0,07



D-pantotenato di calcio
0,48



Cloruro di colina
13,96



Acido folico
1,32



mio-inositolo
18,02



Nicotinamide
0,04



Piridossina x HCl
0,06



Riboflavina
0,04



Tiamina x HCl
0,34



Vitamina B12
1,36

108,00 €*
Terreno McCoys 5A (modificato), w: 3,0 g/L Glucosio, w: Glutammina stabile, w: 2,0 mM Sodio piruvato, w: 2,2 g/L NaHCO3
Il McCoy's 5A Medium è un terreno di coltura altamente raccomandato e specializzato, progettato per facilitare la crescita e la replicazione dei virus nelle colture cellulari primarie. Ha ottenuto un riconoscimento significativo per le sue eccezionali prestazioni in varie applicazioni di ricerca biologica. Un'applicazione di rilievo del McCoy's 5A Medium è il suo utilizzo nella coltura di linee cellulari di carcinoma del colon umano. Nello specifico, è stato impiegato nello studio del recettore accoppiato alla proteina G contenente ripetizioni ricche di leucina (LGR5) e del suo ruolo nella metastasi del cancro al colon. Questo terreno è stato efficacemente impiegato nella coltivazione di diverse linee cellulari di carcinoma del colon, tra cui HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b e TENN, consentendo ai ricercatori di approfondire i meccanismi alla base delle metastasi del cancro del colon. Oltre alla sua applicazione nella ricerca sul cancro, il McCoy's 5A Medium si è dimostrato indispensabile nello studio degli osteoblasti. I ricercatori che studiano la reattività ionica dell'idrossiapatite carente di calcio nei terreni di coltura cellulare standard hanno utilizzato questo terreno per coltivare gli osteoblasti. Questa applicazione ha facilitato una migliore comprensione delle interazioni tra gli osteoblasti e l'idrossiapatite carente di calcio, contribuendo ai progressi nel campo della ricerca sulle ossa. Il McCoy's 5A Medium è stato meticolosamente formulato modificando gli aminoacidi presenti nel Basal Medium Eagle per fornire un supporto ottimale alle cellule tumorali del fegato. Questa formulazione arricchita lo rende adatto a una vasta gamma di linee cellulari consolidate, nonché alle cellule primarie, migliorandone ulteriormente la versatilità e l'applicabilità in vari contesti di ricerca. Il McCoy's 5A Medium estende i suoi effetti biochimici e fisiologici oltre le cellule tumorali del fegato. È stato impiegato con successo per sostenere la crescita in colture primarie di midollo osseo, pelle, gengiva, rene, omento, surrene, polmone, milza, embrione di ratto e altri tipi di cellule. Questa ampia gamma di applicazioni attesta la grande utilità del McCoy's 5A Medium nel sostenere la crescita e il mantenimento di vari tipi di cellule per una ricerca biologica completa. Formulazione Questo McCoy's 5A medium (modificato) contiene 3,0 g/L di glucosio, glutammina stabile, 2,0 mM di piruvato di sodio e 2,2 g/L di NaHCO3. Controllo qualità pH = 7,2 +/
- 0,02 a 20-25 °C.  Ogni lotto è stato testato per verificarne la sterilità e l'assenza di micoplasmi e batteri. Conservazione Conservare in frigorifero a una temperatura compresa tra +2 °C e +8 °C al riparo dalla luce. Il congelamento e il riscaldamento fino a +37 °C compromettono la qualità del prodotto.  Non riscaldare il terreno a temperature superiori a 37 °C né utilizzare fonti di calore incontrollabili (ad es. forni a microonde).  Se si intende utilizzare solo una parte del terreno, prelevare la quantità necessaria dalla bottiglia e riscaldarla a temperatura ambiente. La durata di conservazione di qualsiasi terreno, ad eccezione del terreno di base, è di 6-8 settimane dalla data di apertura. Composizione Componenti mg/L Sali inorganiciCloruro di calcio x 2H2O132,00 Solfato di magnesio97,67 Cloruro di potassio400,00 Cloruro di sodio6.460,00 Idrogeno fosfato disodico (anidro)504,00 Altri componentiD(+)-Glucosio (anidro)3.000,00 Glutatione (ridotto)0,50 Peptone di carne600,00 Sale sodico del rosso fenolo11 AminoacidiL-alanina13,36 L-arginina x HCl42,14 L-asparagina x H2O45,03 Acido L-aspartico19,97 L-Cisteina x HCl x H2O31,75 L-glutammina (stabile)219,15 Acido L-glutammico22,07 Glicina7,51 L-istidina x HCl x H2O20,96 L-idrossiprolina19,67 L-isoleucina39,36 L-leucina39,36 L-lisina x HCl36,54 L-metionina14,92 L-fenilalanina16,52 L-Prolina17,27 L-Serina26,28 L-treonina17,87 L-triptofano3,06 Sale disodico della L-tirosina26,10 L-Valina17,57 VitamineAcido p-amminobenzoico1,00 Acido ascorbico0,56 D(+)-biotina0,20 D-calcio pantotenato0,20 Cloruro di colina5,00 Acido folico10,0 Mio-inositolo36,00 Nicotinamide0,50 Acido nicotinico0,5 Piridossal HCl0,50 Piridossina HCl0,50 Riboflavina0,20 Cloridrato di tiamina0,20 Vitamina B122,00

30,00 €*
IMDM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 25 mM di HEPES, w: 1,0 mM di piruvato di sodio, w: 3,024 g/L di NaHCO3
L'Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) è un terreno di crescita complesso e arricchito per la coltura cellulare. L'IMDM è una modifica del DMEM contenente selenio e presenta aminoacidi, vitamine e sali inorganici aggiuntivi rispetto al DMEM. Manca di ferro e richiede un'integrazione con siero bovino fetale (FBS). L'IMDM utilizza un sistema tampone di bicarbonato di sodio e richiede un ambiente con il 5-10% di CO2 per mantenere il pH fisiologico.
L'IMDM è adatto per colture cellulari ad alta densità e a rapida proliferazione, tra cui cellule Jurkat, COS-7 e macrofagi. Le varie modifiche di IMDM disponibili per una serie di applicazioni di coltura cellulare possono essere trovate utilizzando lo strumento di selezione dei terreni. I terreni liquidi forniscono nutrienti essenziali per tutte le applicazioni di coltura cellulare. Tutti i nostri terreni di coltura cellulare di alta qualità sono prodotti in base alla formula inizialmente pubblicata o alle modifiche necessarie per garantire prestazioni e stabilità costanti del terreno di coltura.
IMDM vs. DMEM
L'IMDM contiene nitrato di potassio anziché nitrato ferrico, HEPES e piruvato di sodio. I componenti aggiuntivi dell'IMDM lo rendono più adatto a tipi di cellule specializzate e ad applicazioni specifiche rispetto al DMEM.
IMDM vs. RPMI
IMDM e RPMI hanno formulazioni diverse che possono essere rilevanti per la stimolazione con PMA/ionomicina. Una differenza significativa è la concentrazione di Ca2+. Mentre RPMI contiene 0,42 mM di Ca2+, IMDM ne contiene 1,49 mM.
Controllo di qualità

pH = 7,2 +/
- 0,02 a 20-25°C.
Ogni lotto è stato testato per la sterilità e l'assenza di micoplasmi e batteri.

Manutenzione

Conservare in frigorifero a +2°C a +8°C al buio. Il congelamento e il riscaldamento fino a +37°C riducono la qualità del prodotto.
Non riscaldare il terreno di coltura a più di 37° C e non utilizzare fonti di calore incontrollabili (ad es. apparecchi a microonde).
Se si deve utilizzare solo una parte del terreno di coltura, prelevare questa quantità dal flacone e riscaldarla a temperatura ambiente.
La durata di conservazione di qualsiasi terreno, ad eccezione del terreno di base, è di 8 settimane dalla data di produzione.
Composizione




Componenti
mg/L


Sali inorganici
Cloruro di calcio x 2 H2O
219,00



Cloruro di potassio
330,00



Nitrato di potassio
0.076



Solfato di magnesio anidro
97,73



Cloruro di sodio
4,505.00



Sodio diidrogeno fosfato anidro
109,00



Selenito di sodio
0,02


Altri componenti
D(+)-Glucosio anidro
4,500.00



HEPES
5,958.00



Sodio piruvato
110,00



Rosso fenolo
15,00


Aminoacidi
L-alanina
25,00



L-Arginina x HCl
84,00



L-Asparagina x H2O
25,00



Acido L-Aspartico
30,00



L-cistina x 2HCl
91,24



L-Glutammina
584,00



Acido L-Glutammico
75,00



Glicina
30,00



L-istidina x HCl x H2O
42,00



L-Isoleucina
104,80



L-leucina
104,80



L-lisina x HCl
146,20



L-metionina
30,00



L-fenilalanina
66,00



L-Prolina
40,00



L-Serina
42,00



L-treonina
95,20



L-triptofano
16,00



L-Tirosina x 2Na
104,20



L-Valina
93,60


Vitamine
D(+)-Biotina
0.013



D-pantotenato di calcio
4,00



Cloruro di colina
4,00



Acido folico
4,00



mio-inositolo
7,20

25,00 €*
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L NaHCO3
Il terreno RPMI 1640, noto anche come terreno RPMI, è un terreno di coltura cellulare altamente versatile, ampiamente utilizzato nella ricerca biologica per coltivare varie cellule di mammifero. Sviluppato da George E. Moore, Robert E. Gerner e H. Addison Franklin nel 1966 presso il rinomato Roswell Park Comprehensive Cancer Center, questo terreno di coltura deriva il suo nome dalla sua origine presso il Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Inizialmente progettato per supportare la crescita di cellule leucemiche umane in colture in sospensione e monostrato, il terreno RPMI 1640 si è evoluto attraverso le modifiche apportate dai ricercatori e dai fornitori commerciali per diventare adatto a una vasta gamma di cellule di mammifero. È eccezionalmente compatibile con linee cellulari come HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrociti e carcinomi.
Il terreno RPMI 1640 si distingue dagli altri terreni di coltura cellulare per la sua composizione unica. Contiene una quantità sostanziale di fosfati, aminoacidi e vitamine. In particolare, contiene biotina, vitamina B12 e PABA, assenti in Eagle's Minimal Essential Medium o Dulbecco's Modified Eagle Medium. Inoltre, RPMI 1640 Medium presenta concentrazioni significativamente elevate di vitamine inositolo e colina. Tuttavia, non contiene proteine, lipidi o fattori di crescita. Di conseguenza, per garantire le condizioni ottimali per la crescita cellulare, è comunemente necessaria un'integrazione con il 10% di siero fetale bovino (FBS).
Il sistema tampone del terreno RPMI 1640 si basa sul bicarbonato di sodio e richiede un ambiente al 5-10% di CO2 per mantenere un pH fisiologicamente appropriato. L'inclusione dell'agente riducente glutatione distingue ulteriormente questo terreno da altri.
Controllo di qualità

Filtrato sterile


Conservazione e durata di conservazione

Conservare a +2°C a +8°C, al riparo dalla luce.
Una volta aperto, conservare a 4°C e utilizzare entro 6-8 settimane.


Condizioni di spedizione

Temperatura ambiente


Manutenzione

Conservare in frigorifero a +2°C a +8°C al buio. Evitare il congelamento e il riscaldamento frequente a +37°C, in quanto riduce la qualità del prodotto.
Non riscaldare il terreno di coltura oltre i 37°C e non utilizzare fonti di calore non controllate come le microonde.
Se si deve utilizzare solo una parte del terreno di coltura, prelevare la quantità necessaria e riscaldarla a temperatura ambiente prima dell'uso.



Composizione




Categoria
Componenti
Concentrazione (mg/L)


Aminoacidi
Glicina
10.00



L-alanil-L-glutammina
434.40



L-Arginina
200.00



L-AsparaginaH2O
56.82



Acido L-Aspartico
20.00



L-cistina 2HCl
65.20



Acido L-Glutammico
20.00



L-istidina HClH2O
20.27



L-idrossi-L-prolina
20.00



L-Isoleucina
50.00



L-Leucina
50.00



L-lisina HCl
40.00



L-metionina
15.00



L-fenilalanina
15.00



L-Prolina
20.00



L-Serina
30.00



L-treonina
20.00



L-triptofano
5.00



L-Tirosina 2Na 2H2O
28.83



L-Valina
20.00


Vitamine
acido p-amino-benzoico
1.00



D-Biotina
0.20



Cloruro di colina
3.00



D-pantotenato di calcio
0.25



Acido folico
1.00



myo-Inositolo
35.00



Nicotinamide
1.00



Piridossina HCl
1.00



Riboflavina
0.20



Tiamina HCl
1.00



Vitamina B12
0.005


Sali inorganici
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Altri componenti
D-Glucosio
2000.00



L-Glutatione ridotto
1.00



Sale sodico di rosso fenolo
5.30

25,00 €*

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