DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3
Il DMEM:Ham's F12 è un terreno di base ampiamente riconosciuto e ampiamente utilizzato nella coltura cellulare per la ricerca biologica. Funge da fonte fondamentale di nutrienti per la crescita di varie linee cellulari di mammiferi, in particolare se integrato con siero fetale bovino (FBS).
Questa formulazione unica combina il Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) e l'Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) in un rapporto preciso di 1:1. L'aggiunta di L-glutammina ne migliora ulteriormente la composizione.
Il DMEM, derivato dall'Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), offre una maggiore concentrazione di aminoacidi e vitamine rispetto al suo predecessore. Al contrario, l'Ham's F-12 si basa sul terreno Ham's F-10, fornendo una serie complementare di componenti essenziali.
Per favorire una crescita cellulare ottimale, è prassi comune integrare il DMEM:Ham's F12 con FBS a una concentrazione tipica del 5-10%. Questa aggiunta è necessaria poiché il terreno è privo di ormoni della crescita, lipidi e proteine fondamentali per lo sviluppo cellulare.
Il DMEM:Ham's F12 incorpora un sistema tampone del pH ed è spesso integrato con fenolo rosso, un indicatore di pH. Le cellule coltivate in DMEM:Ham's F12, o in qualsiasi altro terreno che utilizzi il sistema tampone al bicarbonato, richiedono un ambiente con CO2 controllata al 5-10% per mantenere livelli di pH adeguati.
Controllo di qualità
- Filtrato sterile
Conservazione e durata di conservazione
- Conservare a una temperatura compresa tra +2 °C e +8 °C, al riparo dalla luce.
- Una volta aperto, conservare a 4 °C e utilizzare entro 6-8 settimane.
Condizioni di spedizione
- Temperatura ambiente
Conservazione
- Conservare in frigorifero a una temperatura compresa tra +2 °C e +8 °C al buio. Evitare il congelamento e il riscaldamento frequente a +37 °C, poiché ciò riduce la qualità del prodotto.
- Non riscaldare il terreno oltre i 37 °C né utilizzare fonti di calore non controllate, come gli apparecchi a microonde.
- Se si intende utilizzare solo una parte del terreno, prelevare la quantità necessaria e portarla a temperatura ambiente prima dell'uso.
Composizione
| Categoria | Componenti | Concentrazione (mg/L) |
| Acidi amminici | Glicina | 18,75 |
| L-alanina | 4,45 | |
| L-Arginina HCl | 147,50 | |
| L-asparagina H₂O | 7,50 | |
| Acido L-aspartico | 6,65 | |
| L-cisteina HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cistina 2 HCl | 31,29 | |
| Acido L-glutammico | 7,35 | |
| L-glutammina | 365,00 | |
| L-istidina HCl H₂O | 31,48 | |
| L-isoleucina | 54,47 | |
| L-Leucina | 59,05 | |
| L-lisina HCl | 91,25 | |
| L-metionina | 17,24 | |
| L-fenilalanina | 35,48 | |
| L-prolina | 17,25 | |
| L-serina | 26,25 | |
| L-treonina | 53,45 | |
| L-triptofano | 9,02 | |
| L-tirosina 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-valina | 52,85 | |
| Vitamine | D-biotina | 0,0035 |
| Cloruro di colina | 8,98 | |
| D-pantotenato di calcio | 2,24 | |
| Acido folico | 2,66 | |
| mio-inositolo | 12,60 | |
| Nicotinamide | 2,02 | |
| Piridossina HCl | 0,031 | |
| Piridossal HCl | 2,00 | |
| Riboflavina | 0,219 | |
| Tiamina HCl | 2,17 | |
| Vitamina B12 | 0,68 | |
| Sali inorganici | CaCl₂ 2 H₂O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO3)3 9 H2O | 0,05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄·2H₂O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Altri componenti | D-glucosio | 3151,00 |
| Ipoxantina | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Acido linoleico | 0,042 | |
| Acido lipoico | 0,105 | |
| Sale sodico del rosso fenolo | 8,63 | |
| Putrescina 2 HCl | 0,081 | |
| Piruvato di sodio | 55,00 | |
| Timidina | 0,365 |