Garis Sel INS-1

INS-1 adalah garis sel insulinoma tikus yang telah dikarakterisasi dengan baik dan banyak digunakan dalam penelitian diabetes. Sel INS-1 mengeluarkan insulin saat dirangsang oleh glukosa; oleh karena itu, sel-sel ini digunakan untuk mempelajari metabolisme glukosa, fisiologi sel beta, dan regulasi sekresi insulin. Selain itu, sel-sel ini juga dimanfaatkan dalam penyaringan, pengujian, dan pengembangan terapi potensial untuk diabetes mellitus.

Karakteristik umum dan asal-usul sel INS-1

Mengetahui ciri-ciri umum dan asal-usul suatu garis sel dapat sangat membantu Anda menggunakannya secara efisien dan efektif dalam penelitian Anda. Bagian artikel ini akan memberi Anda informasi mengenai asal-usul dan ciri-ciri umum INS-1. Anda akan mengetahui: Apa itu garis sel Insulinoma tikus INS-1? Apa saja karakteristik umum INS-1? Apa itu garis sel INS-1 832/3? Apa itu INS-1E?

• Sel INS-1 awalnya diisolasi dari tikus berusia 666 hari yang menderita insulinoma yang dapat ditransplantasikan akibat paparan sinar-X.
• Sel INS-1 bersifat bi-hormonal. Sel-sel ini secara bersamaan mengekspresikan protein insulin dan proglukagon. Sel-sel ini dianggap belum matang karena menunjukkan tingkat ekspresi faktor transkripsi Nkx6.1 yang rendah dan tidak memiliki penanda sel alfa [1].
• Terdapat dua subklon sel INS-1, yaitu INS-1E dan INS-1 832/3.
• INS-1E berbeda dari garis sel induk INS-1 dalam hal respons sekresi terhadap glukosa dan kadar insulin.
• INS-1 832/3 atau INS-1 832/13 juga merupakan subklon dari garis sel INS-1. Sel ini merupakan model yang sangat berharga untuk mempelajari fungsi sel beta pulau pankreas dan regulasi sekresi insulin. Sel ini juga berbeda dari sel induk INS-1 dalam konteks sekresi insulin yang dirangsang glukosa (GSIS).

Garis sel INS-1: Informasi tentang kultur sel

Untuk menangani dan memelihara garis sel secara efisien, Anda harus mengetahui informasi kultur berikut ini. Bagian artikel ini akan membahas semua poin penting terkait kultur sel INS-1. Anda akan mempelajari: Bagaimana cara mengkultur sel beta INS-1? Apa itu protokol kultur sel INS-1? Berapa waktu penggandaan sel INS-1? Apa itu media kultur sel insulinoma tikus INS-1?

Poin-Poin Penting dalam Pembiakan Sel INS-1

Waktu Penggandaan:

Waktu penggandaan populasi sel INS-1 adalah sekitar 44 jam.

Menempel atau dalam Suspensi:

Sel INS-1 dapat tumbuh baik dalam bentuk suspensi maupun melekat.

Rasio Subkultur:

Sel INS-1 disubkultur dengan rasio pemisahan 1:3. Secara singkat, sel yang berada dalam suspensi dikumpulkan. Sel yang melekat dibilas dengan PBS dan diinkubasi dengan larutan Accutase. Setelah terlepas, sel-sel tersebut ditambahkan ke media segar. Selanjutnya, baik sel suspensi maupun sel yang melekat disentrifugasi dan dikumpulkan. Sel-sel tersebut disuspensi kembali dengan hati-hati dan ditempatkan ke dalam labu baru untuk pertumbuhan.

Media Pertumbuhan:

RPM1 1640 digunakan untuk membiakkan garis sel insulinoma tikus INS-1. Media ini ditambah dengan 10% serum janin sapi yang diinaktivasi dengan panas, 2,1 mM glutamin stabil, 10 mM HEPES, 2,0 g/L NaHCO3, dan 1 mM natrium piruvat.

Kondisi Pertumbuhan:

Sel INS-1 disimpan dalam inkubator yang dilembabkan dengan suhu 37°C dan pasokan CO₂ 5% secara terus-menerus.

Penyimpanan:

Sel beta INS-1 dapat disimpan dalam fase uap nitrogen cair atau pada suhu di bawah -150°C dalam freezer listrik untuk jangka panjang.

Proses Pembekuan dan Media:

Media CM-1 atau CM-ACF digunakan untuk membekukan sel INS-1 melalui proses pembekuan lambat. Proses ini membatasi penurunan suhu hanya sebesar 1°C per menit guna menjaga kelangsungan hidup sel.

Proses Pencairan:

Sel INS-1 yang dibekukan dicairkan dalam penangas air yang telah diatur pada suhu 37 derajat Celcius selama 40 hingga 60 detik. Setelah dicairkan, sel ditambahkan dengan media baru dan langsung dituangkan ke dalam labu baru untuk pertumbuhan. Setelah 24 jam, media diganti untuk menghilangkan komponen media pembekuan.

Tingkat Keamanan Biologis:

Laboratorium dengan tingkat keamanan biologis 1 diperlukan untuk membiakkan sel insulinoma tikus INS-1.

Keunggulan & Kelemahan garis sel INS-1

Seperti garis sel lainnya, INS-1 juga memiliki beberapa ciri khas yang terkait dengan kelebihan dan kekurangannya. Di sini, kami telah menyebutkan beberapa di antaranya yang signifikan.

Keuntungan

Keuntungan utama dari garis sel INS-1 adalah:

• Terkarakterisasi dengan baik

  INS-1 adalah garis sel yang telah mapan dan terkarakterisasi dengan baik. Garis sel ini telah digunakan dalam berbagai penelitian. Garis sel ini mempertahankan karakteristik fenotipik dan kapasitas sekresi insulinnya dalam jangka waktu yang lebih lama, sehingga memberikan hasil eksperimen yang andal dan konsisten.

• Model sel beta

  Sel INS-1 digunakan untuk mempelajari fungsi sel beta pulau pankreas karena sel-sel ini mensekresikan insulin dan responsif terhadap fluktuasi kadar glukosa.

 Kekurangan

Kekurangan sel INS-1 adalah:

• Berasal dari non-manusia

  Sel beta INS-1 berasal dari sumber non-manusia. Sel-sel ini berasal dari insulinoma tikus. Hal ini dapat menyebabkan perbedaan spesifik antarspesies dan membatasi penerapan langsung hasil eksperimen ke fisiologi manusia.

 4. Aplikasi penelitian sel insulinoma tikus INS-1

Sel beta INS-1 banyak digunakan dalam penelitian diabetes. Beberapa aplikasi yang menjanjikan dari lini sel ini disebutkan di sini.

• Studi sekresi insulin: Sel INS-1 memiliki kemampuan sekresi insulin dan oleh karena itu banyak digunakan untuk mempelajari mekanisme seluler yang mendasari sekresi insulin. Para peneliti menyelidiki faktor-faktor penting yang terlibat dalam pelepasan insulin, termasuk metabolisme glukosa, jalur pensinyalan, hormon, dan agen farmakologis. Sebuah studi menemukan bahwa jalur yang bergantung pada kanal ion K + ATP mengatur sekresi insulin pada sel beta INS-1 [2]. Selain itu, penelitian juga mengungkapkan bahwa jalur GLP-1R dan AKT/PDX1 turut berperan dalam sekresi insulin pada sel insulinoma tikus INS-1 [3].
• Studi fungsi sel beta: Sel INS-1 memiliki karakteristik mirip sel beta pulau pankreas, seperti respons terhadap metabolisme glukosa dan sekresi insulin. Oleh karena itu, sel-sel ini digunakan untuk mempelajari proses fisiologis dan fungsi sel beta. Sebuah studi yang dilakukan pada tahun 2022 memanfaatkan sel INS-1 dan mengembangkan model disfungsi sel beta melalui H_₂O_₂. Mereka meneliti viabilitas sel, sekresi insulin, dan penanda terkait stres oksidatif pada sel-sel ini sebagai respons terhadap perlakuan senyawa alami [4].
• Penemuan dan pengembangan obat: Sel insulinoma tikus INS-1 banyak digunakan untuk menyaring dan menguji senyawa atau obat antidiabetes. Sel-sel ini dapat digunakan untuk mempelajari efek potensial agen terapeutik terhadap sekresi insulin dan parameter relevan lainnya. Sebuah penelitian menemukan bahwa loganin, salah satu komponen ramuan herbal Tiongkok, melindungi fungsi sekresi insulin sel INS-1 dan menunjukkan efek antidiabetes yang potensial. Komponen tersebut memediasi efek menguntungkan ini dengan menghambat translokasi nuklir gen FOXO1 melalui jalur PI3K/AKT [5]. 

5. Publikasi penelitian yang menampilkan sel beta INS-1

Berikut ini adalah beberapa publikasi penelitian penting yang menampilkan garis sel insulinoma tikus INS-1.

Alpha-mangostin meningkatkan sekresi insulin dan melindungi sel INS-1 dari kerusakan yang disebabkan oleh streptozotocin

Penelitian ini diterbitkan dalam jurnal *International Journal of Molecular Sciences* pada tahun 2018. Penelitian tersebut mengusulkan bahwa senyawa alami kristal kuning, alfa-mangostin, meningkatkan sekresi insulin pada sel beta INS-1 dan melindunginya dari kerusakan yang diinduksi oleh streptozotocin, racun sel beta.

Peningkatan sekresi insulin yang dirangsang glukosa oleh epikatekin pada sel INS-1 tidak bergantung pada aktivitas antioksidannya

Penelitian ini diterbitkan dalam *Acta Pharmacologica Sinica* pada tahun 2018. Temuan penelitian tersebut mengungkapkan bahwa senyawa epicatechin meningkatkan sekresi insulin yang dirangsang glukosa pada sel beta INS-1 yang terganggu oleh asam lemak jenuh melalui aktivasi jalur CaMKII.

Glikosida Feniletanoid yang Baru Ditemukan dari Stevia rebaudiana Bertoni Mempengaruhi Sekresi Insulin pada Sel β Pulau Langerhans INS-1 Tikus

Artikel dalam jurnal *Molecules* (2019) ini mengusulkan bahwa senyawa alami baru, glikosida feniletanoid, memengaruhi sekresi insulin pada sel insulinoma INS-1 tikus, dan karenanya memiliki potensi antidiabetes.

Loureirin B meningkatkan sekresi insulin melalui jalur GLP-1R dan AKT/PDX1

Penelitian ini diterbitkan dalam jurnal *European Journal of Pharmacology* (2022). Studi tersebut mengusulkan bahwa Loureirin B, suatu produk alami, meningkatkan sekresi insulin pada sel β pulau pankreas INS-1 melalui modulasi jalur AKT/PDX1 dan GLP-1R.

Aktivitas antikanker in vitro Withania coagulans terhadap sel kanker HeLa, MCF-7, RD, RG2, dan INS-1 serta analisis fitokimia

Artikel dalam jurnal Integrative Medicine Research (2018) ini mengevaluasi potensi antikanker ekstrak Withania coagulans menggunakan sel kanker INS-1.

Sumber Daya untuk Garis Sel INS-1: Protokol, Video, dan Lainnya

Berikut adalah beberapa sumber daya daring yang menampilkan sel INS-1:

• Subkultur sel suspensi: Video ini merupakan panduan komprehensif untuk subkultur sel yang tumbuh dalam kultur suspensi.
• Subkultur sel adheren: Video ini akan membantu Anda mempelajari protokol umum untuk pemindahan sel adheren.

Tautan berikut berisi protokol kultur sel INS-1:

• Garis sel INS-1: Situs web ini berisi semua informasi mengenai kultur sel INS-1. Termasuk di dalamnya adalah informasi mengenai media kultur dan pembekuan sel INS-1, protokol untuk subkultur, serta penanganan kultur sel INS-1 yang diawetkan secara kriogenik dan yang sedang berkembang biak.

Referensi

1. Acosta-Montalvo, A., dkk., Ekspresi dan Sekresi Peptida Turunan Proglukagon pada Sel Insulinoma Tikus INS-1. Front Cell Dev Biol, 2020. 8: hlm. 590763.
2. Park, J.E. dan J.S. Han, Ekstrak Portulaca oleracea L. mendorong sekresi insulin melalui jalur yang bergantung pada kanal K+ ATP pada sel β pankreas INS-1. Nutrition Research and Practice, 2018. 12(3): hlm. 183.
3. Fang, H., dkk., Loureirin B meningkatkan sekresi insulin melalui jalur GLP-1R dan AKT/PDX1. European Journal of Pharmacology, 2022. 936: hlm. 175377.
4. Duan, J., dkk., Swietenine dan swietenolide dari Swietenia macrophylla king meningkatkan sekresi insulin dan mengurangi apoptosis pada sel INS-1 yang diinduksi H₂O₂. Environmental Toxicology, 2022. 37(11): hlm. 2780-2792.
5. Mo, F.-F., dkk., Efek antidiabetes loganin dengan menghambat translokasi nuklir FOXO1 melalui jalur pensinyalan PI3K/Akt pada sel INS-1. Iranian Journal of Basic Medical Sciences, 2019. 22(3): hlm. 262.