Sel SH-SY5Y - Penelitian Neuroblastoma dan Relevansi Neurosains Sel SH-SY5Y
Garis sel SH-SY5Y, yang berasal dari neuroblastoma manusia, digunakan secara luas dalam penelitian medis untuk menyelidiki penyakit neurodegeneratif dan mengembangkan obat. Para peneliti menggunakan sel-sel ini dalam bentuk aslinya yang tidak berdiferensiasi atau membedakannya menjadi sel-sel yang menyerupai neuron.
Informasi umum dan asal-usul garis sel SH-SY5Y
Bagian ini akan membahas informasi dasar tentang garis sel SH-SY5Y, termasuk asal-usul, definisi, dan struktur sel. Kami akan membahas pertanyaan-pertanyaan seperti morfologi dan asal usul sel.
- SH-SY5Y adalah garis sel turunan manusia yang berasal dari subkloning garis sel neuroblastoma SK-N-SH pada tahun 1970.
- Garis sel induk, SK-N-SH, dikembangkan dari biopsi sumsum tulang pasien neuroblastoma wanita berusia empat tahun.
- Sel SH-SY5Y secara fenotipik bersifat adrenergik dan mengekspresikan penanda dopaminergik, menjadikannya model in vitro yang berguna untuk mempelajari penyakit neurodegeneratif, neurogenesis, dan karakteristik sel otak [1].
- Sel SH-SY5Y tumbuh sebagai gumpalan sel neuroblastik yang layak dengan neurit dan melekat secara longgar.
- Ukuran sel sel SH-SY5Y adalah 12 μm.
- Jumlah kromosom modal untuk sel SH-SY5Y adalah 47, dan mereka memiliki penanda kromosom nomor 1 yang langka, trisomi 1q, yang disebabkan oleh penyisipan salinan ekstra dari segmen 1q ke dalam lengan panjang kromosom 1.
Membudidayakan Sel SH-SY5Y
Di laboratorium penelitian neurobiologi, sel SH-SY5Y adalah sel neuroblastoma yang paling banyak dikultur. Untuk bekerja dengan sel-sel ini, penting untuk memahami jenis media pertumbuhan yang cocok untuk kulturnya, karakteristik pertumbuhannya, kepadatan pembenihan yang optimal, dan metode yang tepat untuk membekukannya. Bagian ini akan memberikan informasi penting tentang kultur sel SH-SY5Y untuk membantu Anda dengan aspek-aspek ini.
Poin-poin Penting untuk Membudidayakan Sel SH-SY5Y
|
Waktu Penggandaan Populasi: Waktu penggandaan populasi rata-rata untuk sel SH-SY5Y adalah sekitar 3 hingga 4 hari. |
|
Patuh atau dalam Penangguhan: SH-SY5Y adalah sel yang melekat secara longgar. Mereka tumbuh sebagai rumpun ketika diunggulkan pada kepadatan tinggi. |
|
Kepadatan Penyemaian: Kepadatan pembibitan optimal untuk SH-SY5Y adalah 1 x 104 sel / cm2. Kultur SH-SY5Y terdiri dari sel yang melekat dan mengambang. |
|
Media Pertumbuhan: DMEM: Media Ham's F12 yang dilengkapi dengan 3,1 g / L glukosa, 10% FBS, dan 1,6 mM L-glutamin sangat ideal untuk menumbuhkan garis sel SH-SY5Y. |
|
Kondisi Pertumbuhan (Suhu, CO2): Sel SH-SY5Y ditumbuhkan pada suhu 37 ° C dalam inkubator yang dilembabkan dengan suplai CO2 5%. |
|
Penyimpanan: Untuk menjaga kelangsungan hidup sel SH-SY5Y, sel disimpan dalam fase uap nitrogen cair pada suhu di bawah -150 ° C. |
|
Proses dan Media Pembekuan: Media pembekuan CM-1 atau CM-ACF digunakan untuk membekukan sel SH-SY5Y. Metode pembekuan lambat yang secara bertahap menurunkan suhu sebesar 1 ° C dipilih untuk membekukan garis sel neuroblastoma ini. |
|
Proses Pencairan: Botol beku yang berisi sel SH-SY5Y ditempatkan dalam penangas air yang diatur pada suhu 37 ° C. Botol diaduk dengan cepat sampai sel-sel mencair, dan hanya gumpalan es kecil yang tersisa. |
|
Tingkat Keamanan Hayati: Sel SH-SY5Y dapat dikultur di laboratorium keamanan hayati tingkat 1. |
Sel SH-SY5Y: Keuntungan & Keterbatasan
Keuntungan
- Diferensiasi menjadi Neuron: Sel SH-SY5Y dapat dibedakan menjadi neuron fungsional menggunakan senyawa tertentu, memberikan alternatif yang lebih nyaman untuk neuron primer dan menghindari masalah etika yang terkait dengan penggunaannya [2].
- Model In Vitro untuk Penyakit Neurodegeneratif: Ekspresi penanda molekuler, termasuk penanda saraf dopaminergik, membuat sel SH-SY5Y cocok untuk mempelajari gangguan neurodegeneratif seperti Parkinson.
Keterbatasan
- Siklus Sel yang tidak sinkron: Kultur sel SH-SY5Y menunjukkan siklus sel yang tidak sinkron dalam keadaan tidak berdiferensiasi [3].
- Keadaan Diferensiasi yang Tidak Terdefinisi: Sel SH-SY5Y memiliki keadaan diferensiasi yang tidak terdefinisi yang berkisar dari keadaan neuroblastoma tumorigenik hingga neuron postmitosis atau sel progenitor saraf. Mereka tidak mengekspresikan penanda molekuler yang dilakukan oleh sel neuron dewasa [4].
Sel SH-SY5Y untuk Neurofarmakologi In Vitro & Penemuan Obat
Aplikasi sel SH-SY5Y
Penelitian Penyakit Neurodegeneratif: Sel SH-SY5Y digunakan untuk mempelajari gangguan neurodegeneratif, seperti penyakit Alzheimer dan Parkinson. Sebagai contoh, sebuah penelitian memperlakukan sel SH-SY5Y dengan amiloid β peptida 1-42 untuk membuat model in vitro penyakit Alzheimer. Garis sel yang dikembangkan kemudian ditransfeksi dengan pcDNA-17A dan 17A shRNA untuk memeriksa efek dari RNA non-kode panjang 17A pada sel yang menyerupai penyakit Alzheimer. Studi tersebut menunjukkan bahwa LncRNA-17A mengatur apoptosis dan autofagi sel SH-SY5Y, meniru AD [5].
Pengembangan Obat: Sel SH-SY5Y digunakan untuk menyaring dan memvalidasi obat untuk efek terapeutiknya terhadap penyakit neurodegeneratif. Misalnya, sebuah penelitian yang dilakukan pada tahun 2021 menginduksi parkinsonisme pada sel SH-SY5Y menggunakan herbisida (Paraquat) dan kemudian menggunakan sel-sel ini untuk menyelidiki potensi terapeutik flavonoid, Naringenin. Senyawa ini menunjukkan efek perlindungan terhadap neurodegenerasi yang dimediasi oleh penyakit Parkinson dan neurotoksisitas pada model sel, yang menunjukkan potensinya untuk mengembangkan pengobatan PD [6].
Publikasi Penelitian yang Menampilkan Sel SH-SY5Y
Ada banyak studi penelitian tentang sel SH-SY5Y. Bagian ini akan membahas beberapa contoh penting.
- LncRNA17A mengatur autophagy dan apoptosis garis sel SH-SY5Y sebagai model in vitro untuk penyakit Alzheimer: Dalam publikasi ini, diusulkan bahwa LncRNA17A memediasi apoptosis dan autophagy sel SH-SY5Y yang secara eksperimental diubah menjadi model penyakit Alzheimer.
- Naringenin mengurangi kehilangan neuron dopaminergik yang diinduksi paraquat pada sel SH-SY5Y dan model tikus penyakit Parkinson: Studi ini menyarankan senyawa Naringenin sebagai neuroprotektor terhadap model seluler dan hewan yang dikembangkan secara eksperimental dari penyakit Parkison.
- Karakterisasi biokimia dari garis sel SH-SY5Y yang proliferatif dan terdiferensiasi sebagai model penyakit Parkinson: Sel SH-SY5Y yang terdiferensiasi digunakan untuk mengkarakterisasi dan menilai beberapa proses biokimia yang sering dipelajari pada penyakit Parkinson.
- Efek In Vitro Acitretin pada Sel SH-SY5Y Neuronal Manusia: Sel SH-SY5Y digunakan untuk mempelajari diferensiasi neuron. Para peneliti menyelidiki bahwa Acitretin mempromosikan diferensiasi neuron dan mengobati gangguan neurodegeneratif dan perkembangan saraf dan tumor otak.
- Transformasi garis sel SH-SY5Y menjadi sel mirip neuron: Investigasi perubahan elektrofisiologis dan biomekanik: Penelitian ini mengubah sel blastoma saraf SH-SY5Y menjadi neuron dengan mengobatinya dengan asam retinoat dan molekul Brain-Derived Neurotrophic Factor (BDNF) dan memeriksa perubahan biokimia dan elektrofisiologis di dalamnya.
Sumber daya untuk Sel SH-SY5Y: Protokol, Video, dan Lainnya
Beberapa sumber daya online tersedia pada garis sel neuroblastoma yang terkenal ini. Sumber daya ini dapat mengedukasi Anda tentang penanganan dan pemeliharaan kultur SH-SY5Y.
Protokol kultur sel
Artikel situs web berikut ini dapat membantu Anda mempelajari metode untuk membudidayakan, membekukan, dan mencairkan sel SH-SY5Y.
- Membudidayakan sel SH-SY5Y:Informasi dasartentang sel SH-SY5Y, termasuk pencairan sel, pembekuan, dan subkultur.
- Subkultur SH-SY5Y: Menampilkan informasi tentang media pertumbuhan yang digunakan dan langkah-langkah subkultur untuk sel SH-SY5Y.
- Mentransfeksi sel SH-SY5Y: Dokumen ini menjelaskan protokol transfeksi sementara untuk garis sel SH-SY5Y.
- Protokol diferensiasi: Video ini menjelaskan protokol untuk membedakan sel SH-SY5Y.
Kami berharap artikel ini akan memberikan informasi yang bermanfaat mengenai penanganan, kultur, dan penggunaan sel SH-SY5Y dalam studi penelitian; jika Anda ingin bekerja pada lini sel neuroblastoma ini, pertimbangkan untuk memesan dari kami.
Garis Sel SH-SY5Y: Pertanyaan yang Sering Diajukan
Referensi
- Carvajal-Oliveros, A., dkk., Garis sel BE (2) -M17 memiliki fenotipe dopaminergik yang lebih baik daripada yang secara tradisional digunakan untuk penelitian Parkinson SH-SY5Y, yang sebagian besar bersifat serotonergik. Laporan Ilmu Saraf IBRO, 2022. 13: p. 543-551.
- Kovalevich, J. dan D. Langford, Pertimbangan untuk penggunaan sel neuroblastoma SH-SY5Y dalam neurobiologi. Kultur sel saraf: metode dan protokol, 2013: hal. 9-21.
- Martin, E.-R., J. Gandawijaya, dan A. Oguro-Ando, Metode baru untuk menghasilkan sel mirip neuron SH-SY5Y glutamatergik dengan menggunakan suplemen B-27. Perbatasan dalam Farmakologi, 2022: hal. 4042.
- Feles, S., dkk., Menyederhanakan kondisi kultur untuk garis sel neuroblastoma SH-SY5Y: prasyarat untuk studi fungsional. Metode dan Protokol, 2022. 5(4): p. 58.
- Wang, X., M. Zhang, dan H. Liu, LncRNA17A mengatur autophagy dan apoptosis garis sel SH-SY5Y sebagai model in vitro untuk penyakit Alzheimer. Biosains, bioteknologi, dan biokimia, 2019. 83(4): p. 609-621.
- Ahmad, MH, dkk., Naringenin mengurangi kehilangan neuron dopaminergik yang diinduksi paraquat pada sel SH-SY5Y dan model tikus penyakit Parkinson. Neurofarmakologi, 2021. 201: p. 108831.