Diterbitkan: 2023 | Terakhir ditinjau: Mei 2026

Memahami "Nomor Passage"

Konsep "nomor passage" sangat penting dalam kultur sel dan mengacu pada berapa kali suatu lini sel telah disubkultur atau dipindahkan ke media pertumbuhan baru setelah dihidupkan kembali dari kriopreservasi atau diterima dari bank sel referensi. Metrik ini sangat penting dalam melacak silsilah dan riwayat kultur sel.

Gambaran Umum Proses

Dalam praktik kultur sel rutin, ketika sel mencapai kepadatan tertentu, sel tersebut dipindahkan ke media baru untuk mempertahankan pertumbuhan dan mencegah kepadatan berlebih. Setiap pemindahan tersebut dicatat sebagai satu kali pemindahan.
Secara tradisional, ketika kami menerima suatu garis sel, misalnya pada passage ke-60 dari penyimpan, kami akan melanjutkan dari nomor passage tersebut, dengan menambah angka pada setiap subkultur. Praktik ini, meskipun mempertahankan jejak historis, seringkali mengakibatkan jumlah passage yang tinggi sejak awal. Mengingat penggunaan yang luas dan seringkali bertahun-tahun dari garis sel tertentu, seperti garis sel HeLa yang didirikan pada tahun 1951, tidak mungkin menentukan jumlah total passage sejak garis sel tersebut pertama kali dibuat.
Untuk meningkatkan kejelasan dan kualitas dalam proses kultur sel kami, kami merevisi pendekatan ini pada awal tahun 2023. Sekarang, ketika kami memulai kultur dari botol baru, terlepas dari jumlah passage dari penyimpan, kami mengatur ulang dan mulai menghitung kembali dari passage satu untuk setiap batch yang diproduksi.

Alasan

Passaging adalah prosedur penting untuk memastikan kesehatan dan kegunaan kultur sel untuk penelitian. Ketika sel tumbuh berlebihan, mereka mengalami penghambatan kontak, yang mengurangi laju proliferasi mereka, yang dapat berdampak buruk pada hasil eksperimen. Untuk memitigasi masalah ini, Cytion menerapkan kontrol ketat terhadap kepadatan sel saat subkultur dilakukan, sehingga mempertahankan jumlah passase yang rendah selama produksi garis sel mereka. Tindakan pencegahan ini membantu mencegah efek merugikan dari passaging yang berlebihan, seperti anomali morfologis, perubahan laju pertumbuhan, dan penyimpangan genetik, yang dapat menyebabkan sel-sel tersebut berbeda secara signifikan dari keadaan aslinya. Subkultur dalam jangka waktu yang lama juga dapat meningkatkan risiko kontaminasi mikroba.

Janji Kami

Kami memastikan bahwa sel yang disediakan kepada peneliti sedekat mungkin dengan komposisi genetik dan karakteristik fenotipik aslinya, sehingga meningkatkan keandalan data eksperimental. Selain itu, dengan mendokumentasikan setiap kali pemindahan secara teliti, Cytion berkontribusi pada keterlacakan dan reproduktibilitas penelitian, sebuah komitmen yang mencerminkan standar praktik tinggi dalam kultur sel. Para peneliti didorong untuk menyimpan catatan yang akurat mengenai nomor pemindahan, baik pada wadah kultur maupun dalam buku catatan laboratorium mereka, sebagai referensi untuk kesehatan dan riwayat kultur sel mereka.

Tips dan Kesalahan Umum

Mematuhi protokol yang benar memang penting, tetapi memahami kesalahan umum yang sering terjadi juga sama pentingnya. Prosedur kultur sel sangat sensitif terhadap sedikit saja penyimpangan dalam teknik, waktu, dan kualitas reagen. Kiat-kiat berikut ini mencerminkan praktik terbaik yang direkomendasikan oleh tim ilmiah Cytion berdasarkan pengalaman kultur sel yang luas.

Selalu panaskan reagen hingga 37°C sebelum digunakan untuk meminimalkan guncangan termal pada sel.
Bekerja dengan cepat namun hati-hati — minimalkan waktu sel berada di luar inkubator.
Gunakan reagen bersertifikat yang telah diuji mycoplasma untuk menghindari kontaminasi yang dapat merusak hasil eksperimen.
Dokumentasikan setiap langkah termasuk nomor passage, tanggal, dan pengamatan morfologi sel.
Validasi protokol Anda dengan eksperimen uji coba skala kecil sebelum memperluas skala untuk menghindari pemborosan reagen yang mahal.

Reagen Cytion yang Direkomendasikan

Cytion menawarkan berbagai reagen kultur sel yang telah divalidasi dan dirancang khusus untuk mendukung protokol ini. Semua reagen telah diuji kinerjanya dengan garis sel yang umum digunakan dan tersedia dengan dokumentasi lengkap. Kunjungi cytion.com/Media-Reagents untuk melihat portofolio lengkapnya.