Hep2 sejtek és szerepük a gégerák kutatásában
AHep 2 sejtek kulcsfontosságú in vitro modell, amelyet széles körben használnak az orvosbiológiai kutatás olyan területein, mint a reumatológia, a rákkutatás és az immunológia. Ezek a gégerákból származó humán sejtek szerves részét képezik a gége eredetének és a gégenövedékek specifikus tulajdonságainak feltárásában. Jelentőségük jól felismerhető a transzlációs rákkutatásban, ahol nagymértékben hozzájárultak a rákok gégetáji természetének és eredetének megértéséhez, jelentős jelenlétet jelölve meg a gégerák-kutatási publikációkban [1].
A Hep 2 sejtek eredete és általános jellemzői
Egy sejtvonal eredete és általános jellemzői határozzák meg alkalmazhatóságát a kutatásban. Ez a szakasz segít megismerni a Hep 2 sejtek eredetét és néhány kiemelkedő jellemzőjét. Például megtudhatja: Mi az a HEp-2 sejtvonal? Mi a Hep 2 sejtek forrása? És milyen a Hep 2 morfológiája?
- A Hep 2-t, egy halhatatlan emberi epithelsejtvonalat először H. W. Toolan írta le 1954-ben gégerákos sejtekként. Az utóbbi időben azonban arról számoltak be, hogy a Hep 2 sejtvonal méhnyak adenokarcinóma sejtekből áll, és a Hela sejtvonal kontaminációjából származik [2].
- A Hep 2 sejtek Hela marker kromoszómákat tartalmaznak, és pozitívnak találták a keratin és a humán papillomavírus DNS-szekvenciáit, amit immunoperoxidáz festéssel, illetve PCR-rel igazoltak.
- A Hep 2 Hela sejtvonal származék Hep 2 epithelszerű morfológiával rendelkezik.
- A Hep 2 sejtvonal mind strukturális, mind numerikus kromoszómaabroncsokat mutat, közel triploid kariotípussal [3].
Hep 2 sejtvonal: Hepa Hepa: tenyésztési információk
Mielőtt egy sejtvonallal dolgoznánk, ismernünk kell a következő kulcsfontosságú pontokat a tenyésztésével kapcsolatban. Ezek az információk hasznosak lehetnek a sejtvonal hatékony tenyésztéséhez és fenntartásához. Tudnia kell: Mennyi a HEp-2 sejtek megduplázódási ideje? A Hep-2 sejtek adherensek? Mekkora a Hep2 sejtek vetési sűrűsége?
|
A populáció megduplázódási ideje: |
A Hep 2 sejtek esetében a bejelentett megduplázódási idő körülbelül 40 óra. |
|
Adherens vagy szuszpenzióban: |
A Hep 2 sejtek adherensek és monoszlopokká nőnek. |
|
Ültetési sűrűség: |
A Hep 2 sejtkultúrához ideális az 1 x104 sejt/cm2 vetési sűrűség. A beültetéshez az adherens Hep 2 sejteket 1 x PBS oldattal öblítjük, majd Accutase disszociációs oldattal inkubáljuk. A környezeti hőmérsékleten történő 8-10 perces inkubációt követően a sejteket médiumban reszuszpendáljuk és centrifugáljuk. Az összegyűjtött sejteket ezután friss tápfolyadékba adagoljuk, és új lombikokba öntjük a tenyésztéshez. |
|
Növesztőközeg: |
A Hep 2 sejtek tenyésztéséhez EMEM-et vagy Eagle's minimal essential mediumot használunk. Ezt a táptalajt 10% FBS-szel, 1,0 g/l glükózzal, 2,2 g/l NaHCO3-mal, 2,0 mM L-glutaminnal, 1% NEAA-val és 1 mM nátrium-piruváttal egészítik ki az ideális sejtnövekedés érdekében. A tápfolyadékot hetente 2-3 alkalommal kell megújítani. |
|
Növekedési feltételek: |
Más emlős sejtvonalakhoz hasonlóan a Hep 2-t is 37 °C-os hőmérsékleten, 5%-os CO2 folyamatos adagolásával párásított inkubátorban tenyésztjük. |
|
Tárolás: |
A Hep 2 sejtek ultraalacsony hőmérsékletű elektromos fagyasztókban (-150 °C alatt) vagy folyékony nitrogén gőzfázisban tárolhatók hosszú távú tárolás céljából. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
A Hep 2 sejtekhez ajánlott fagyasztási közeg a CM-1 vagy a CM-ACF. A sejteket lassú fagyasztási eljárással kell lefagyasztani, amely lehetővé teszi a hőmérséklet fokozatos, 1 °C-os csökkenését, és védi a sejtek életképességét. |
|
Felolvasztási folyamat: |
A lefagyasztott sejtek üvegét37 °C-osvízfürdőben történő keveréssel gyorsan felolvasztjuk, amíg egy kis jégcsomó nem marad. Ezután a sejteket friss tápfolyadékhoz adjuk, majd centrifugáljuk a fagyasztó tápközeg összetevőinek eltávolítása érdekében. Később a sejtpelletet újraszuszpendáljuk a tápfolyadékban, és a sejteket tenyésztőlombikokba adagoljuk. A sejteknek közel 24 órát kell pihenniük, hogy megtapadjanak. |
|
Biológiai biztonsági szint |
A Hep 2 sejtkultúrák kezeléséhez és fenntartásához az 1. biológiai biztonsági szintű laboratórium ajánlott. |
A Hep 2 sejtek előnyei és korlátai
Szinte minden sejtvonal rendelkezik az előnyök és korlátok egyedi kombinációjával, amelyek hozzájárulnak a kutatási területen való felhasználásukhoz. Ez a szakasz a Hep 2 sejtvonallal kapcsolatos néhány fő előnyt és hátrányt ismertet.
Előnyök
A Hep 2 sejtvonal fő előnyei a következők:
- Emberi eredet: A Hep 2 emberi epithelsejtekből származik, így értékes in vitro modell az emberi betegségek és vírusfertőzések tanulmányozására
- ANA kimutatás: A Hep 2 sejtvonal számos antigént tartalmazó natív fehérjetömbbel rendelkezik, így kiváló szubsztrát az antinukleáris antitestek (ANA) kimutatására. Ez a tulajdonság lehetővé teszi az ANA specifikus és nagy érzékenységű szűrését a szérumban, ami kulcsfontosságú diagnosztikai eszközzé teszi a kötőszöveti betegségek azonosításában
Korlátozások
- Kromoszóma-rendellenességek: A Hep 2 sejtek számos numerikus és strukturális kromoszóma-rendellenességet mutatnak. Ezek a rendellenességek befolyásolhatják a sejtek viselkedését, és korlátozhatják alkalmazhatóságukat bizonyos laboratóriumi kísérletekben
- Tumorigenitás: A Hep 2, amely egy tumorból származó humán epitélsejtvonal, genetikai rendellenességekkel rendelkezhet, amelyek jellemzően nem fordulnak elő az epitélsejtekben. Következésképpen a Hep 2 sejtek használata korlátozható a normál sejtfiziológiára összpontosító speciális vizsgálatokban.
A Hep 2 sejtvonal bővülő alkalmazásai a biomedicinális kutatásban
A Hep 2 sejtvonal példaértékű modellként szolgál az orvosbiológiai kutatásban történő számos alkalmazáshoz. Ezek a sokoldalúságukról ismert sejtek kritikus szerepet töltenek be az in vitro kísérletekben, a receptorok elemzésétől kezdve a komplex betegségek vizsgálatáig.
Tumorogén mechanizmusok és terápiás célpontok feltárása Hep 2 sejtekkel
A Hep 2 sejtek, mivel tumorgenikusak, kulcsfontosságúak a rákbiológia rejtelmeinek feltárásában. Betekintést nyújtanak a rákos jelátviteli útvonalakba, mechanisztikus tanulmányokba, és a rákellenes gyógyszerek szűrésének és értékelésének egyik fő támasza. Például egy éleslátó tanulmány a Hep 2-t használta fel a miRNS-33a rákos sejtek proliferációjára gyakorolt hatásának megrajzolására. Az eredmények megvilágították a miRNS-33a antiproliferatív hatását a PIM1-gyel, egy ismert onkogénnel való kölcsönhatásán keresztül, ami egy új terápiás célpontra utal [4]. Egy másik esetben a Hep 2-t a Marsdenia tenacissima cink-oxid nanorészecskék terápiás potenciáljának értékelésére alkalmazták, kiemelve antiproliferatív és apoptotikus hatásukat [5].
A virológiai kutatások előmozdítása a Hep 2 sejtek segítségével
A Hep 2 sejtek érzékenysége a különböző humán vírusokkal szemben felbecsülhetetlen értékű forrássá teszi őket a virológiai kutatásokban. A SARS-CoV-2 vírusgének expressziójában hatékonyan használták őket a vírus és a gazdasejtek közötti komplex kölcsönhatás feltárására [6]. Ez az alkalmazás különösen fontos a jelenlegi korban, amikor a COVID-19-hez hasonló vírusfertőzések megértése és leküzdése globális prioritás.
A sejtfunkciók megfejtése: Génmanipuláció Hep 2 sejtekben
A Hep 2 sejtvonal genetikai manipulációhoz való alkalmazkodóképessége aláhúzza a mechanisztikus vizsgálatokban való hasznosságát. A kutatók kihasználják ezt a tulajdonságot a génexpresszió módosítására és a specifikus gének sejtfunkciókban betöltött szerepének tisztázására. Egy figyelemre méltó tanulmányban az RBM6 RNS-kötő fehérje túlterjedését vizsgálták Hep 2 sejtekben, ami megkönnyítette a tumorszuppresszor potenciáljának vizsgálatát, értékes betekintést nyújtva a rák molekuláris alapjaiba [7].
A betegségdiagnózis javítása a Hep 2 sejtvonal alkalmazásával
E kutatási területeken túlmenően a Hep 2 sejtek diagnosztikai képességeik miatt is elismertek, különösen az ANA-k kimutatásában, amelyek kritikus fontosságúak az autoimmun betegségek, például a szisztémás lupus erythematosus diagnózisában. Az a pontosság, amellyel a Hep 2 sejtek képesek az ANA-k kimutatására, támogatja a diagnózist és a célzott kezelések fejlesztését, javítja az autoimmun kórképek megértését és a betegellátás javítását.
E változatos alkalmazások révén a Hep 2 sejtek jelentősen hozzájárultak a transzlációs rákkutatás, a vírusfertőzések tanulmányozása és a sejtmechanizmusok feltárása terén elért eredményekhez. Hozzájárulásuk a klinikailag releváns adatok előállításához felbecsülhetetlen, ami megerősíti nélkülözhetetlen szerepüket mind a laboratóriumban, mind a klinikumban. A kutatás további fejlődésével a Hep 2 sejtvonal biztosan az élvonalban marad, segítve az új kezelések felfedezését és bővítve az emberi egészségről és betegségekről szerzett ismereteinket.
Biztosítsa HEp-2 sejtvonalát még ma
Hep 2 sejtek: Hepar Hepa: kutatási publikációk
Az alábbiakban néhány érdekes és legtöbbet idézett kutatási publikáció található a Hep 2 sejtekről.
- Cink-oxid nanorészecskék szintézise Marsdenia tenacissima-ból gátolja a sejtproliferációt és apoptózist indukál gégerákos sejtekben (Hep-2)
A Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2019) című folyóiratban megjelent cikk a bioszintetizált Marsdenia tenacissima cink-oxid nanorészecskék rákellenes potenciálját vizsgálta a Hep-2 sejtvonalon. - Bioformulált hesperidinnel töltött PLGA nanorészecskék ellensúlyozzák a mitokondriumok által közvetített intrinzikus apoptotikus útvonalat a rákos sejtekben
Ez a cikk a Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials című folyóiratban jelent meg 2021-ben. Ez a tanulmány a bioformulált hezperidinnel töltött poli(tej-ko-glikolsav) (PLGA) nanorészecskék rákellenes tulajdonságait vizsgálta Hep 2 sejtekben. - A Lophatherum gracile etanolos kivonatának antivirális aktivitása a légúti szinciális vírusfertőzéssel szemben
A Journal of Ethnopharmacology 2019-es számában megjelent publikációban Hep 2 sejteket használtak a légúti szinciális vírusfertőzés vizsgálatára és az ellene ható antivirális gyógyszerek szűrésére. A tanulmány egy gyógynövény, azaz a Lophatherum gracile etanolos kivonatának ígéretes antivirális potenciáljáról számolt be a légúti szinciális vírusfertőzés ellen. - Négy aromás növény vizes kivonatának értékelése a Candida albicans humán HEp-2 hámsejtekhez való tapadásával szembeni aktivitásuk szempontjából
Ez a kutatás a Gene Reports (2020) című folyóiratban jelent meg. Ez a tanulmány négy aromás növény vizes kivonatának gátló potenciálját vizsgálta a Candida albicans humán Hep-2 epitélsejtekhez való tapadásával szemben. - A Wnt1-indukálható jelátviteli fehérje 1 a YAP1/TEAD1/GLUT1 útvonalon keresztül szabályozza a gége laphámsejtes karcinóma glikolízisét és kemorezisztenciáját
Ez a tanulmány a Journal of Cellular Physiology 2019-es számában jelent meg. A tanulmány arról számol be, hogy a Wnt1-indukálható jelzőfehérje 1 (WISP1) kölcsönhatásba lép a YAP1/TEAD1/GLUT1 útvonallal, és szabályozza a glükóz metabolizmust és a kemorezisztenciát a Hep 2 sejtvonalban.
Források a Hep2 sejtvonalhoz: Hep2 Hep2: Protokollok, videók és még sok más: protokollok, videók és egyéb
A Hep 2 egy jól ismert sejtvonal. Számos elérhető forrás áll rendelkezésre a Hep 2 sejtvonallal kapcsolatban.
- Hep2 sejtvonal szubkultiválása: Ez a videó lépésről-lépésre bemutatja a Hep 2 sejtek szubkultiválását.
- Hep 2 sejtek ANA-szűrése: Ez a videó az antinukleáris antitestek (ANA) szűrését ismerteti a Hep 2 sejtvonal felhasználásával.
- Hep 2 tenyésztés: Ez a link a Hep 2 sejtekkel kapcsolatos alapvető sejttenyésztési információkat tartalmaz. Tartalmazza a sejtosztást, a sejtek fagyasztását és felolvasztását.
Gyakran ismételt kérdések a HEp-2 sejtekről a biomedicinális kutatásban
Hivatkozások
- Fusi, M. és S. Dotti, A HEp-2 sejtvonal adaptálása teljesen állatmentes tenyésztési rendszerekhez és a sejtnövekedés valós idejű elemzése. Biotechniques, 2021. 70(6): p. 319-326.
- Gorphe, P., A Hep-2 sejtvonal átfogó áttekintése a gégerák transzlációs kutatásában. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): p. 644-649.
- Wang, M., et al., A rákhoz kapcsolódó fibroblasztok egy humán HEp-2 létrehozott gége xenograftos tumorban nem rákos sejtekből származnak epiteliális-mesenchymális átmenet révén, fenotípusosan aktiváltak, de kariotípusosan normálisak. PLoS One, 2015. 10(2): p. e0117405.
- Karatas, O.F., A miR-33a antiproliferatív potenciálja a gégerákos Hep-2 sejtekben a PIM1 célponton keresztül. Head Neck, 2018. 40(11): p. 2455-2461.
- Wang, Y., et al., Cink-oxid nanorészecskék szintézise Marsdenia tenacissima-ból gátolja a sejtproliferációt és apoptózist indukál gégerákos sejtekben (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: p. 111624.
- Zhang, J., et al., A SARS-CoV-2 fehérjék szubcelluláris lokalizációjának szisztémás és molekuláris vizsgálata. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): p. 269.
- Wang, Q., et al., Az RBM6 RNS-kötő fehérje mint tumorszuppresszor gén elnyomja a növekedést és a progressziót a laryngokarcinómában. Gene, 2019. 697: p. 26-34.