EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Il Medium Minimo Essenziale di Eagle (EMEM) è uno dei terreni di base più utilizzati per la coltura di un'ampia gamma di cellule di mammiferi, in particolare delle linee cellulari aderenti. Sviluppata originariamente da Harry Eagle, questa formulazione classica contiene gli aminoacidi essenziali, le vitamine e i sali inorganici necessari per sostenere la crescita sia delle cellule primarie che delle linee cellulari stabilizzate in condizioni di coltura standard.
Questa formulazione liquida pronta all'uso e filtrata sterilmente è integrata con la soluzione salina bilanciata di Earle (EBSS), 2 mM di L-glutammina, D-glucosio (1,0 g/L) e 2,2 g/L di bicarbonato di sodio (NaHCO3), rendendola adatta all'uso in un'atmosfera di incubatore a CO2 controllata (tipicamente 5 % di CO2). Il fenolo rosso incluso funge da indicatore di pH, consentendo un comodo monitoraggio visivo delle condizioni del terreno durante la coltura cellulare.
Caratteristiche principali
- Formulazione MEM di Eagle classica con soluzione salina bilanciata di Earle (EBSS)
- 2 mM di L-glutammina inclusa – pronto per l’uso immediato
- 2,2 g/L di bicarbonato di sodio – tamponato per l’incubazione al 5% di CO2
- Con D-glucosio (1,0 g/L) come fonte primaria di carbonio
- Con fenolo rosso come indicatore di pH
- Senza HEPES e senza piruvato di sodio
- Terreno liquido filtrato sterile, pronto all'uso
- pH 7,0 – 7,6
Applicazioni tipiche
L'EMEM supporta la coltura di un'ampia varietà di linee cellulari di mammiferi, tra cui HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 e molte cellule primarie. Le applicazioni comuni includono:
- Manutenzione di routine ed espansione di linee cellulari aderenti
- Flussi di lavoro per la propagazione di virus e la produzione di vaccini
- Applicazioni di citotossicità e bioanalisi
- Studi di trasfezione ed espressione proteica
- Ricerca di base in biologia cellulare e biologia molecolare
Per una crescita cellulare ottimale, l’EMEM viene tipicamente integrato con il 5–10 % di siero fetale bovino (FBS) e, a seconda della linea cellulare, con aminoacidi non essenziali (NEAA) e antibiotici quali penicillina/streptomicina.
Manipolazione e conservazione
Conservare il flacone chiuso a una temperatura compresa tra +2 °C e +8 °C, al riparo dalla luce. Dopo l'apertura, utilizzare in condizioni asettiche. L'L-glutammina in soluzione è soggetta a graduale degradazione: per ottenere prestazioni ottimali, si consiglia di utilizzare il terreno entro 4 settimane dall'apertura o, in caso di conservazione per periodi più lunghi, di integrare con L-glutammina fresca prima dell'uso. Lasciare che il terreno si riscaldi a 37 °C prima di aggiungerlo alle cellule.
Qualità
Prodotto secondo rigorosi standard di qualità. Ogni lotto viene testato per verificare sterilità, pH, osmolalità e livelli di endotossine, al fine di garantire prestazioni costanti nelle applicazioni di coltura cellulare.
Specifiche del prodotto
| Specifiche | Dettagli |
|---|---|
| Tipo di prodotto | MEM |
| Categoria del prodotto | Terreni di coltura cellulare |
| Formato | Liquido |
| Sterile | Sì |
| Dimensioni | 500 ml |
| L-glutammina | Con L-glutammina (2 mM) |
| Glucosio | Con glucosio (1,0 g/L) |
| Bicarbonato di sodio | Con NaHCO3 (2,2 g/L) |
| HEPES | Senza HEPES |
| Piruvato di sodio | Senza piruvato di sodio |
| Rosso fenolo | Con rosso fenolo |
| Soluzione salina | Soluzione salina bilanciata di Earle (EBSS) |
| pH | 7,0 – 7,6 |
| Contenuto di endotossine | Non specificato |
| Conservazione | Da +2 °C a +8 °C |
Formulazione (Composizione per litro)
| Componente | Concentrazione (mg/L) |
|---|---|
| Sali inorganici | |
| Cloruro di calcio · 2H2O | 265,00 |
| Solfato di magnesio | 97,72 |
| Cloruro di potassio | 400,00 |
| Cloruro di sodio | 6.800,00 |
| Dihidrogenofosfato di sodio, anidro | 122,00 |
| Bicarbonato di sodio (NaHCO3) | 2.200,00 |
| Aminoacidi | |
| L-Arginina · HCl | 126,00 |
| L-Cistina · 2HCl | 31,30 |
| L-Glutammina | 292,00 |
| L-Istidina · HCl · H2O | 42,00 |
| L-isoleucina | 52,00 |
| L-Leucina | 52,00 |
| L-lisina · HCl | 72,50 |
| L-metionina | 15,00 |
| L-fenilalanina | 32,00 |
| L-treonina | 48,00 |
| L-triptofano | 10,00 |
| L-tirosina · 2Na · 2H2O | 51,90 |
| L-valina | 46,00 |
| Vitamine | |
| D-pantotenato di calcio | 1,00 |
| Cloruro di colina | 1,00 |
| Acido folico | 1,00 |
| mio-inositolo | 2,00 |
| Nicotinamide | 1,00 |
| Piridossale · HCl | 1,00 |
| Riboflavina | 0,10 |
| Tiamina · HCl | 1,00 |
| Altri componenti | |
| D(+)-Glucosio | 1.000,00 |
| Rosso fenolo | 10,00 |