Neuro-2a sejtvonal
ANeuro-2a egy egér-alapú neurális sejtvonal, amelyet széles körben használnak az idegtudományi kutatásokban. Ezeket a sejteket főként az idegi fejlődés, differenciálódás, neurotoxicitás, sejtjelátviteli útvonalak és az axonális növekedés tanulmányozására használják. Emellett gyógyszerfejlesztési és szűrési célokra is használják őket.
Ez a cikk a Neuro-2a neuroblasztóma sejtekkel kapcsolatos fontos szempontokra összpontosít, amelyek segítséget nyújthatnak a vele való munka megkezdése előtt. Elsősorban a következőkre tér ki:
- A Neuro-2a sejtek általános jellemzői és eredete
- A Neuro-2a sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
- A Neuro-2a sejtvonal előnyei és hátrányai
- A Neuro-2a sejtvonal kutatási alkalmazásai
- Neuro-2a sejteket tartalmazó kutatási publikációk
- A Neuro-2a sejtekkel kapcsolatos források: Jegyzőkönyvek, videók és még sok más: protokollok, videók és egyéb
1. A Neuro-2a sejtek általános jellemzői és eredete
A cikk ezen része a Neuro-2a sejtvonal hátterével és alapvető jellemzőivel foglalkozik, amelyeket feltétlenül ismernie kell, mielőtt vele dolgozna. Itt megtudhatja: Mi az a Neuro-2a sejtvonal? Mi a Neuro-2a sejtvonal eredete? Mi a Neuro-2a sejtvonal differenciálása? Mekkora a Neuro-2a sejtek mérete? Milyen a Neuro-2a sejtek morfológiája?
- A Neuro-2a sejtek egy albínó egér (A törzs) spontán tumorából (neuroblastoma) származnak. A sejtvonalat R.J. Klebe és F.H. Ruddle hozta létre.
- A Neuro-2a neuroblastoma sejtek neuronális és amőboid őssejt morfológiát mutatnak.
- A Neuro-2a sejtek mérete 12 mikrométer magas [1].
- A Neuro-2a sejtek kromoszómaszáma 59 és 193 között mozoghat, a kromoszómaszám modális értéke 95. Ezeknek a neuroblastóma sejteknek a kariotípusa a 94 és 98 kromoszóma közötti tartományban instabil.
2. Neuro-2a sejtvonal tenyésztési információ
A Neuro-2a sejteket széles körben használják az idegtudományi kutatólaboratóriumokban. Mielőtt ezekkel a sejtekkel dolgozna, meg kell ismernie az alábbiakban említett elengedhetetlen sejttenyésztési információkat. Ez segíthet abban, hogy könnyebben boldoguljon vele. Tudni fogja: Mi az a Neuro-2a a sejttenyésztő közeg? Hogyan kell a Neuro-2a sejteket tenyészteni? Mennyi a Neuro-2a sejtek megduplázódási ideje? Mekkora a Neuro-2a sejtek vetési sűrűsége ? Mi a Neuro-2a sejttenyésztési protokoll? Milyen a Neuro-2a sejttenyésztő közeg?
A Neuro-2a sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
Megduplázódási idő: |
A Neuro-2a sejtek megduplázódási ideje körülbelül 70 óra. |
|
Adhezív vagy szuszpenzióban: |
A Neuro-2a egy adherens sejtvonal. |
|
Ültetési sűrűség: |
A Neuro-2a sejtvonal optimális sejtültetési sűrűsége 1 x104 sejt/cm2. A sejtek beültetéséhez a sejteket magnézium- és kalciummentes foszfátpuffer sóoldattal (1x) mossuk. Később passzázsoldatot (Accutase) adunk hozzá, és a sejteket 8-10 percig környezeti hőmérsékleten inkubáljuk. A sejtek disszociációja után friss médiumot adunk hozzá, és a sejteket centrifugáljuk. A leszedett sejtpelletet óvatosan reszuszpendáljuk, és a sejteket a növekedéshez tenyésztőedénybe öntjük. |
|
Növesztőközeg: |
A Neuro-2a sejtek tenyésztéséhez EMEM-et használunk. Ez 10% FBS-t, 2 mM L-Glutamint, 1,5 g/L NaHCO3-t, EBSS-t, 1 mM nátrium-piruvátot és NEAA-t tartalmaz az ideális sejtnövekedéshez. A médiumot hetente 1-2 alkalommal kell cserélni. |
|
Növekedési feltételek: |
A Neuro-2a kultúrákat 37 °C-os, párásított inkubátorban tartjuk, amely 5%-os CO2-ellátáshoz van csatlakoztatva. |
|
Tárolás: |
A sejteket hosszú távon -150 °C alatti hőmérsékleten, ultraalacsony hőmérsékletű elektromos fagyasztóban vagy folyékony nitrogén gőzfázisában kell tárolni. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
A Neuro-2a sejtek fagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF táptalajt használunk. A sejteket lassú fagyasztási eljárással fagyasztják le, amely percenként csak 1 °C-os csökkenést tesz lehetővé. Ez megvédi a sejteket a sokktól és fenntartja életképességüket. |
|
Felolvasztási folyamat: |
A fagyasztott tenyészetek felolvasztásához az injekciós üveget 40-60 másodpercre 37 °C-os vízfürdőbe kell helyezni, amíg csak egy kis jégcsomó marad. Ezután tápközeget adunk hozzá, és a sejteket centrifugálásnak vetjük alá. Ez a lépés segít eltávolítani a fagyasztási közeg összetevőit. A sejtpelletet ezután újra szuszpendáljuk, és a sejteket egy új, tápfolyadékkal töltött lombikba helyezzük át. Ezután a sejteket legalább 24 órára 37 °C-os inkubátorba helyezzük. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
A Neuro-2a kultúrák kezeléséhez és fenntartásához kötelező az 1. biológiai biztonsági szintű laboratóriumi környezet. |
3. A Neuro-2a sejtvonal előnyei és hátrányai
A Neuro-2a sejtek rendelkeznek néhány olyan előnnyel és hátránnyal, amelyek megkülönböztetik őket más neuronális sejtvonalaktól. Néhány figyelemre méltó előnye és hátránya ezeknek a sejteknek itt van felsorolva.
Előnyök
A Neuro-2a egér neuroblasztóma sejtvonal előnyei a következők:
-
Könnyen karbantartható
A Neuro-2a sejtvonal nem jár bonyolult vagy bonyolult sejttenyésztési eljárásokkal. Könnyen tenyészthető és karbantartható a kutatólaboratóriumokban.
-
In vitro neuronális sejtmodell
A Neuro-2a egy kényelmes neuronális sejtmodell, amelyet a kutatók széles körben használnak a neuronok fejlődésének és differenciálódásának vizsgálatában.
Hátrányai
A Neuro-2a sejtek hátrányai a következők:
-
Egerekből származnak
A kutatóknak óvatosnak kell lenniük, amikor az egereken alapuló vizsgálatok eredményeit az emberi egészségre és betegségekre extrapolálják, mivel az egér és az emberi biológia jelentősen eltérhet egymástól.
4. A Neuro-2a sejtvonal kutatási alkalmazásai
A Neuro-2a sejtek számos alkalmazást kínálnak az idegtudományi kutatások területén. A következőkben e sejtvonal néhány ígéretes felhasználási lehetőségét tárgyaljuk:
- Idegrendszeri fejlődés: A Neuro-2a egy in vitro neuronális sejtmodell, amelyet széles körben használnak a neuronális fejlődés és a kapcsolódó folyamatok, például a differenciálódás, az axonális növekedés és a szinapszisképződés tanulmányozására. Egy 2020-ban végzett vizsgálatban Neuro-2a sejteket használtak fel a mikroRNS-124 szerepének feltárására a retinsav által indukált neuronális sejtdifferenciációban [2]. Egy másik tanulmány a Neuro 2a retinsav receptor gamma (RARG) és a miRNS-124 expresszióját vizsgálta a neuroblastóma sejtvonalban (N2A). Ez a tanulmány azt javasolta, hogy a RARG a miR-124 célpontja és elnyomja a neuritok kinövését [3].
- Neurotoxicitás: A neuro-2a-t a gyógyszerek, vegyi anyagok vagy környezeti tényezők idegsejtekre gyakorolt toxikus hatásainak értékelésére is használják. Zhihong Yin és munkatársai például egy tanulmányban a környezeti vegyi anyag, a biszfenol A (BPA) neurotoxicitását vizsgálták Neuro-2a sejtek segítségével. Megfigyelték, hogy a BPA elnyomja a neuronális sejtek differenciálódását és proliferációját azáltal, hogy megzavarja a sejtek és szinaptikus integritását [4].
- Gyógyszer-szűrés: A Neuro-2a sejteket számos gyógyszer, vegyület és természetes termék terápiás hatásának értékelésére is alkalmazzák. Egy tanulmány például Neuro-2a sejteket használt, és a Gingko biloba növényi kivonat antioxidatív potenciálját vizsgálta. A kutatás továbbá azt javasolta, hogy az Aβ-aggregáció csökkenését okozza, és az Alzheimer-kór potenciális kezelési módja lehet [5].
5. Neuro-2a sejteket tartalmazó kutatási kiadványok
Íme néhány érdekes kutatási cikk, amelyben a Neuro-2a sejtvonal szerepel.
A Journal of Natural Medicines, 2018-ban megjelent tanulmány a fehér paprikából (P. nigrum) izolált alkamidok terápiás hatását vizsgálta a Neuro-2a neuronális sejtekre.
Az Nkx2. 1 downregulációja részt vesz a túlzott retinsav által kiváltott agyi rendellenességben
Az Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2020-ban megjelent kutatás azt javasolta, hogy az Nkx2.1 gén fontos szerepet játszik az egér agy fejlődésében a Shh jelátviteli kaszkád szabályozásán keresztül.
Ez a cikk a Toxicology and Industrial Health (2023) című folyóiratban jelent meg, és azt javasolta, hogy egy környezeti vegyi anyag, a biszfenol A, neurotoxicitást vált ki a neuro-2a sejtekben, és megzavarja azok szinaptikus és citoszkeletális diszfunkcióját.
A Pharmaceuticals (2021) című szaklapban megjelent tanulmány azt javasolta, hogy egy gyógyszer, a hexarelin modulálja a PI3K/AKT és a MAPK kaszkádot neuroblastóma sejtekben (Neuro-2a), és gátolja a hidrogén-peroxid által kiváltott neuro-2a sejtek apoptózisát.
Az Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021) című szaklapban megjelent kutatási cikk azt javasolta, hogy az Emblica officinalis gyümölcskivonat elnyomja a neuroinflammációt a Neuro-2a sejtekben, és így jótékony hatással lehet a neuroinflammatorikus betegségekre.
6. A Neuro-2a sejtek forrásai: Jegyzőkönyvek, videók és még sok más: protokollok, videók és egyéb
Az alábbiakban a Neuro-2a sejtekkel kapcsolatban elérhető online források találhatók. Ezek közé tartozik a Neuro-2a sejttenyésztési és transzfekciós protokoll.
- Neuro-2a transzfekciós protokoll: A Neuro-2a megfelelő transzfekciós gazdaszervezet. Ez a link útmutatást nyújt a sejtvonal transzfekciós protokolljával kapcsolatban. A Neuro 2a transzfekciós hatékonysága reagensenként változik.
A következő link tartalmazza a Neuro-2a sejttenyésztési protokollt.
- Neuro-2a sejttenyésztési protokoll: Ez a link segít megismerni a neuro 2a sejtek szubkultúrázási protokollját.
- Neuro-2a sejtek: A weboldal átfogó ismereteket tartalmaz a Neuro-2a sejtek táptalajáról, a vetési sűrűségről, valamint a kriokonzervált és proliferatív kultúrák szubkultúrájának és kezelésének protokolljairól.
Hivatkozások
- Lulevich, V., et al., Single-cell mechanics provides a sensitive and quantitative means for probing amyloid-beta peptide and neuronal cell interactions. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): p. 13872-7.
- You, Q., et al., A miR-124 szerepe a retinsav által indukált Neuro-2A sejtek differenciálódásának szabályozásában. Neural Regen Res, 2020. 15(6): p. 1133-1139.
- Su, X., et al., A retinsav receptor gamma a microRNS-124 célpontja és gátolja a neuritok kinövését. Neuropharmacology, 2020. 163: p. 107657.
- Yin, Z., et al., Bisphenol-A expozíció által kiváltott neurotoxicitás és a szinapszisokkal és a citoszkelettel kapcsolatos Neuro-2a sejtekben. Toxicology in Vitro, 2020. 67: p. 104911.
- Chen, L., et al., Gingko biloba kivonat (EGb) gátolja az oxidatív stresszt az APPsw-t túlexpresszáló neuro 2A sejtekben. BioMed research international, 2019. 2019.