A Hep2 sejtek és szerepük a gége-rák kutatásában
A Hep 2 sejtek kulcsfontosságú in vitro modellek, amelyeket széles körben használnak a biomedicinális kutatás különböző területein, például a reumatológiában, a rákkutatásban és az immunológiában. Ezek a gége-karcinómából származó emberi sejtek elengedhetetlenek a gége-daganatok eredeti szövetének és specifikus jellemzőinek feltárásában. Jelentőségüket széles körben elismerik a transzlációs rákkutatásban, ahol nagyban hozzájárultak a gége rákos megbetegedéseinek természetének és eredetének megértéséhez, és jelentős szerepet töltenek be a gégerák-kutatási publikációkban [1].
- Növekedési tápközeg
- A Hep 2 sejtek tenyésztéséhez EMEM-et vagy Eagle minimális esszenciális táptalajt használnak. Ezt a táptalajt 10% FBS-sel, 1,0 g/l glükózzal, 2,2 g/l NaHCO3-mal, 2,0 mM L-glutaminnal, 1% NEAA-val és 1 mM nátrium-piruváttal egészítik ki az ideális sejtnövekedés érdekében. A táptalajt hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
- Duplázódási idő
- A Hep 2 sejtek esetében a megadott duplázódási idő körülbelül 40 óra.
- Növekedési típus
- A Hep 2 sejtek adhezívek és monorétegekbe növekednek.
- Biológiai biztonsági szint
- BSL-1
- Kapható
- Cytion — Hep2 megrendelése
A Hep 2 sejtek eredete és általános jellemzői
A sejtvonal eredete és általános jellemzői határozzák meg annak kutatási alkalmazhatóságát. Ez a szakasz segít megismerni a Hep 2 sejtek eredetét és néhány kiemelkedő jellemzőjét. Például megtudhatja: Mi a HEp-2 sejtvonal? Mi a Hep 2 sejtek forrása? És mi a Hep 2 morfológiája?
- A Hep 2, egy halhatatlan emberi epiteliális sejtvonalat először H.W. Toolan írta le gége-karcinóma sejteként 1954-ben. Az utóbbi időben azonban arról számoltak be, hogy a Hep 2 sejtvonal méhnyak-adenokarcinóma sejtekből áll, és a Hela sejtvonal szennyeződéséből származik [2].
- A Hep 2 sejtek Hela markerkromoszómákat tartalmaznak, és immunperoxidáz festéssel, illetve PCR-rel igazoltan pozitívak a keratinra és a humán papillomavírus DNS-szekvenciáira.
- A Hela sejtvonalból származó Hep 2 epitheliális jellegű morfológiával rendelkezik.
- A Hep 2 sejtvonal mind szerkezeti, mind numerikus kromoszómális eltéréseket mutat, közel triploid kariotípussal [3].
HEp-2 sejtvonal: Tenyésztési információk
Mielőtt egy sejtvonalat használnánk, ismernünk kell a tenyésztéséhez szükséges alábbi kulcsfontosságú információkat. Ezek az adatok hasznosak lehetnek a sejtvonal hatékony tenyésztéséhez és fenntartásához. Tudnia kell: Mennyi a HEp-2 sejtek duplázódási ideje? A Hep 2 sejtek adhezívek? Mennyi a Hep2 sejtek beültetési sűrűsége?
Populáció duplázódási ideje:
A Hep 2 sejtek esetében a megadott duplázódási idő körülbelül 40 óra.
Adhezív vagy szuszpenziós:
A Hep 2 sejtek adhezívek és monorétegekké növekednek.
Beültetési sűrűség:
A Hep 2 sejtkultúrához ideális a 1 x 104 sejt/cm2 beültetési sűrűség. A beültetéshez az adhezív Hep 2 sejteket 1 x PBS oldattal öblítik, majd Accutase disszociációs oldattal inkubálják. 8–10 perces inkubálás után szobahőmérsékleten a sejteket táptalajban reszuszpendálják és centrifugálják. Az összegyűjtött sejteket ezután friss táptalajba adagolják, és új lombikokba öntik tenyésztés céljából.
Növekedési tápközeg:
A Hep 2 sejtek tenyésztéséhez EMEM vagy Eagle minimális esszenciális táptalajt használnak. Ezt a táptalajt 10% FBS-sel, 1,0 g/l glükózzal, 2,2 g/l NaHCO3-mal, 2,0 mM L-glutaminnal, 1% NEAA-val és 1 mM nátrium-piruváttal egészítik ki az ideális sejtnövekedés érdekében. A táptalajt hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
Növekedési feltételek:
Más emlős sejtvonalakhoz hasonlóan a Hep 2-t is 37 °C-ra beállított, párásított inkubátorban, folyamatos 5% CO2-ellátással tenyésztik.
Tárolás:
A Hep 2 sejtek hosszú távú tárolásra ultra-alacsony hőmérsékletű elektromos fagyasztókban (-150 °C alatt) vagy folyékony nitrogén gázfázisában tárolhatók.
Fagyasztási folyamat és táptalaj:
A Hep 2 sejtekhez ajánlott fagyasztó tápközeg a CM-1 vagy a CM-ACF. A sejteket lassú fagyasztási eljárással kell fagyasztani, amely lehetővé teszi a hőmérséklet fokozatos, 1 °C-os csökkenését, és megóvja a sejtek életképességét.
Felolvasztási folyamat:
A fagyasztott sejtekkel töltött fiolát vízfürdőben 37 °C-on gyorsan felolvasztják, amíg csak egy kis jégdarab marad benne. Ezután a sejteket friss táptalajba adjuk, és centrifugáljuk, hogy eltávolítsuk a fagyasztó közeg összetevőit. Később a sejtpelletet újra szuszpendáljuk a táptalajban, és a sejteket tenyésztőedényekbe adagoljuk. A sejteknek közel 24 órán át pihenniük kell, hogy tapadjanak.
Biológiai biztonsági szint
A Hep 2 sejtkultúrák kezeléséhez és fenntartásához 1. szintű biológiai biztonsági laboratóriumot ajánlunk.
A Hep 2 sejtek előnyei és korlátai
Szinte minden sejtvonal egyedi előnyök és korlátok kombinációját mutatja, amelyek hozzájárulnak a kutatási területen való felhasználásukhoz. Ez a szakasz a Hep 2 sejtvonalhoz kapcsolódó néhány fő előnyt és hátrányt ismerteti.
Előnyök
A Hep 2 sejtvonal fő előnyei a következők:
- Emberi eredet: A Hep 2 emberi hámsejtekből származik, ami értékes in vitro modellé teszi az emberi betegségek és vírusfertőzések tanulmányozásához.
- ANA-kimutatás: A Hep 2 sejtvonal számos antigént bemutató natív fehérje-készlettel rendelkezik, ami kiváló szubsztrátumot jelent az antinukleáris antitestek (ANA) kimutatásához. Ez a tulajdonság lehetővé teszi az ANA specifikus és rendkívül érzékeny szűrését a szérumban, ami a kötőszöveti betegségek azonosításának kulcsfontosságú diagnosztikai eszközévé teszi.
Korlátozások
- Kromoszóma-rendellenességek: A Hep 2 sejtek számos numerikus és szerkezeti kromoszóma-rendellenességet mutatnak. Ezek a rendellenességek befolyásolhatják a sejtek viselkedését, és korlátozhatják alkalmazhatóságukat bizonyos laboratóriumi kísérletekben.
- Tumorképző képesség: A Hep 2, egy tumorból származó humán epiteliális sejtvonal, rendelkezhet olyan genetikai rendellenességekkel, amelyek általában nem jellemzőek az epiteliális sejtekre. Következésképpen a Hep 2 sejtek használata korlátozott lehet olyan specifikus tanulmányokban, amelyek a normális sejtfiziológiára összpontosítanak.
A Hep 2 sejtvonal alkalmazási területeinek bővülése az orvostudományi kutatásban
A Hep 2 sejtvonal kiemelkedő példaként szolgál a biomedicinális kutatás számos alkalmazási területén. Sokoldalúságukról híres sejtek kritikus szerepet töltenek be az in vitro kísérletekben, a receptorelemzéstől a komplex betegségek tanulmányozásáig.
A tumorigenikus mechanizmusok és terápiás célpontok feltárása Hep 2 sejtekkel
A Hep 2 sejtek, mivel tumorigenikusak, kulcsfontosságúak a rákbiológia bonyolult folyamatainak feltárásában. Betekintést nyújtanak a rákos jelátviteli útvonalakba, mechanisztikus vizsgálatokhoz, és alapvető szerepet játszanak a rákellenes gyógyszerek szűrésében és értékelésében. Például egy érdekes tanulmányban Hep 2-t használtak a miRNA-33a ráksejt-proliferációra gyakorolt hatásának feltérképezésére. Az eredmények rávilágítottak a miRNA-33a antiproliferatív hatásaira a PIM1-vel, egy ismert onkogénnel való kölcsönhatásán keresztül, ami egy új terápiás célpontot sugall [4]. Egy másik esetben a Hep 2-t a Marsdenia tenacissima cink-oxid nanorészecskék terápiás potenciáljának értékelésére használták, kiemelve azok antiproliferatív és apoptotikus hatékonyságát [5].
A virológiai kutatások előrehaladása a Hep 2 sejtekkel kapcsolatos ismeretek segítségével
A Hep 2 sejtek különböző humán vírusokkal szembeni fogékonysága miatt felbecsülhetetlen értékű forrásnak számítanak a virológiai kutatásban. Hatékonyan alkalmazták őket a SARS-CoV-2 vírusgének expressziójában a vírus és a gazdasejt mechanizmusai közötti komplex kölcsönhatások feltárására [6]. Ez az alkalmazás különösen fontos a jelenlegi helyzetben, amikor a COVID-19-hez hasonló vírusfertőzések megértése és leküzdése globális prioritás.
A sejtfunkciók megfejtése: génmanipuláció a Hep 2 sejtekben
A Hep 2 sejtvonal genetikai manipulációhoz való alkalmazkodóképessége aláhúzza hasznosságát a mechanisztikai tanulmányokban. A kutatók kihasználják ezt a tulajdonságot a génexpresszió modulálására és a specifikus gének sejtfunkciókban betöltött szerepének tisztázására. Egy figyelemre méltó tanulmány a RBM6 RNS-kötő fehérje túltermelését vizsgálta Hep 2 sejtekben, ami megkönnyítette a tumor szuppresszor potenciáljának vizsgálatát, és értékes betekintést nyújtott a rák molekuláris alapjaiba [7].
A betegségek diagnosztizálásának javítása a Hep 2 sejtvonal alkalmazásával
Ezen kutatási területeken túl a Hep 2 sejtek diagnosztikai képességei is elismertek, különösen az ANA-k kimutatásában, amelyek kritikus jelentőségűek az autoimmun betegségek, például a szisztémás lupus erythematosus diagnosztizálásában. A Hep 2 sejtek által az ANA-k kimutatására alkalmazott pontosság támogatja a diagnózist és a célzott kezelések fejlesztését, javítva az autoimmun patológiák megértését és a betegellátást.
Ezeken a sokrétű alkalmazásokon keresztül a Hep 2 sejtek jelentősen hozzájárultak a transzlációs rákkutatás, a vírusfertőzések tanulmányozása és a sejtes mechanizmusok feltárása terén elért fejlődéshez. Hozzájárulásuk a klinikailag releváns adatok előállításához felbecsülhetetlen, megerősítve nélkülözhetetlen szerepüket mind a laboratóriumban, mind a klinikai gyakorlatban. A kutatások folyamatos fejlődésével a Hep 2 sejtvonal biztosan az élvonalban marad, segítve az új kezelések felfedezését és bővítve az emberi egészségről és betegségekről szóló ismereteinket.
Szerezze be még ma a HEp-2 sejtvonalat!
Hep 2 sejtek: Kutatási publikációk
Az alábbiakban bemutatunk néhány érdekes és leggyakrabban hivatkozott kutatási publikációt a Hep 2 sejtekről.
- A Marsdenia tenacissima-ból származó cink-oxid nanorészecskék szintézise gátolja a sejtek szaporodását és apoptózist indukál a gége rákos sejtjeiben (Hep-2)
A Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2019) folyóiratban megjelent cikk a bioszintetizált Marsdenia tenacissima cink-oxid nanorészecskék rákellenes potenciálját vizsgálta a Hep 2 sejtvonalban. - A bioformulált, hesperidinnel töltött PLGA nanorészecskék ellensúlyozzák a
ráksejtekben a mitokondriumok által közvetített belső apoptotikus útvonalat Ez a cikk 2021-ben jelent meg a Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials folyóiratban. Ez a tanulmány a bioformulált, hesperidinnel töltött polilaktát-ko-glikolsav (PLGA) nanorészecskék rákellenes tulajdonságait vizsgálta Hep 2 sejtekben. - A Lophatherum gracile etanolos kivonatának antivirális hatása a légúti szinkiciális vírusfertőzés
ellen Ez a 2019-ben a Journal of Ethnopharmacology folyóiratban megjelent publikáció Hep 2 sejteket használt a légúti szinkiciális vírusfertőzés tanulmányozására és az ellene ható antivirális gyógyszerek szűrésére. A tanulmány beszámolt egy gyógynövény, a Lophatherum gracile etanolos kivonatának ígéretes antivirális potenciáljáról a légúti szinkiciális vírusfertőzés ellen. - Négy aromás növény vizes kivonatainak értékelése a Candida albicans emberi HEp-2 hámsejtekhez
való adhéziója elleni hatékonyságuk szempontjából Ez a kutatás a Gene Reports (2020) folyóiratban jelent meg. A tanulmány négy aromás növény vizes kivonatának gátló hatását vizsgálta a Candida albicans emberi Hep 2 epiteliális sejtekhez való adhéziója ellen. - A Wnt1-indukálható jelátviteli fehérje 1 szabályozza a gége pikkelyes sejtes karcinómájának glikolízisét és kemoterápiás rezisztenciáját a YAP1/TEAD1/GLUT1 útvonalon
keresztül . A tanulmány 2019-ben jelent meg a Journal of Cellular Physiology folyóiratban. A tanulmány beszámol arról, hogy a Wnt1-indukálható jelátviteli fehérje 1 (WISP1) kölcsönhatásba lép a YAP1/TEAD1/GLUT1 útvonalon, és szabályozza a glükózanyagcserét és a kemoterápiás rezisztenciát a Hep 2 sejtvonalban.
Források a Hep2 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
A Hep 2 egy jól ismert sejtvonal. Számos forrás áll rendelkezésre a Hep 2 sejtvonalról.
- A Hep 2 sejtvonal szubkultiválása: Ez a videó lépésről lépésre bemutatja a Hep 2 sejtek szubkultiválását.
- Hep 2 sejtek ANA szűrése: Ez a videó a Hep 2 sejtvonal felhasználásával végzett antinukleáris antitestek (ANA) szűrését mutatja be.
- Hep 2 tenyésztése: Ez a link alapvető sejttenyésztési információkat tartalmaz a Hep 2 sejtekről. Ide tartozik a sejtek osztása, fagyasztása és felolvasztása.
Gyakran ismételt kérdések a HEp-2 sejtekről a biomedicinális kutatásban
Hivatkozások
- Fusi, M. és S. Dotti, A HEp-2 sejtvonal adaptálása teljesen állatmentes tenyésztési rendszerekhez és a sejtnövekedés valós idejű elemzése. Biotechniques, 2021. 70(6): 319–326. o.
- Gorphe, P., A Hep-2 sejtvonal átfogó áttekintése a gége-rák transzlációs kutatásában. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): 644–649. o.
- Wang, M. és munkatársai, A humán HEp-2-ből létrehozott gége-xenotranszplantált tumorban található rákhoz kapcsolódó fibroblasztok nem származnak ráksejtekből epiteliális-mesenchimális átalakulás útján, fenotípusukban aktiváltak, de kariotípusukban normálisak. PLoS One, 2015. 10(2): e0117405.
- Karatas, O.F., A miR-33a antiproliferatív potenciálja gége-rákos Hep-2 sejtekben a PIM1 célzása révén. Head Neck, 2018. 40(11): 2455–2461. o.
- Wang, Y. és munkatársai, A Marsdenia tenacissima-ból származó cink-oxid nanorészecskék szintézise gátolja a sejtek szaporodását és apoptózist indukál a gége rákos sejtjeiben (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: 111624. o.
- Zhang, J. és munkatársai, A SARS-CoV-2 fehérjék szubcelluláris lokalizációjának szisztematikus és molekuláris vizsgálata. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): 269. o.
- Wang, Q. és munkatársai, Az RBM6 RNS-kötő fehérje, mint tumor szuppresszor gén, gátolja a gége-karcinóma növekedését és progresszióját. Gene, 2019. 697: 26–34. o.