Sel Vero: Membuka Jalan Baru dalam Penelitian Virus dan Inovasi Vaksin

Garis sel Vero, sebuah model sel mamalia yang diimortalkan yang berasal dari sel epitel ginjal monyet hijau Afrika, berada di garis depan penelitian dalam bidang virologi, mikrobiologi, serta biologi seluler dan molekuler. Aplikasinya yang luas mencakup pengembangan vaksin, penyaringan farmasi, serta eksplorasi biologi virus dan parasit, imunologi tumor, dan strategi imunoterapi.

Asal-usul dan Fitur Utama Sel Vero

Mempelajari garis sel seperti Vero memunculkan beberapa pertanyaan: Apa sebenarnya sel Vero itu? Bagaimana garis sel Vero dibentuk? Apa cerita di balik nama "Vero"? Bagian ini bertujuan untuk menjelaskan asal-usul dan atribut utama sel Vero.

Awal mula garis sel Vero dapat ditelusuri kembali ke tahun 1962, yang berasal dari sel epitel ginjal monyet hijau Afrika. Garis sel ini dikembangkan oleh Y. Kawakita dan Yasumura di Universitas Chiba, Jepang. Istilah "Vero" berasal dari "Verda reno" dalam bahasa Esperanto, yang berarti "ginjal hijau", meskipun "Vero" juga beresonansi dengan gagasan "kebenaran".

Sel Vero umumnya membentuk lapisan tunggal (monolayer) tetapi dapat beradaptasi dengan kultur suspensi, dengan menunjukkan struktur mirip epitel. Sel-sel ini dicirikan oleh bentuknya yang bulat hingga memanjang serta diameter rata-rata sekitar 17 µm. Yang perlu diperhatikan, sel Vero menunjukkan jumlah kromosom hipodiploid, dengan jumlah kromosom modal sebesar 58 pada sekitar 66% populasi sel, meskipun terdapat variasi dengan ploidi yang lebih tinggi pada sebagian kecil (1,7%) sel.

Klon Sel Vero dan Sifat-Sifat Uniknya

Klon-klon berbeda yang berasal dari garis keturunan sel Vero menunjukkan ciri-ciri unik yang membedakannya dari garis keturunan aslinya. Di antaranya, dua klon sel Vero yang menonjol adalah:

• Garis Sel Vero E6: Juga dikenal sebagai Vero C1008, klon ini berasal dari sel Vero 76 dan diisolasi pada tahun 1979 oleh P.J. Price menggunakan teknik pengenceran pada pelat mikrotiter. Sel Vero E6 sangat cocok untuk membiakkan virus yang bereplikasi secara lambat.

• Sel Vero 76: Berasal dari ginjal seekor monyet hijau Afrika pada tahun 1968, sel-sel ini mempertahankan morfologi epitel yang menjadi ciri khas sel Vero.

Varian-varian sel Vero ini, bersama dengan garis induknya, terus berperan penting dalam kemajuan penelitian virologi dan pengembangan intervensi medis, yang menandakan signifikansinya dalam komunitas ilmiah.

Informasi tentang kultur sel

Pembiakan sel Vero, yaitu garis sel monyet, memerlukan pemahaman mengenai parameter-parameter tertentu seperti waktu penggandaan, kepadatan penaburan, dan media pertumbuhan yang sesuai.

• Waktu Penggandaan Populasi: Waktu penggandaan sel Vero sekitar 24 jam.

• Adhesi: Sel Vero melekat pada permukaan dan biasanya membentuk lapisan tunggal saat dikultur.

• Kepadatan Penaburan: Disarankan untuk memulai dengan kepadatan penaburan sebesar 1 x 10⁴ sel/cm². Untuk membudidayakan sel Vero yang melekat, cuci sel tersebut dengan PBS dan perlakukan dengan Accutase untuk melepaskannya. Setelah terlepas, sentrifugasi sel-sel tersebut, resuspensi dalam media segar, dan pindahkan ke botol kultur baru.

• Media Pertumbuhan: Baik Ham’s F12 maupun DMEM merupakan media yang cocok untuk membiakkan sel Vero. Media ini harus ditambahkan dengan 2,5 mM L-glutamin dan 5% serum sapi janin (FBS) untuk mendukung pertumbuhan yang optimal. Media harus diganti dua hingga tiga kali seminggu.

• Kondisi Pertumbuhan: Sel Vero tumbuh subur pada suhu 37°C dalam atmosfer yang dilembabkan dan diberi 5% CO₂.

• Penyimpanan: Untuk penyimpanan jangka panjang, sel Vero harus disimpan pada suhu di bawah -150°C, baik di dalam freezer suhu ultra-rendah maupun dalam fase uap nitrogen cair.

• Proses Pembekuan dan Media: Untuk kriopreservasi, gunakan CM-1 atau CM-ACF, atau media pertumbuhan dengan FBS dan DMSO, sebagai media pembekuan. Gunakan teknik pembekuan lambat, dengan menurunkan suhu secara bertahap sebesar 1°C per menit.

• Proses Pencairan: Cairkan sel Vero dengan merendam wadahnya dalam penangas air bersuhu 37°C dan kocok perlahan selama 40–60 detik. Kemudian, encerkan sel dalam media segar, sentrifugasi untuk menghilangkan zat pelindung kriogenik, resuspensi dalam media pertumbuhan segar, dan tempatkan sel-sel tersebut dalam labu baru untuk pemulihan dan pertumbuhan.

• Tingkat Keamanan Biologis: Sel Vero harus ditangani di laboratorium yang memenuhi persyaratan tingkat keamanan biologis 1.

Penerapan garis sel Vero dalam penelitian

Lini sel Vero memiliki berbagai aplikasi penelitian di bidang biologi sel dan virologi. Di sini, kami telah membahas beberapa di antaranya.

Sel Vero dalam Penelitian Virus dan Produksi Vaksin

Sel Vero, yang berasal dari sel ginjal monyet hijau Afrika, telah menjadi bahan pokok dalam pengembangan bioproses vaksin untuk berbagai virus, termasuk virus polio dan virus ensefalitis Jepang. Kemampuan adaptasinya baik dalam kultur adheren maupun suspensi serta kemampuannya yang luas dalam mendukung berbagai virus, termasuk patogen seperti virus des petits ruminants, menyoroti signifikansinya dalam isolasi virus dan pengembangan vaksin.

Banyak penelitian telah memanfaatkan sel Vero untuk produksi vaksin manusia. Sebagai contoh, sebuah penelitian penting yang diterbitkan pada tahun 2019 menunjukkan penggunaan sel Vero dalam pengembangan vaksin inaktif untuk virus demam kuning [2].

Sel Vero umumnya digunakan dalam studi infeksi virus, seperti penelitian yang dilakukan pada tahun 2020 yang menginfeksi sel Vero dengan berbagai isolat virus SARS-CoV-2 untuk mempelajari sifat pertumbuhan virus tersebut [4]. Demikian pula, penelitian lain menyelidiki respons sel terhadap infeksi SARS-CoV-2 menggunakan kultur sel Vero [5].

Peran Sel Vero dalam Rekayasa Jaringan dan Pengembangan Bioproses Hulu

Selain produksi vaksin, sel Vero berkontribusi pada rekayasa jaringan dan bidang pengembangan bioproses yang lebih luas, yang menekankan perlunya penelitian berkelanjutan mengenai sifat dan aplikasinya. Pemilihan subgaris sel Vero yang tepat merupakan kunci untuk memaksimalkan potensinya dalam industri bioteknologi dan farmasi.

Penerapan Sel Vero dalam Pengujian Efikasi dan Keamanan Obat

Sel Vero sering digunakan dalam pengujian obat untuk menilai efektivitas dan keamanan senyawa farmasi. Sel-sel ini sering dianggap sebagai model standar untuk sel ginjal normal dalam studi yang menyelidiki efek sitotoksik berbagai obat dan agen terapeutik. Misalnya, penelitian yang membandingkan dampak ekstrak akar tanaman Terminalia avicennioides pada HepG2, suatu garis sel kanker hati, dan sel Vero yang berasal dari epitel ginjal monyet, menemukan bahwa ekstrak tersebut lebih merugikan sel-sel kanker daripada sel-sel normal.

Keterbatasan Sel Vero

Meskipun sel Vero digunakan secara luas, sel ini memiliki keterbatasan, seperti produksi toksin Vero dan perubahan genomik yang dapat memengaruhi aplikasi tertentu. Memahami subgaris keturunan dan karakteristik genomik sel Vero, termasuk garis keturunan Vero F6, sangat penting untuk mengoptimalkan penggunaannya dalam berbagai bioproses.

Jelajahi sel Vero dan turunannya untuk aplikasi penelitian yang inovatif

Publikasi penelitian

Berikut ini adalah beberapa publikasi penelitian terbaru dan yang paling sering dikutip yang menampilkan sel Vero.

Adaptasi sel Vero untuk pertumbuhan dalam suspensi guna produksi virus rabies dalam berbagai media bebas serum

Penelitian ini, yang diterbitkan dalam jurnal Vaccine (2019), mengadaptasi sel Vero agar dapat tumbuh dalam kultur suspensi guna memproduksi virus rabies dengan titer tinggi menggunakan berbagai media bebas serum.

Kerentanan Toxoplasma gondii terhadap Ekstrak Etanol Tinospora crispa dalam Sel Vero

Makalah ini diterbitkan dalam jurnal Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine pada tahun 2019. Penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol dari tanaman Tinospora crispa memiliki efek merugikan terhadap parasit Toxoplasma gondii. Namun, ekstrak tersebut aman bagi sel inang (garis sel Vero).

Pengaruh ekstrak daun Colchicum baytopiorum terhadap sitotoksisitas dan jalur kematian sel pada garis sel C-4 I dan Vero

Artikel ini diterbitkan oleh Journal of the Balkan Union of Oncology pada tahun 2021. Dalam penelitian ini, Ozlem Dagdeviren Ozsoylemez dan Gul Ozcan meneliti efek sitotoksik ekstrak daun Colchicum baytopiorum terhadap garis sel C-4I dan Vero.

Resveratrol menghambat replikasi severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) pada sel Vero yang dikultur

Penelitian yang dimuat dalam jurnal Phytotherapy Research (2021) ini menggunakan sel Vero yang terinfeksi SARS-CoV-2 untuk menyelidiki efek terapeutik resveratrol terhadap replikasi virus.

Statin lipofilik menghambat produksi virus Zika pada sel Vero

Makalah ini yang diterbitkan dalam *Nature Scientific Reports* (2019) mengusulkan bahwa statin lipofilik, yaitu cerivastatin, lovastatin, fuvastatin, simvastatin, dan mevastatin, dapat menghambat produksi virus Zika pada sel Vero.

Sumber daya untuk sel Vero: Protokol, video, dan lainnya

• Transfeksi sel Vero: Tautan ini akan memandu Anda melalui protokol transfeksi untuk sel Vero.
• Transfeksi garis sel Vero: Video ini menjelaskan protokol transfeksi untuk garis sel Vero.
• Subkultur sel Vero: Video ini menjelaskan rekomendasi umum subkultur untuk garis sel yang melekat.

Protokol kultur sel

• Kultur sel Vero: Situs web ini berisi protokol yang dijelaskan dengan baik untuk kultur sel Vero.
• Kultur sel Vero: Dokumen ini dapat membantu Anda mempelajari protokol untuk memperbanyak, memelihara, dan membekukan sel Vero.

Daftar Pustaka

1. Ammerman, N.C., M. Beier‐Sexton, dan A.F. Azad, Pertumbuhan dan pemeliharaan garis sel Vero. Current protocols in microbiology, 2008. 11(1): hlm. A. 4E. 1–A. 4E. 7.
2. Pato, T.P., dkk., Pemurnian virus demam kuning yang diproduksi dalam sel Vero untuk pembuatan vaksin inaktif. Vaccine, 2019. 37(24): hlm. 3214–3220.
3. Aliyu-Amoo, H., dkk., Efek antiproliferatif ekstrak dan fraksi akar Terminalia avicennioides (Combretaceae) Guill dan Perr. pada garis sel HepG2 dan Vero. Clinical Phytoscience, 2021, 7(1): hlm. 1–7.
4. Yao, P., dkk., Isolasi dan karakteristik pertumbuhan SARS-CoV-2 pada sel Vero. Virologica Sinica, 2020. 35(3): hlm. 348–350.
5. Park, B.K., dkk., Perbedaan pensinyalan dan produksi virus pada sel Calu-3 dan sel Vero setelah terinfeksi SARS-CoV-2. Biomolecules & Therapeutics, 2021. 29(3): hlm. 273.