Sel HK-2 - Meneliti Fungsi dan Patologi Ginjal Menggunakan Sel HK-2 dalam Penelitian Ginjal
HK-2 adalah garis sel epitel ginjal manusia yang diimortalkan dan sering digunakan dalam penelitian toksikologi. Para peneliti mengevaluasi efek racun lingkungan pada sel-sel ginjal ini. Selain itu, mereka juga menggunakan sel HK-2 untuk menyelidiki penyakit ginjal dan mekanisme yang mendasarinya.
- Media Pertumbuhan
- Media garis sel keratinosit yang mengandung 10% serum janin sapi, 0,05 mg/ml ekstrak hipofisis sapi (BPE), dan 5 ng/ml faktor pertumbuhan epidermal (EGF) merupakan media sel HK-2 yang ideal. Media harus diganti setiap 2 hingga 3 hari sekali.
- Waktu Penggandaan
- Waktu penggandaan sel HK-2 berkisar antara 47,3 jam dan 61,7 jam.
- Jenis Pertumbuhan
- Garis sel epitel ginjal HK-2 bersifat melekat.
- Tingkat Keamanan Biologis
- BSL-2
- Tersedia dari
- Cytion — Pesan HK-2
Sel HK-2: Asal-usul dan karakteristik umum
Asal-usul dan karakteristik umum suatu garis sel sangat penting untuk diketahui guna penanganan, pemeliharaan, dan penggunaan garis sel yang tepat. Bagian artikel ini akan membahas hal-hal berikut: Apa itu sel HK-2 dalam ginjal manusia 2? Apa peran HK2? Apa itu sel HK2? Dari mana asal garis sel HK-2? Berapa ukuran dan morfologi sel HK-2?
- Sel Human Kidney 2 (HK-2) adalah jenis sel tubulus proksimal yang berasal dari jaringan ginjal normal orang dewasa Eropa. Garis sel HK-2 dibentuk dengan mentransfeksi sel ginjal menggunakan retrovirus rekombinan yang terdiri dari gen E6/E7 human papillomavirus 16. Eksperimen ini menyebabkan imortalitas dan pembentukan garis sel epitel ginjal HK-2 yang terus tumbuh.
- Sel HK-2 menunjukkan morfologi epitel.
- Ukuran sel HK-2 berkisar antara 17,4–18,6 µm dalam diameter. Diameter rata-rata adalah 18,2 µm [1].
Garis sel HK-2: Informasi tentang kultur sel
Informasi mengenai kultur sel ginjal manusia 2 dapat sangat membantu Anda sebelum menggunakannya. Informasi penting mengenai kultur sel HK-2 disebutkan dalam bagian artikel ini. Anda akan mengetahui: Apakah sel HK-2 bersifat melekat? Berapa lama waktu penggandaan sel HK-2? Media apa yang digunakan untuk mengkultur sel HK-2?
Poin-Poin Penting dalam Pembiakan Sel HK-2
Waktu Penggandaan Populasi:
Waktu penggandaan sel HK-2 berkisar antara 47,3 jam dan 61,7 jam.
Melekat atau dalam Suspensi:
Garis sel epitel ginjal HK-2 bersifat melekat.
Rasio subkultur:
Sel HK-2 disubkultur dengan rasio 1:2 hingga 1:4. Sel HK-2 yang melekat dicuci dengan 1 x PBS dan diinkubasi pada suhu kamar selama 8 hingga 10 menit setelah penambahan larutan Accutase. Media kultur ditambahkan ke sel yang telah terdisosiasi dan disentrifugasi. Sel yang terkumpul disuspensi kembali dengan hati-hati dan dituangkan ke dalam labu baru untuk kultur.
Media Pertumbuhan:
Media garis sel keratinosit yang mengandung 10% serum sapi janin, 0,05 mg/ml ekstrak hipofisis sapi (BPE) & 5 ng/ml faktor pertumbuhan epidermal (EGF) adalah media sel HK-2 yang ideal. Media harus diganti setiap 2 hingga 3 hari sekali dalam seminggu.
Kondisi Pertumbuhan:
Kultur garis sel ginjal manusia 2 disimpan dalam inkubator yang dilembabkan dengan pasokan CO₂ 5% pada suhu 37°C.
Penyimpanan:
Sel beku disimpan dalam fase uap nitrogen cair atau pada suhu di bawah -150 °C dalam freezer bersuhu sangat rendah.
Proses Pembekuan dan Media:
Media pembekuan CM-1 atau CM-ACF sangat ideal untuk pembekuan sel HK-2. Singkatnya, metode pembekuan lambat dipilih sehingga suhu hanya turun 1 derajat Celcius per menit dan melindungi sel dari guncangan apa pun.
Proses Pencairan:
Sel beku dicairkan dalam penangas air yang disetel pada suhu 37 derajat Celcius. Sel-sel ini ditambahkan dengan media kultur segar dan disuspensi kembali. Setelah itu, sel-sel tersebut dimasukkan ke dalam labu baru yang berisi media pertumbuhan. Setelah 24 jam, media diganti untuk menghilangkan komponen media pembekuan.
Tingkat Keamanan Biologis:
Kultur sel HK-2 dipelihara di laboratorium tingkat keamanan biologis 1.
Keunggulan & Keterbatasan Sel HK-2
HK-2 adalah garis sel epitel tubulus proksimal manusia yang banyak digunakan. Seperti garis sel lainnya, garis sel ini juga memiliki beberapa kelebihan dan keterbatasan. Bagian ini akan membahas beberapa kelebihan dan kekurangan utama dari garis sel ginjal manusia 2.
Keunggulan
Keuntungan utama dari garis sel HK-2 meliputi:
Terkarakterisasi dengan baik
Garis sel HK-2 telah dikarakterisasi secara ekstensif dalam hal morfologi, ukuran, dan genomnya. Berbagai penelitian telah dilakukan pada sel-sel ginjal normal ini.
Diimortalkan
HK-2 adalah garis sel kontinu dengan masa hidup yang panjang, sehingga memungkinkan untuk diperbanyak melalui beberapa kali pemindahan. Fitur ini memastikan pasokan sel yang berkelanjutan untuk eksperimen laboratorium.
Karakteristik epitel tubulus proksimal
Sel HK-2 menunjukkan fenotipe yang terdiferensiasi dengan baik, yang merupakan karakteristik sel tubulus proksimal (PTC) yang ditemukan di ginjal manusia. Ciri unik ini menjadikan sel HK-2 sebagai model in vitro yang berharga untuk mempelajari fisiologi ginjal, proses sel, dan respons terhadap berbagai rangsangan.
Keterbatasan
Berikut adalah beberapa keterbatasan dari garis sel HK-2:
Model in vitro
HK-2 berfungsi sebagai model in vitro sel ginjal normal, khususnya yang menunjukkan karakteristik sel epitel tubulus proksimal. Namun, model ini mungkin tidak sepenuhnya mereplikasi kompleksitas jaringan ginjal manusia dan lingkungan mikro yang ditemukan in vivo.
Aplikasi garis sel HK-2 dalam penelitian
Garis sel HK-2 memiliki banyak aplikasi dalam penelitian toksikologi. Di sini, kami telah membahas beberapa penggunaan penelitian yang spesifik dan signifikan dari garis sel tubulus proksimal manusia ini.
- Fisiologi ginjal: Sel HK-2 umumnya digunakan untuk mempelajari fisiologi dan fungsi ginjal normal. Para peneliti menggunakan sel epitel tubulus proksimal ini untuk menyelidiki saluran ion, proses transportasi, dan mekanisme seluler lainnya yang mengatur homeostasis ginjal. Misalnya, para peneliti mempelajari peran saluran Transient Receptor Potential Channel 6 (TRPC6) dalam kematian sel yang diinduksi oleh (+)-Conocarpan (CNCP), sebuah neolignan, pada sel epitel ginjal, HK-2 [2].
- Penyakit ginjal: Garis sel ginjal manusia 2 digunakan untuk menyelidiki berbagai penyakit ginjal, yaitu cedera ginjal akut dan nefropati diabetik, serta mekanisme seluler dan molekuler yang mendasarinya. Misalnya, penelitian menemukan bahwa tingkat metilasi protein klotho terkait dengan kerusakan ginjal. Menurunkan metilasi promotor gen Klotho dapat meningkatkan ekspresinya dan mengurangi kerusakan ginjal yang diinduksi pada model tikus db/db diabetes dan sel HK-2 yang diberi perlakuan glukosa tinggi [3].
- Studi toksikologi: Sel HK-2 merupakan alat penelitian yang sangat baik untuk mengevaluasi potensi efek berbagai obat, bahan kimia, dan polutan lingkungan. Studi tersebut dapat membantu peneliti mengevaluasi keamanan obat dan efek sampingnya pada sel ginjal. Misalnya, sebuah studi yang diterbitkan pada tahun 2022 mengevaluasi potensi efek polisakarida dan ekstrak air dari tumbuhan herbal alami Polygonatumkingianum (PK) terhadap nefrotoksisitas yang diinduksi uranium pada sel HK-2. Mereka menemukan bahwa PK memberikan efek perlindungan dan mencegah keracunan uranium pada sel-sel ginjal [4].
5. Sel HK-2: Publikasi penelitian
Berikut ini adalah beberapa publikasi penelitian menarik yang menampilkan sel epitel ginjal HK-2.
Studi ini dalam jurnal Diabetes, Metabolic Syndrome, and Obesity (2022) mengusulkan bahwa RNA sirkular HIPK3 dapat mengurangi penghambatan proliferasi sel HK-2 yang disebabkan oleh toksisitas glukosa tinggi. Selain itu, RNA ini dapat menghambat kematian sel dengan mengatur kaskade miR-326/miR-487a-3p/SIRT1.
Publikasi penelitian dalam Nanomedicine (2020) ini menilai mekanisme toksisitas yang berbeda dari nanopartikel emas (AuNPs) pada sel kanker 786-0 dan sel epitel tubulus proksimal HK-2.
Artikel ini diterbitkan dalam Renal Failure (2022). Temuan tersebut menyatakan bahwa mikroRNA-320c dapat mengurangi toksisitas yang diinduksi glukosa tinggi pada sel ginjal (HK-2) dengan menargetkan PTEN dan menghambat sinyal PI3K/AKT.
Eksosom yang Berasal dari Sel Punca Mesenkimal Melemahkan Transisi Epitel-Mesenkimal Sel HK-2
Studi ini dalam Tissue Engineering Part A (2022) mengusulkan bahwa eksosom yang berasal dari sel punca mesenkimal mencegah transisi epitel-ke-mesenkimal pada sel ginjal HK-2.
Artikel dalam Journal of Pharmacy and Pharmacology (2019) menyatakan bahwa lncRNA TapSAKI meningkatkan respons peradangan dan kematian sel HK-2 dengan mengatur jalur sinyal microRNA-22/PTEN/TLR4/NF-κB.
Sumber daya untuk garis sel HK-2: Protokol, Video, dan Lainnya
HK-2 adalah garis sel yang terkenal. Berikut adalah beberapa sumber daya yang menjelaskan protokol kultur sel HK-2.
- Kultur sel HK-2: Situs web ini kaya akan informasi tentang kultur sel HK-2. Situs ini menyediakan resep media sel HK-2, protokol passaging, serta protokol untuk menangani dan memelihara kultur proliferatif dan kultur yang diawetkan dengan kriopreservasi.
- Pemindahan sel: Video ini akan membantu Anda mempelajari protokol pemisahan atau pemindahan umum untuk garis sel yang melekat.
Referensi
- Handl, J., dkk., Dampak pemindahan berulang terhadap kerentanan sel tubulus proksimal manusia HK-2 terhadap senyawa toksik. Physiological Research, 2020. 69(4): hlm. 731.
- Yang, G., dkk., Aktivasi kanal TRPC6 berkontribusi pada kematian sel apoptosis yang diinduksi oleh (+)-conocarpan pada sel HK-2. Food and Chemical Toxicology, 2019. 129: hlm. 281-290.
- Yang, X.H., dkk., EGCG mengurangi kerusakan ginjal dengan membalikkan hipermetilasi klotho pada tikus db/db diabetes dan sel HK-2. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2020. 2020.
- Li, W., dkk., Efek perlindungan polisakarida dan ekstrak air Polygonatum kingianum terhadap toksisitas yang diinduksi uranium pada sel ginjal manusia (HK-2). International Journal of Biological Macromolecules, 2022. 202: hlm. 68-79.