Diterbitkan: 17 Oktober 2023 | Terakhir ditinjau: Mei 2026
Sel A431: Asal Usul, Kondisi Kultur, dan Aplikasi Penelitian
A431 adalah garis sel karsinoma epidermoid manusia yang berasal dari kulit seorang pasien wanita berusia 85 tahun. Ini adalah salah satu garis sel yang paling banyak digunakan dalam penelitian biomedis, terutama dalam biologi kanker, imuno-onkologi, dermatologi, dan penemuan obat. Sel A431 secara masif mengekspresikan reseptor faktor pertumbuhan epidermal (EGFR) — dengan sekitar 2–3 juta reseptor per sel, kira-kira 20–50 kali lebih banyak daripada sel epitel normal — menjadikannya model in vitro standar emas untuk studi pensinyalan EGFR dan pengujian terapi yang ditargetkan EGFR seperti cetuximab dan erlotinib. Sel A431 tersedia secara eksklusif dari Cytion, bank sel independen Eropa Anda.
- Spesies / Asal
Manusia (perempuan, 85 tahun) - Jaringan
Epidermis kulit (karsinoma epidermoid) - Morfologi
Epitelial, melekat - Waktu Perduplikan
80–100 jam - Media Pertumbuhan
DMEM + 10% FBS - Tingkat Keamanan Biologis
BSL-1 - Fitur Utama
Ekspresi berlebih EGFR (~2–3 juta reseptor/sel) - Penanda Biologis Utama
EGFR (teramplifikasi), TP53 (mutasi), KRAS (tipe liar), PTEN (diekspresikan) - Nomor Produk
300112 — Pesan Sel A431 dari Cytion
Sel A431: Karakteristik umum dan asal-usul
Bagian ini membahas sifat-sifat biologis utama dari garis sel A431 — termasuk asal-usulnya, morfologi, kariotipe, dan ekspresi berlebih EGFR yang membuatnya sangat berharga untuk penelitian.
Asal Usul dan Sejarah Garis Sel A431
- A431, sebuah garis sel kanker kulit manusia, diperoleh dari epidermis seorang pasien perempuan berusia 85 tahun yang menderita karsinoma epidermoid [1]. Garis sel ini dikembangkan oleh D.J. Giard dkk., yang juga mengembangkan beberapa garis sel lain dari tumor padat.
- Baris sel ini telah didistribusikan secara luas dan divalidasi oleh bank sel independen di seluruh dunia, termasuk Cytion, sebagai model penelitian yang andal dan dapat direproduksi.
Morfologi dan Kariotipe A431
- Sel A-431 memiliki morfologi epitel. Sel-sel ini beragregasi dan membentuk kelompok sel dalam kondisi kultur standar.
- Garis sel kanker kulit A431 bersifat hipertriploid. Jumlah kromosom modal adalah 74, yang terjadi pada sekitar 36% sel. Ploidi yang lebih tinggi juga terdapat pada sekitar 1% populasi sel.
Ekspresi EGFR pada Sel A431
Ekspresi berlebih EGFR merupakan karakteristik utama sel A431 dan alasan utama penggunaannya yang luas. Sel A431 membawa amplifikasi genomik dari lokus gen EGFR, yang menghasilkan sekitar 2–3 juta reseptor EGFR per sel — 20 hingga 50 kali lebih tinggi daripada sel epitel normal. Hal ini menjadikan A431 sebagai kontrol positif standar emas untuk:
- Validasi antibodi EGFR melalui Western blot, sitometri aliran, dan imunofluoresensi
- Pengujian antibodi monoklonal yang ditargetkan pada EGFR seperti cetuximab dan panitumumab
- Evaluasi inhibitor tirosin kinase (TKI) EGFR seperti erlotinib, gefitinib, dan afatinib
- Studi jalur sinyal hilir termasuk PI3K/AKT/mTOR dan RAS/MAPK/ERK
Baris sel A431: Informasi pemeliharaan
Mengetahui persyaratan kultur suatu garis sel akan memudahkan penanganan. Bagian ini membahas waktu penggandaan, media pertumbuhan, pemindahan kultur, kriopreservasi, dan persyaratan keamanan biologis untuk garis sel A431.
Poin-Poin Penting dalam Pembiakan Sel A431
Waktu Perduplikan:
Waktu penggandaan populasi sel A431 berkisar antara 80 hingga 100 jam.
Menempel atau dalam Suspensi:
A431 adalah garis sel yang melekat.
Kepadatan Penaburan:
1 x 10⁴ sel/cm² adalah kepadatan ideal untuk garis sel A431. Sel mencapai konfluensi dalam waktu sekitar 4 hari pada kepadatan ini. Sel yang melekat dicuci dengan PBS (1×) dan diinkubasi dengan larutan passaging Accutase, kemudian disuspensi kembali dalam media kultur, disentrifugasi, dan dipindahkan ke labu baru.
Media Pertumbuhan:
Media DMEM yang ditambah dengan 10% serum sapi janin (FBS), 4,5 g/L glukosa, 1,0 mM natrium piruvat, 1,5 g/L NaHCO3, dan 4 mM L-glutamin. Media harus diganti setiap 2–3 hari.
Kondisi Pertumbuhan:
Sel kanker A431 ditumbuhkan dalam inkubator yang dilembabkan dengan 5% CO₂ pada suhu 37°C.
Penyimpanan:
Simpan dalam freezer listrik atau fase uap nitrogen cair pada suhu di bawah −150°C untuk menjaga viabilitas sel.
Proses Pembekuan dan Media:
CM-1 atau CM-ACF adalah media pembekuan yang direkomendasikan untuk sel A431. Gunakan metode pembekuan lambat dengan laju terkontrol (−1°C/menit).
Proses Pencairan:
Cairkan sel A431 yang beku dengan cepat dalam penangas air bersuhu 37°C (40–60 detik). Jika masih ada gumpalan es kecil yang tersisa, tambahkan media kultur dan sentrifugasi. Resuspensi sel yang telah dipanen dan pindahkan ke labu kultur.
Tingkat Keamanan Biologis:
Tingkat Keamanan Biologis 1 (BSL-1) direkomendasikan untuk penanganan kultur A431.
Kelebihan dan kekurangan garis sel A431
Baris sel A431 memiliki karakteristik yang khas yang membuatnya sangat berguna sekaligus memiliki keterbatasan dalam konteks tertentu. Berikut adalah ringkasan yang seimbang.
Keuntungan
Keuntungan utama dari garis sel kanker A431 adalah:
Ekspresi berlebih EGFR
Sel A431 mengalami ekspresi berlebih EGFR sebesar 2–3 juta reseptor per sel, yang berfungsi sebagai kontrol positif standar emas untuk studi pensinyalan EGFR dan validasi obat anti-EGFR (cetuximab, erlotinib, gefitinib).
Kemampuan menumbuhkan tumor
Sel A431 bersifat tumorigenik dan dengan mudah membentuk tumor pada tikus dengan sistem kekebalan yang terganggu, menjadikannya alat yang andal untuk model kanker xenograft guna mempelajari dinamika pertumbuhan tumor dan mengevaluasi pengobatan kanker baru secara in vivo.
Terkarakterisasi dengan baik
Berkat penelitian yang telah dipublikasikan selama beberapa dekade, sel A431 telah dikarakterisasi secara ekstensif pada tingkat genomik, proteomik, dan fenotipik, sehingga memberikan landasan ilmiah yang kuat untuk rancangan eksperimental.
Pembentukan spheroid 3D
Sel A431 dengan mudah membentuk spheroid 3D yang padat dalam kondisi ultra-low attachment, sehingga cocok digunakan pada platform skrining organoid dan spheroid modern untuk studi penetrasi dan efektivitas obat.
Kekurangan
Kekurangan sel A431 adalah:
Kelainan genetik
A431 adalah garis sel kanker dengan mutasi genetik dan perubahan kromosom yang terakumulasi (hipertriploid, jumlah modal 74) yang mungkin tidak sepenuhnya mereplikasi karakteristik tumor aslinya.
Risiko kontaminasi mikroba
A431 rentan terhadap kontaminasi bakteri. Menjaga teknik aseptik yang ketat dan melakukan pengujian mikoplasma secara rutin sangat penting untuk mendapatkan hasil yang dapat diandalkan.
Tidak mewakili semua tumor EGFR
Karena ekspresi EGFR pada A431 didorong oleh amplifikasi gen daripada mutasi (seperti pada kanker paru-paru), temuan mungkin tidak dapat langsung diterapkan pada konteks tumor dengan mutasi EGFR seperti kanker paru-paru sel non-kecil (NSCLC).
Aplikasi penelitian sel A431
Baris sel A431 digunakan secara luas di berbagai disiplin ilmu penelitian. Biologi EGFR yang unik, kemampuan tumorigenik, dan genom yang telah teridentifikasi dengan baik menjadikannya salah satu baris sel kanker manusia yang paling serbaguna yang tersedia.
- Biologi kanker: A431 merupakan alat yang ampuh untuk menyelidiki mekanisme seluler dan molekuler yang mendorong pertumbuhan, metastasis, dan invasi kanker. Berbagai penelitian telah memetakan sinyal PI3K/AKT/mTOR dan RAS/MAPK/ERK dalam garis sel ini, dengan penghambatan yang terbukti menginduksi apoptosis pada sel tumor kulit A431 [2, 3].
- Pengujian terapi yang menargetkan EGFR: Sel A431 merupakan standar referensi untuk mengevaluasi terapi anti-EGFR — antibodi monoklonal (cetuximab, panitumumab) dan TKI molekul kecil (erlotinib, gefitinib, afatinib, osimertinib).
- Pengujian dan evaluasi obat: Sel A431 digunakan untuk mengevaluasi kandidat obat antikanker baru. Sebuah studi tahun 2022 oleh Rahim dkk. menunjukkan efek antiproliferatif yang kuat dari nanopartikel perak yang disintesis secara biogenik dari Alstonia angustiloba pada sel A431 [4].
- Model xenograft tumor: Sel A431 bersifat tumorigenik pada tikus dengan defisiensi imun, sehingga memungkinkan model xenograft subkutan dan ortotopik untuk studi kemanjuran in vivo. Lim dkk. menggunakan xenograft yang berasal dari A431 untuk mengevaluasi efek radiosensitisasi EGF eksogen in vivo [5].
- Toksisitas kulit dan penelitian dermatologi: Sel A431 banyak digunakan oleh perusahaan farmasi dan kosmetik untuk menilai toksisitas dermal, penetrasi kulit, dan profil keamanan senyawa yang diaplikasikan secara topikal.
- Model spheroid dan organoid 3D: Sel A431 membentuk spheroid 3D yang padat dalam kondisi ultra-low attachment atau hanging-drop, sehingga memungkinkan studi penetrasi obat dan resistensi yang lebih relevan secara fisiologis.
- Validasi antibodi EGFR: Karena kepadatan EGFR-nya yang sangat tinggi, sel A431 menjadi kontrol positif standar untuk memvalidasi antibodi anti-EGFR dalam Western blot, imunofluoresensi, IHC, dan sitometri aliran.
A431 vs. garis sel kanker kulit lainnya
Memilih garis sel yang tepat sangat penting untuk validitas eksperimental. Berikut adalah perbandingan A431 dengan garis sel kanker kulit dan skuamosa lain yang umum digunakan:
| Fitur | A431 | A375 (Melanoma) | SCC-25 (Karsinoma Sel Skuamosa Mulut) | HaCaT (Keratinosit) |
|---|---|---|---|---|
| Jenis kanker | Karsinoma epidermoid | Melanoma ganas | Karsinoma sel skuamosa mulut | Keratinosit yang diimortalkan |
| Ekspresi EGFR | +++ (~2–3 juta/sel) | + (rendah) | ++ (sedang) | ++ (sedang) |
| Kemampuan menyebabkan tumor | Ya | Ya | Ya | Tidak |
| Morfologi | Epitelial, melekat | Berbentuk spindel, melekat | Epitel, melekat | Epitel, melekat |
| BSL | 1 | 1 | 1 | 1 |
| Penggunaan utama | Penelitian EGFR, pengujian obat antikanker | Biologi melanoma, penghambat BRAF | Kanker kepala dan leher, studi radiasi | Biologi kulit, fungsi penghalang |
Publikasi Penelitian yang Menampilkan Sel A431
Berikut adalah beberapa publikasi terkemuka yang telah direview oleh rekan sejawat yang menampilkan garis sel karsinoma kulit A431.
Diterbitkan dalam Materials Today Communications (2020). Mengevaluasi potensi antikanker serat nano yang dimuat kurkumin polie-ε-kaprolakton dan polivinil alkohol-AuNPs terhadap sel kanker A431.
miRNA-221 mendorong perkembangan karsinoma sel skuamosa kulit dengan menargetkan PTEN
Diterbitkan dalam Cellular & Molecular Biology Letters (2019). Mengusulkan bahwa microRNA-221 memainkan peran onkogenik dalam karsinoma sel skuamosa kulit dengan menargetkan gen penekan tumor PTEN.
Diterbitkan dalam BMC Complementary Medicine and Therapies (2016). Menunjukkan bahwa vincristine dari jamur Eutypella spp–CrP14 menginduksi apoptosis pada sel A431.
Ekspresi berlebih CDC42SE1 pada sel A431 mengurangi proliferasi sel dengan menghambat jalur Akt
Diterbitkan dalam Cells (2019). Mengidentifikasi CDC42SE1 sebagai biomarker potensial perkembangan kanker kulit, dengan penurunan regulasinya memfasilitasi tumorigenesis pada sel A431.
Metformin menghambat proliferasi sel A431 dengan memodulasi jalur sinyal PI3K/Akt
Diterbitkan dalam Experimental and Therapeutic Medicine (2015). Menunjukkan bahwa metformin menekan proliferasi A431 dengan mengatur jalur sinyal PI3K/Akt.
Sumber Daya untuk Garis Sel A431: Protokol, Video, dan Lainnya
Sumber daya berikut ini memberikan panduan praktis untuk bekerja dengan sel A431 di laboratorium.
- Transfeksi sel A-431 — Panduan video langkah demi langkah untuk melakukan transfeksi sel kanker A431.
- Garis sel kanker A431 — Halaman produk Cytion — Informasi lengkap tentang kultur sel: media pertumbuhan, kepadatan penyemaian, pemindahan, kriopreservasi, dan sertifikat kualitas.
- Protokol kultur sel A431 — Protokol eksternal ringkas untuk kultur garis sel A431 dari Bio-Protocol.
- Telusuri semua garis sel kanker kulit dari Cytion — Jelajahi rangkaian lengkap garis sel kanker kulit yang tersedia dari Cytion.