Sel NCI-H1299: Penelitian dan Implikasi Klinis Sel Kanker Paru-Paru NCI-H1299

Informasi tentang kultur sel

Memelihara kultur garis sel bukanlah hal yang mudah sebelum Anda mengetahui semua informasi penting mengenai hal tersebut, termasuk: Berapa waktu penggandaan NCI-H1299? Berapa kepadatan penaburan NCI-H1299? Apa itu media sel NCI-H1299? Bagaimana cara membiakkan garis sel NCI-H1299? Bagian ini akan membantu Anda mempelajari jawaban atas semua pertanyaan tersebut mengenai pembiakan sel NCI-H1299.

Poin-Poin Penting dalam Pembiakan Sel NCI-H1299

Waktu Penggandaan:

Waktu penggandaan NCI-H1299 berkisar antara 22–30 jam.

Sel yang Melekat atau dalam Suspensi:

NCI-H1299 adalah garis sel yang melekat.

Rasio Subkultur:

Sel NCI-H1299 disubkultur dengan rasio yang direkomendasikan antara 1:3 hingga 1:6. Untuk penanaman, sel yang melekat dicuci dengan 1x PBS dan diinkubasi dengan larutan Accutase selama 8 hingga 10 menit pada suhu kamar. Sel yang terlepas ditambahkan ke media kultur baru dan disentrifugasi. Endapan sel kemudian disuspensi kembali, dan sel-sel tersebut dituangkan ke dalam labu baru yang berisi media pertumbuhan.

Media Pertumbuhan:

RPM1 1640 merupakan media sel NCI-H1299 yang ideal. Media ini ditambahkan dengan 10% serum sapi janin, 4500 mg/L glukosa, 2,0 mM L-glutamin, 1 mM natrium piruvat, 1500 mg/L NaHCO₃, dan 10 mM HEPES. Media harus diganti setiap 2 hingga 3 kali seminggu.

Kondisi Pertumbuhan:

Kultur sel kanker paru-paru NCI-H1299 dipelihara dalam inkubator yang dilembabkan pada suhu 37°C dengan pasokan CO₂ sebesar 5%.

Penyimpanan:

Garis sel NCI-H1299 dapat disimpan dalam fase uap nitrogen cair atau dalam freezer suhu sangat rendah pada suhu di bawah -150°C untuk jangka panjang.

Proses Pembekuan dan Media:

CM-1 atau CM-ACF adalah media pembekuan sel NCI-H1299. Sel dibekukan menggunakan proses pembekuan lambat yang hanya memungkinkan penurunan suhu sebesar 1 derajat per menit untuk melindungi viabilitas sel.

Proses Pencairan:

Sel NCI-H1299 yang beku diaduk dengan cepat dalam bak air yang telah dipanaskan hingga 37 derajat Celcius selama 40 hingga 60 detik hingga hanya tersisa sepotong kecil es. Sel yang telah dicairkan ditambahkan ke media segar dan dapat langsung dikultur dalam labu baru atau disentrifugasi. Dalam kasus pertama, media harus diganti setelah 24 jam inkubasi. Sentrifugasi membantu menghilangkan unsur-unsur media pembekuan. Setelah itu, sel yang telah dipanen disuspensi kembali dalam media segar dan ditempatkan ke dalam labu baru untuk dikultur.

Tingkat Keamanan Biologis:

Laboratorium dengan tingkat keamanan biologis 1 diperlukan untuk menangani kultur sel NCI-H1299.

Beli Garis Sel NCI-H1299: Alat Penelitian Berkualitas Tinggi untuk Meneliti Biologi Kanker Paru-Paru

Kelebihan dan kekurangan sel NCI-H1299

Seperti garis sel kanker manusia lainnya, NCI-H1299 juga memiliki beberapa karakteristik yang dapat dibedakan yang terkait dengan kelebihan dan kekurangan tertentu. Di sini, kami telah merangkum beberapa di antaranya yang signifikan.

Keunggulan

Keunggulan utama dari garis sel kanker paru-paru non-sel kecil NCI-H1299 adalah:

• Model kanker paru-paru in vitro

  Garis sel NCI-H1299 dikembangkan dari metastasis kelenjar getah bening karsinoma paru-paru dan oleh karena itu memiliki sifat yang relatif serupa. Oleh karena itu, sel-sel ini dapat berfungsi sebagai model in vitro untuk menyelidiki biologi kanker paru-paru, mekanisme seluler dan molekuler, serta menyaring dan menguji terapi potensial.

• Mudah dibudidayakan

  Sel NCI-H1299 mudah dibudidayakan dan dipelihara di laboratorium penelitian. Tidak ada persyaratan dan prosedur kultur sel yang rumit.

• Mutasi p53 dan KRAS pada NCI-H1299

  Sel NCI-H1299 tidak mengekspresikan gen p53, yang memungkinkan sel-sel tersebut berkembang biak dengan sangat cepat. Selain itu, sel-sel ini memiliki mutasi KRAS yang berkontribusi terhadap pertumbuhan, proliferasi, invasi, dan migrasi sel. Dengan mempertimbangkan hal-hal tersebut, para peneliti menggunakan sel H1299 untuk menyelidiki mekanisme molekuler yang berkaitan dengan mutasi KRAS dan P53.

Kekurangan

Kekurangan sel NCI-H1299 adalah:

• Kekhususan jaringan

  NCI-H1299 berasal dari jaringan paru-paru. Oleh karena itu, penerapannya sebagian besar terbatas pada penelitian karsinoma paru-paru. Sel ini mungkin tidak sepenuhnya mewakili heterogenitas dan karakteristik umum jenis kanker lainnya.

Aplikasi penelitian sel NCI-H1299

Garis sel NCI-H1299 banyak digunakan dalam penelitian kanker paru-paru. Beberapa aplikasi yang menjanjikan dari garis sel ini disebutkan di sini.

• Biologi kanker: Sel NCI-H1299 berfungsi sebagai alat penelitian yang sangat baik untuk menyelidiki perkembangan kanker, progresinya, serta mekanisme seluler dan molekuler yang terkait. Sel-sel ini memiliki mutasi tertentu, sehingga memungkinkan para peneliti untuk mengeksplorasi perilaku sel kanker yang terkait, jalur pensinyalan, dan profil ekspresi gen. Beberapa penelitian telah menggunakan garis sel karsinoma paru-paru sel non-kecil NCI-H1299 untuk mempelajari biologi kanker paru-paru. Sebagai contoh, sebuah penelitian yang dilakukan pada tahun 2018 menyelidiki jalur sinyal yang terlibat dalam apoptosis sel kanker paru-paru menggunakan sel NCI-H1299. Para peneliti menemukan bahwa jalur PI3K/AKT berkontribusi terhadap proliferasi sel, dan penghambatannya dapat menyebabkan kematian sel kanker [1]. Demikian pula, penelitian lain menyelidiki mekanisme yang terlibat dalam transisi epitel-ke-mesenkim (EMT) pada NCI-H1299. Studi ini mengusulkan bahwa protein ekstraseluler SPARC (protein yang disekresikan, bersifat asam, dan kaya sistein) berkontribusi terhadap EMT dan migrasi NCI-H1299, sehingga mendorong tumorigenesis pada sel—protein SPARC bertindak sebagai mediator sinyal TGF-β1 [2]. 

• Penemuan dan penyaringan obat: NCI-H1299, sebuah garis sel kanker paru-paru manusia, secara luas digunakan untuk menilai toksisitas dan kemanjuran obat potensial. Selain itu, garis sel ini digunakan oleh para peneliti untuk menyelidiki mekanisme kerja obat antitumor. Berbagai penelitian juga telah menggunakan sel-sel ini untuk mengidentifikasi target obat yang potensial serta mekanisme resistensi. Sebagai contoh, penelitian yang dilakukan oleh Xiao-Yun Shen dan rekan-rekannya menyelidiki potensi antikanker dari senyawa alami bruceine D (BD). Temuan tersebut mengungkapkan bahwa BD secara signifikan menghambat proliferasi, invasi, dan migrasi sel NCI-H1299. Oleh karena itu, senyawa ini dapat dianggap sebagai terapi adjuvan potensial untuk mengobati karsinoma paru-paru sel non-kecil [3]. Demikian pula, sebuah studi mengevaluasi efek sitotoksik xanthohumol baik secara tunggal maupun dalam kombinasi dengan obat kemoterapi cisplatin pada sel kanker paru-paru NCI-H1299 [4].

Pertanyaan yang Sering Diajukan tentang Garis Sel NCI-H1299

Daftar Pustaka

1. Gu, J., dkk., Studi tentang apoptosis yang diinduksi EGCG pada sel kanker paru-paru melalui penghambatan jalur sinyal PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): hlm. 4557-4563.
2. Sun, W., dkk., SPARC berperan sebagai mediator TGF-β1 dalam mendorong transisi epitel-ke-mesenkim pada sel kanker paru-paru A549 dan H1299. Biofactors, 2018. 44(5): hlm. 453-464.
3. Shen, X.-Y., dkk., Studi mengenai mekanisme kerja bruceine D dalam pengobatan sel kanker paru-paru non-sel kecil H1299. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): hlm. 500.
4. Long, B., dkk., Efek Sitotoksik Xanthohumol dan Kombinasi dengan Cisplatin pada Sel Kanker Paru-Paru Metastatik Manusia H1299. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): hlm. 1-15.