Sel SH-SY5Y - Penelitian Neuroblastoma dan Relevansi Sel SH-SY5Y dalam Ilmu Saraf

Garis sel SH-SY5Y, yang berasal dari neuroblastoma manusia, digunakan secara luas dalam penelitian medis untuk menyelidiki penyakit neurodegeneratif dan mengembangkan obat-obatan. Para peneliti menggunakan sel-sel ini dalam bentuk aslinya yang belum berdiferensiasi atau mendiferensiasikannya menjadi sel-sel yang menyerupai neuron.

Informasi umum dan asal-usul garis sel SH-SY5Y

Bagian ini akan membahas informasi dasar mengenai garis sel SH-SY5Y, termasuk asal-usul, definisi, dan struktur selulernya. Kami akan menjawab pertanyaan-pertanyaan seperti morfologi dan asal-usul sel tersebut.

• SH-SY5Y adalah garis sel yang berasal dari manusia yang berasal dari subkloning garis sel neuroblastoma SK-N-SH pada tahun 1970.
• Lini sel induk, SK-N-SH, dikembangkan dari biopsi sumsum tulang seorang pasien neuroblastoma perempuan berusia empat tahun.
• Sel SH-SY5Y secara fenotipik bersifat adrenergik dan mengekspresikan penanda dopaminergik, sehingga menjadikannya model in vitro yang berguna untuk mempelajari penyakit neurodegeneratif, neurogenesis, dan karakteristik sel otak [1].
• Sel SH-SY5Y tumbuh sebagai gumpalan sel neuroblastik yang hidup dengan neurit dan melekat secara longgar.
• Ukuran sel SH-SY5Y adalah 12 μm.
• Jumlah kromosom modal untuk sel SH-SY5Y adalah 47, dan sel-sel ini memiliki penanda langka pada kromosom nomor 1, yaitu trisomi 1q, yang disebabkan oleh penyisipan salinan ekstra segmen 1q ke dalam lengan panjang kromosom 1.

Pemeliharaan Sel SH-SY5Y

Di laboratorium penelitian neurobiologi, sel SH-SY5Y merupakan sel neuroblastoma yang paling sering dikultur. Untuk bekerja dengan sel-sel ini, penting untuk memahami jenis media pertumbuhan yang sesuai untuk kulturnya, karakteristik pertumbuhannya, kepadatan penanaman yang optimal, serta metode pembekuan yang tepat. Bagian ini akan memberikan informasi penting mengenai kultur sel SH-SY5Y untuk membantu Anda dalam aspek-aspek tersebut.

Poin-Poin Penting dalam Pembiakan Sel SH-SY5Y

Waktu Penggandaan Populasi: Waktu penggandaan populasi rata-rata sel SH-SY5Y adalah sekitar 3 hingga 4 hari.

Sel yang Melekat atau dalam Suspensi: SH-SY5Y adalah sel yang melekat secara longgar. Sel-sel ini tumbuh berkelompok ketika ditanam dengan kepadatan tinggi.

Kepadatan Penaburan: Kepadatan penaburan optimal untuk sel SH-SY5Y adalah 1 x 10⁴ sel/cm². Kultur sel SH-SY5Y terdiri dari sel yang melekat dan sel yang mengapung.

Media Pertumbuhan: Media DMEM:Ham's F12 yang ditambah dengan 3,1 g/L glukosa, 10% FBS, dan 1,6 mM L-glutamin sangat ideal untuk menumbuhkan garis sel SH-SY5Y.

Kondisi Pertumbuhan (Suhu, CO₂): Sel SH-SY5Y ditumbuhkan pada suhu 37°C dalam inkubator yang dilembabkan dengan pasokan CO₂ sebesar 5%.

Penyimpanan: Untuk menjaga viabilitas sel SH-SY5Y, sel-sel tersebut disimpan dalam fase uap nitrogen cair pada suhu di bawah -150°C.

Proses Pembekuan dan Media: Media pembekuan CM-1 atau CM-ACF digunakan untuk membekukan sel SH-SY5Y. Metode pembekuan lambat yang secara bertahap menurunkan suhu sebesar 1°C dipilih untuk membekukan garis sel neuroblastoma ini.

Proses Pencairan: Botol beku yang berisi sel SH-SY5Y ditempatkan dalam penangas air yang disetel pada suhu 37°C. Botol tersebut dikocok dengan cepat hingga sel mencair, dan hanya tersisa gumpalan es kecil.

Tingkat Keamanan Biologis: Sel SH-SY5Y dapat dikultur di laboratorium dengan tingkat keamanan biologis 1.

Sel SH-SY5Y: Keunggulan & Keterbatasan

Keunggulan

• Diferensiasi Menjadi Neuron: Sel SH-SY5Y dapat didiferensiasi menjadi neuron fungsional menggunakan senyawa tertentu, sehingga menjadi alternatif yang lebih praktis daripada neuron primer dan menghindari masalah etika yang terkait dengan penggunaannya [2].
• Model In Vitro untuk Penyakit Neurodegeneratif: Ekspresi penanda molekuler, termasuk penanda saraf dopaminergik, membuat sel SH-SY5Y cocok untuk mempelajari gangguan neurodegeneratif seperti Parkinson.

Keterbatasan

• Siklus Sel yang Tidak Sinkron: Kultur sel SH-SY5Y menunjukkan siklus sel yang tidak sinkron dalam keadaan belum berdiferensiasi [3].
• Status Diferensiasi yang Tidak Jelas: Sel SH-SY5Y memiliki status diferensiasi yang tidak jelas, mulai dari status neuroblastoma yang dapat menyebabkan tumor hingga neuron pascamitosis atau sel progenitor saraf. Sel-sel ini tidak mengekspresikan penanda molekuler seperti yang dilakukan oleh sel neuron yang matang [4].

Sel SH-SY5Y untuk Neurofarmakologi In Vitro dan Penemuan Obat

Aplikasi sel SH-SY5Y

Penelitian Penyakit Neurodegeneratif: Sel SH-SY5Y digunakan untuk mempelajari gangguan neurodegeneratif, seperti penyakit Alzheimer dan Parkinson. Sebagai contoh, sebuah penelitian memperlakukan sel SH-SY5Y dengan peptida amyloid β 1-42 untuk membuat model in vitro penyakit Alzheimer. Garis sel yang dikembangkan kemudian ditransfeksi dengan pcDNA-17A dan shRNA 17A untuk menguji pengaruh RNA non-koding panjang 17A pada sel yang menyerupai sel penderita penyakit Alzheimer. Penelitian tersebut menunjukkan bahwa LncRNA-17A mengatur apoptosis dan autofagi sel SH-SY5Y, yang menyerupai AD [5].

Pengembangan Obat: Sel SH-SY5Y digunakan untuk menyaring dan memvalidasi obat-obatan guna mengetahui efek terapeutiknya terhadap penyakit neurodegeneratif. Misalnya, sebuah penelitian yang dilakukan pada tahun 2021 menginduksi parkinsonisme pada sel SH-SY5Y menggunakan herbisida (Paraquat) dan kemudian menggunakan sel-sel ini untuk menyelidiki potensi terapeutik dari flavonoid, Naringenin. Senyawa tersebut menunjukkan efek perlindungan terhadap neurodegenerasi dan neurotoksisitas yang dipicu oleh penyakit Parkinson pada model sel, yang mengindikasikan potensinya dalam pengembangan pengobatan PD [6].

Publikasi Penelitian yang Menampilkan Sel SH-SY5Y

Terdapat banyak penelitian mengenai sel SH-SY5Y. Bagian ini akan membahas beberapa contoh penting.

• LncRNA17A mengatur autofagi dan apoptosis pada garis sel SH-SY5Y sebagai model in vitro untuk penyakit Alzheimer: Dalam publikasi ini, diusulkan bahwa LncRNA17A memediasi apoptosis dan autofagi sel SH-SY5Y yang secara eksperimental diubah menjadi model penyakit Alzheimer.
• Naringenin mengurangi kehilangan neuron dopaminergik yang diinduksi paraquat pada sel SH-SY5Y dan model tikus penyakit Parkinson: Penelitian ini menyarankan senyawa Naringenin sebagai neuroprotektan terhadap model seluler dan hewan penyakit Parkinson yang dikembangkan secara eksperimental.
• Karakterisasi biokimia dari garis sel SH-SY5Y yang sedang berkembang biak dan terdiferensiasi sebagai model penyakit Parkinson: Sel SH-SY5Y yang terdiferensiasi digunakan untuk mengkarakterisasi dan menilai beberapa proses biokimia yang sering dipelajari dalam penyakit Parkinson.
• Efek Acitretin secara in vitro pada sel saraf manusia SH-SY5Y: Sel SH-SY5Y digunakan untuk mempelajari diferensiasi saraf. Para peneliti menyelidiki bahwa Acitretin mendorong diferensiasi saraf serta mengobati gangguan neurodegeneratif, neurodevelopmental, dan tumor otak.
• Transformasi garis sel SH-SY5Y menjadi sel mirip neuron: Penyelidikan perubahan elektrofisiologis dan biomekanis: Penelitian ini mengubah sel blastoma saraf SH-SY5Y menjadi neuron dengan memperlakukannya menggunakan asam retinoat dan molekul Brain-Derived Neurotrophic Factor (BDNF), serta menganalisis perubahan biokimia dan elektrofisiologis yang terjadi.

Sumber Daya untuk Sel SH-SY5Y: Protokol, Video, dan Lainnya

Tersedia beberapa sumber daya daring mengenai garis sel neuroblastoma yang terkenal ini. Sumber daya ini dapat memberikan informasi mengenai penanganan dan pemeliharaan kultur SH-SY5Y.

Protokol kultur sel

Artikel-artikel di situs web berikut ini dapat membantu Anda mempelajari metode kultur, pembekuan, dan pencairan sel SH-SY5Y.

• Kultur sel SH-SY5Y: Informasi dasar mengenai sel SH-SY5Y, termasuk pencairan, pembekuan, dan subkultur sel.
• Subkultur sel SH-SY5Y: Menyajikan informasi mengenai media pertumbuhan yang digunakan serta langkah-langkah subkultur sel SH-SY5Y.
• Transfeksi sel SH-SY5Y: Dokumen ini menjelaskan protokol transfeksi sementara untuk garis sel SH-SY5Y.
• Protokol diferensiasi: Video ini menjelaskan protokol untuk diferensiasi sel SH-SY5Y.

Kami berharap artikel ini akan memberikan informasi yang bermanfaat mengenai penanganan, kultur, dan penggunaan sel SH-SY5Y dalam penelitian; jika Anda ingin bekerja dengan garis sel neuroblastoma ini, pertimbangkan untuk memesan dari kami.

Garis Sel SH-SY5Y: Pertanyaan yang Sering Diajukan