Vero Cells: Jalur Perintis dalam Studi Virus dan Inovasi Vaksin

Garis sel Vero, model sel mamalia yang diawetkan yang berasal dari sel epitel ginjal monyet hijau Afrika, berada di garis depan penelitian dalam virologi, mikrobiologi, dan biologi seluler dan molekuler. Aplikasi luasnya mencakup pengembangan vaksin, skrining farmasi, dan eksplorasi biologi virus dan parasit, imunologi tumor, dan strategi imunoterapi.

Asal dan Fitur Utama Sel Vero

Mempelajari garis sel seperti Vero mendorong beberapa pertanyaan: Apa sebenarnya sel Vero itu? Bagaimana lini sel Vero dibuat? Apa kisah di balik nama "Vero"? Segmen ini bertujuan untuk menjelaskan asal-usul dan atribut utama sel Vero.

Awal mula garis sel Vero dimulai pada tahun 1962, yang berasal dari sel epitel ginjal monyet hijau Afrika. Lini ini dibudidayakan oleh Y. Kawakita dan Yasumura di Universitas Chiba, Jepang. Istilah "Vero" berasal dari "Verda reno" dalam bahasa Esperanto, yang diterjemahkan menjadi "ginjal hijau", meskipun "Vero" juga beresonansi dengan gagasan "kebenaran"

Sel-sel Vero biasanya membentuk lapisan tunggal tetapi dapat beradaptasi dengan kultur suspensi, menampilkan struktur seperti epitel. Sel-sel ini dicirikan oleh bentuknya yang bulat hingga memanjang dan diameter rata-rata sekitar 17 µm. Khususnya, sel Vero menunjukkan jumlah kromosom hipodiploid, dengan jumlah kromosom modal adalah 58 pada sekitar 66% populasi sel, meskipun variasi dengan ploidi yang lebih tinggi ada di sebagian kecil (1,7%) sel.

Klon Sel Vero dan Sifat Uniknya

Klon-klon berbeda yang berasal dari garis keturunan sel Vero menunjukkan fitur-fitur unik yang membedakannya dari garis keturunan aslinya. Di antaranya, dua klon sel Vero yang terkenal adalah:

• Garis Sel Vero E6: Juga dikenal sebagai Vero C1008, klon ini berasal dari sel Vero 76 dan diisolasi pada tahun 1979 oleh P.J. Price dengan menggunakan teknik pengenceran pada pelat mikrotiter. Sel Vero E6 sangat cocok untuk membudidayakan virus yang bereplikasi dengan lambat.

• Sel Vero 76: Berasal dari ginjal monyet hijau Afrika pada tahun 1968, sel-sel ini mempertahankan karakteristik morfologi epitel sel Vero.

Varian sel Vero ini, bersama dengan garis induknya, terus berperan penting dalam kemajuan penelitian virologi dan pengembangan intervensi medis, yang menandai signifikansi mereka dalam komunitas ilmiah.

Informasi kultur

Membudidayakan sel Vero, garis sel monyet, membutuhkan pengetahuan tentang parameter spesifik seperti waktu penggandaan, kepadatan pembenihan, dan media pertumbuhan yang sesuai.

• Waktu Penggandaan Populasi: Waktu penggandaan untuk sel Vero adalah sekitar 24 jam.

• Kepatuhan: Sel-sel Vero melekat pada permukaan dan biasanya membentuk lapisan tunggal ketika dikultur.

• Kepadatan Penyemaian: Dianjurkan untuk memulai dengan kepadatan pembibitan 1 x 10^4 sel/cm^2. Untuk membudidayakan sel Vero yang melekat, cuci dengan PBS dan perlakukan dengan Accutase untuk melepaskannya. Setelah terlepas, sentrifugasi sel, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke labu kultur yang baru.

• Media Pertumbuhan: Baik Ham's F12 dan DMEM adalah media yang cocok untuk menumbuhkan sel Vero. Media ini harus dilengkapi dengan 2,5 mM L-glutamin dan 5% fetal bovine serum (FBS) untuk mendukung pertumbuhan yang optimal. Media harus disegarkan dua hingga tiga kali per minggu.

• Kondisi Pertumbuhan: Sel-sel Vero tumbuh subur pada suhu 37°C dalam atmosfer yang dilembabkan dengan 5% CO2.

• Penyimpanan: Untuk penyimpanan jangka panjang, sel Vero harus disimpan pada suhu di bawah -150 ° C, baik dalam freezer suhu sangat rendah atau dalam fase uap nitrogen cair.

• Proses Pembekuan dan Media: Untuk kriopreservasi, gunakan CM-1 atau CM-ACF, atau media pertumbuhan dengan FBS dan DMSO, sebagai media pembekuan. Gunakan teknik pembekuan lambat, turunkan suhu secara bertahap sebesar 1°C per menit.

• Proses Pencairan: Cairkan sel Vero dengan merendam wadah dalam penangas air bersuhu 37°C dan aduk perlahan selama 40-60 detik. Kemudian, encerkan sel dalam medium segar, sentrifus untuk menghilangkan krioprotektan, resuspensi dalam medium pertumbuhan segar, dan letakkan di labu baru untuk memulihkan dan menumbuhkannya.

• Tingkat Keamanan Hayati: Sel Vero harus ditangani di laboratorium yang memenuhi persyaratan keamanan hayati tingkat 1.

Aplikasi lini sel Vero dalam penelitian

Lini sel Vero memiliki banyak aplikasi penelitian di bidang biologi sel dan virologi. Di sini, kami telah membahas beberapa yang spesifik.

Sel Vero dalam Penelitian Virus dan Produksi Vaksin

Sel Vero, yang berasal dari sel ginjal monyet hijau Afrika, telah menjadi bahan pokok dalam pengembangan bioproses vaksin untuk berbagai virus, termasuk virus polio dan virus ensefalitis Jepang. Kemampuan beradaptasi mereka dalam kultur yang melekat dan suspensi serta kemampuan mendukung virus yang luas, termasuk untuk patogen seperti virus des petits ruminansia, menyoroti signifikansi mereka dalam isolasi virus dan pengembangan vaksin.

Sejumlah penelitian telah memanfaatkan sel Vero untuk produksi vaksin manusia. Misalnya, sebuah penelitian penting yang diterbitkan pada tahun 2019 menunjukkan penggunaan sel Vero dalam pengembangan vaksin yang tidak aktif untuk virus demam kuning [2].

Sel Vero biasanya digunakan dalam penelitian infeksi virus, seperti penelitian yang dilakukan pada tahun 2020 yang menginfeksi sel Vero dengan isolat virus SARS-CoV-2 yang berbeda untuk mempelajari sifat pertumbuhan virus [4]. Demikian pula, penelitian lain menyelidiki respons sel terhadap infeksi SARS-CoV-2 menggunakan kultur sel Vero [5].

Peran Sel Vero dalam Rekayasa Jaringan dan Pengembangan Bioproses Hulu

Di luar produksi vaksin, sel Vero berkontribusi pada rekayasa jaringan dan bidang pengembangan bioproses yang lebih luas, menggarisbawahi perlunya penelitian berkelanjutan tentang sifat dan aplikasinya. Pemilihan sublines sel Vero yang tepat adalah kunci untuk memaksimalkan potensinya dalam industri bioteknologi dan farmasi.

Penerapan Sel Vero dalam Pengujian Kemanjuran dan Keamanan Obat

Sel Vero sering digunakan dalam pengujian obat untuk menilai efektivitas dan keamanan senyawa farmasi. Sel-sel ini sering dianggap sebagai model standar untuk sel ginjal normal dalam penelitian yang menyelidiki efek sitotoksik dari berbagai obat dan agen terapeutik. Sebagai contoh, penelitian yang membandingkan dampak ekstrak akar tanaman Terminalia avicennioides pada HepG2, garis sel kanker hati, dan sel Vero, yang berasal dari epitel ginjal monyet, menemukan bahwa ekstrak tersebut lebih merusak sel kanker daripada sel normal.

Keterbatasan Sel Vero

Meskipun sel Vero digunakan secara luas, sel ini memiliki keterbatasan, seperti produksi toksin vero dan perubahan genom yang dapat memengaruhi aplikasi tertentu. Memahami sublines spesifik dan fitur genomik sel Vero, termasuk garis keturunan Vero F6, sangat penting untuk mengoptimalkan penggunaannya dalam berbagai bioproses.

Jelajahi sel Vero dan turunannya untuk aplikasi penelitian yang inovatif

Publikasi penelitian

Berikut ini adalah beberapa publikasi penelitian terbaru dan yang paling banyak dikutip yang menampilkan sel Vero.

Adaptasi sel Vero untuk pertumbuhan suspensi untuk produksi virus rabies dalam media bebas serum yang berbeda

Penelitian yang dipublikasikan di Vaccine Journal (2019) ini mengadaptasi sel Vero untuk tumbuh dalam kultur suspensi untuk memproduksi virus rabies dengan titer tinggi menggunakan berbagai media bebas serum.

Kerentanan Toxoplasma gondii terhadap Ekstrak Etanolik Tinospora crispa dalam Sel Vero

Makalah ini dipublikasikan di jurnal Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine pada tahun 2019. Studi tersebut mengusulkan bahwa ekstrak etanolik tanaman Tinospora crispa memberikan efek yang merugikan pada parasit Toxoplasma gondii. Namun, itu aman untuk sel inang (garis sel Vero).

Efek ekstrak daun Colchicum baytopiorum terhadap sitotoksisitas dan jalur kematian sel pada jalur sel C-4 I dan Vero

Artikel ini diterbitkan oleh Journal of the Balkan Union of Oncology pada tahun 2021. Dalam penelitian ini, Ozlem Dagdeviren Ozsoylemez dan Gul Ozcan mengeksplorasi efek sitotoksik ekstrak daun Colchicum baytopiorum pada garis sel C-4I dan Vero.

Resveratrol menghambat replikasi sindrom pernapasan akut parah coronavirus 2 (SARS-CoV-2) dalam sel Vero yang dikultur

Studi dalam Phytotherapy Research (2021) ini menggunakan sel Vero yang terinfeksi SARS-CoV-2 untuk menyelidiki efek terapeutik resveratrol pada replikasi virus.

Statin lipofilik menghambat produksi virus Zika dalam sel Vero

Makalah ini dalam Nature Scientific Reports (2019) mengusulkan bahwa statin lipofilik, yaitu cerivastatin, lovastatin, fuvastatin, simvastatin, dan mevastatin, dapat menghambat produksi virus Zika dalam sel Vero.

Sumber daya untuk sel Vero: Protokol, video , dan lainnya

• Transfeksi sel Vero: Tautan ini akan memandu Anda melalui protokol transfeksi untuk sel Vero.
• Mentransfeksi garis sel Vero: Video ini menjelaskan protokol transfeksi untuk lini sel Vero.
• Subkultur sel Vero: Video ini menjelaskan rekomendasi subkultur umum untuk garis sel yang patuh.

Protokol kultur sel

• Membudidayakan sel Vero: Situs web ini berisi protokol yang dijelaskan dengan baik untuk menumbuhkan sel Vero.
• Kultur sel Vero: Dokumen ini dapat membantu Anda mempelajari protokol untuk menyebarkan, memelihara, dan membekukan sel Vero.

Referensi

1. Ammerman, NC, M. Beier-Sexton, dan AF Azad, Pertumbuhan dan pemeliharaan garis sel Vero. Protokol terkini dalam mikrobiologi, 2008. 11(1): p. A. 4E. 1-A. 4E. 7.
2. Pato, T.P., dkk., Pemurnian virus demam kuning yang diproduksi dalam sel Vero untuk pembuatan vaksin inaktif. Vaccine, 2019. 37(24): p. 3214-3220.
3. Aliyu-Amoo, H., dkk., Efek antiproliferasi ekstrak dan fraksi akar Terminalia avicennioides (Combretaceae) Guill dan Perr. pada garis sel HepG2 dan Vero. Clinical Phytoscience, 2021, 7(1): p. 1-7.
4. Yao, P., dkk., Isolasi dan karakteristik pertumbuhan SARS-CoV-2 pada sel Vero. Virologica Sinica, 2020. 35(3): p. 348-350.
5. Park, B.K., dkk., Pensinyalan diferensial dan produksi virus dalam sel Calu-3 dan sel Vero pada infeksi SARS-CoV-2. Biomolekul & Terapi, 2021. 29(3): p. 273.