Ligne cellulaire Jurkat E6.1

Jurkat E6.1 est un clone de la lignée cellulaire Jurkat, une lignée de lymphocytes T humains immortalisés dérivés du sang périphérique. Créée en 1977, elle est utilisée dans la recherche sur la signalisation des récepteurs des lymphocytes T, les thérapies adoptives des lymphocytes T et d'autres lymphocytes contre le cancer, la recherche sur les proto-oncogènes liés au sang, la survie et la différenciation cellulaires.

Dans cet article, nous inclurons toutes les informations et les pré-requis que vous devez comprendre avant de commencer votre travail sur les lignées cellulaires clonées Jurkat E6.1 :

Origine, histoire et informations générales
Caractéristiques de la culture cellulaire
Applications des lignées cellulaires Jurkat E6.1
Publications de recherche
Avantages et limites
Ressources : Protocoles, vidéos et autres

1 )Origine, histoire et informations générales

Voici toutes les informations nécessaires concernant l'histoire, l'origine et les caractéristiques générales de la lignée cellulaire Jurkat E6.1 et leur manipulation en culture cellulaire.

Jurkat E6.1 est une lignée de lymphocytes T humains immortalisés. Cette lignée cellulaire clonée est un dérivé de la lignée cellulaire Jurkat obtenue à partir du sang périphérique d'un garçon de 14 ans atteint de leucémie lymphoblastique aiguë en 1976. Après avoir été isolée du sang, cette lignée cellulaire a été initialement appelée JM, car JM et Jurkat indiquent que ces lignées cellulaires ont été isolées à partir du même patient. La lignée cellulaire Jurkat E6.1 a été clonée à partir de dérivés cellulaires connus sous le nom de Jurkat-FHCRC.
Les lignées cellulaires E6.1 sont dérivées de la leucémie ; ces lignées cellulaires sont utilisées pour augmenter l'expression de l'IL-2 par simulation avec des anticorps monoclonaux ou des lectines. Elles expriment des récepteurs d'antigènes de cellules T ; par conséquent, ces lignées cellulaires peuvent être utilisées dans l'étude des troubles du système immunitaire et dans la recherche en immuno-oncologie.
Morphologie cellulaire des cellules Jurkat E6.1 : Les cellules Jurkat E6.1 ont été isolées à partir d'un patient atteint de leucémie et ont une morphologie modifiée par rapport aux lymphocytes T, ce qui en fait des lignées cellulaires immortelles. La cellule lymphoblaste se forme lorsque des lymphocytes naïfs sont activés par la présentation d'antigènes par des cellules présentatrices d'antigènes. Il en résulte une croissance accrue du noyau, du cytoplasme, de l'ARNm et des protéines.
Taille des cellules: Les lignées cellulaires Jurkat E6.1 sont clonées immortalisées avec plus couramment un diamètre allant de 10 à 16 μm (le diamètre peut varier selon le type de suspension). Ces lignées cellulaires ont une forme très sphérique.
Génome et nombre de chromosomes : Ces lignées cellulaires sont des lignées cellulaires pseudodiploïdes de lymphocytes T humains, avec leur chromosome modèle le chromosome 46. Elles montrent également que le chromosome modal est présent dans environ 74 % des cas et que le taux de polyploïdie est d'environ 5,3 %. Les études sur le caryotype ont montré un caryotype avec 46, X, Y, -2, -18, del (2) (p21p23), del (18) (p11.2). Les chromosomes X et Y ont généralement une copie régulière dans la plupart des lignées cellulaires.
Lignées cellulaires Jurkat vs E6.1 Lignées cellulaires Jurkat : Les lignées cellulaires Jurkat sont les lignées cellulaires parentales primaires isolées pour la première fois chez le patient atteint de leucémie lymphoblastique aiguë. En revanche, les lignées cellulaires Jurkat E6.1 sont des dérivés clonés des lignées cellulaires Jurkat-FHCRC.

Cellules T luttant contre le cancer : L'immunothérapie par cellules CAR T.

2. caractéristiques de la culture cellulaire

Points clés pour la culture des cellules B16

Temps de doublement de la population	Le temps de doublement de la population des lignées cellulaires Jurkat est d'environ 20,7 heures, ce qui permet un développement cellulaire relativement rapide.
Adhérentes ou non adhérentes	E6.1 Les lignées cellulaires Jurkat se développent en mode non adhérent, existant en suspension soit sous forme de croissance en couche unique, soit sous forme d'amas flottant librement.
Densité d'ensemencement	La densité d'ensemencement recommandée pour les lignées cellulaires E6.1 Jurkat est de 1,0 à 2,0 x 105 cellules viables/mL afin de garantir un attachement sain et une croissance cellulaire optimale.
Milieu de croissance	Le milieu de croissance requis pour les lignées cellulaires E6.1 Jurkat est le milieu RPMI-1640 formulé par l'ATCC (ATCC 30-2001). Le milieu complet est préparé en ajoutant les composants spécifiés, y compris le sérum bovin fœtal (ATCC 30-2002), pour atteindre une concentration finale de 10 %.
Conditions de croissance	Les lignées cellulaires Jurkat E6.1 peuvent être cultivées dans un incubateur approprié avec une disponibilité de 5 % d'air et de CO2 en utilisant du milieu RPMI-1640 et du sérum bovin fœtal.
Conditions de stockage	Le stockage à long terme des lignées cellulaires Jurkat à l'état de culture congelée doit se faire à -130 degrés Celsius ou dans de l'azote liquide en phase vapeur. Le stockage à -70 degrés Celsius peut entraîner une perte de viabilité cellulaire.
Congélation	Une aliquote d'environ 0,5-1,0 ml de suspension de lignée cellulaire est conservée dans des tubes cryogéniques pour maintenir les lignées cellulaires. Ces tubes sont ensuite placés dans un conteneur de cryostockage à -70 degrés Celsius. Les tubes sont transférés dans un réservoir d'azote liquide et stockés en phase vapeur le jour suivant.
Décongélation	Pour décongeler les lignées cellulaires Jurkat, les flacons de suspension cellulaire doivent être placés dans un bain-marie à 37 degrés Celsius. La suspension peut être décongelée pendant 2 minutes en l'agitant légèrement. Il est essentiel de maintenir le bouchon du flacon à l'extérieur du bain-marie afin d'éviter toute contamination des lignées cellulaires.
Niveau de biosécurité	La croissance des lignées cellulaires Jurkat nécessite un niveau de biosécurité BSL-1 en laboratoire, en veillant à ce que les mesures de sécurité de base soient respectées.

Cellules Jurkat E6.1 se développant en amas à un grossissement de 10x et 20x.

3. applications des lignées cellulaires Jurkat E6.1

La lignée cellulaire Jurkat E6.1 est surtout utilisée dans la recherche et l'étude des troubles liés au système immunitaire et aux cancers qui y sont associés. En outre, elle convient à l'étude de certaines complexités liées à l'infection par le VIH, car le récepteur des cellules T CD4 est nécessaire à l'entrée du rétrovirus.

Certains domaines clés dans lesquels ces lignées cellulaires sont utilisées sont abordés ci-dessous :

Système modèle pour la signalisation des cellules T et les voies apoptotiques : Cette lignée cellulaire dérivée de la leucémie à cellules T est largement utilisée dans la recherche sur la cascade de signalisation du TCR. Jurkat E6.1 libère davantage d'IL-2 et d'IL-8 qui contribuent ensuite à l'activation des cellules T et déclenchent les voies inflammatoires. Cette lignée cellulaire est également connue pour son Pyk2 hyperphosphorylé et sa production accrue de Vav1 qui influence de manière cruciale le réarrangement du cytosquelette d'actine dans les cellules T. La ségrégation du TCR dans la lignée cellulaire Jurkat E6-1 peut également être améliorée par l'expression forcée de LFA-1 qui renforce la signalisation du TCR et l'expression de l'IL-2. Des études sur la prolifération cellulaire et le cycle cellulaire sont également menées dans les lignées cellulaires Jurkat E6.1. Elles ont été privilégiées dans l'étude des voies apoptotiques et de l'induction de dommages à l'ADN par des composés dérivés de sources marines et végétales. Une étude réalisée en 2013 a évalué l'impact du milieu conditionné épigonal de requin sur les cellules humainesen utilisant ces lignées cellulaires. De même, l'impact répressif de l'hirsutine d'origine végétale sur la prolifération cellulaire a été étudié sur des lignées cellulaires Jurkat E6.1. Souvent, les études anticancéreuses utilisent également Jurkat E6.1 pour évaluer leurs cibles sélectionnées. L'influence des neurotoxines marines telles que les Brevetoxines (PbTx) a également été étudiée dans ces lignées cellulaires.

Études sur le VIH : L'une des applications les plus importantes des lignées cellulaires Jurkat E6.1 est leur capacité à servir de modèle pour les études sur le VIH en raison de leur propriété à choisir différents événements de signalisation qui induisent le TCA. Les lignées cellulaires Jurkat E6.1 ont été utilisées non seulement pour comprendre l'activation du VIH, mais aussi pour disséquer les mécanismes de la latence du VIH. La réplication et l'infection du VIH ont été largement étudiées dans ces lignées cellulaires où elles peuvent être soumises à l'édition et à l'élimination de gènes, comme l'a fait une étude en 2021. L'impact de l'administration de médicaments sur l'infection par le VIH, comme les nanoparticules hybrides polymère-lipide (PLN) cochargées d'efavirenz (Efa)-enfuvirtide (Enf) à longue durée d'action sur l'entrée virale, a été utilisé sur des lignées cellulaires Jurkat E6.1. La lignée cellulaire Jurkat E6.1 modifiée par CRISPR/Cas9 a été utilisée à plusieurs reprises pour étudier les mécanismes impliqués dans l'entrée, la réplication et l'infection par le VIH.

4. publications de recherche

Voici quelques exemples notables de la vaste collection de recherches, y compris sur les lignées cellulaires Jurkat E6.1.

Le méthylsélénol, un métabolite du sélénium, régule l'expression des ligands qui déclenchent l'activation immunitaire par le biais du récepteur lymphocytaire NKG2D

En utilisant des cellules Jurkat E6.1, incubées dans différents composés de sélénium pour étudier l'expression des ligands et l'expression de surface de MICA/B.

L'acide caracasine, un ent-3,4-seco-kaurène, favorise l'apoptose et la différenciation cellulaire par l'inhibition de la voie de signalisation NFkB dans les cellules leucémiques.

Comprendre la cytotoxicité induite par l'acide caracasine dans les lignées de cellules T humaines telles que Jurkat E6.1 et HL-60.

Preuve du développement in vitro d'une résistance à l'azidothymidine dans les lignées cellulaires de leucémie lymphocytaire T (Jurkat E6-1/AZT-100) et chez les patients pédiatriques infectés par le VIH-1

Utilisation de Jurkat E6.1 incubées à long terme avec de l'AZT pour étudier la résistance à l'azidothymidine (AZT) chez les patients infectés par le VIH-1.

Études sur la lignée cellulaire Jurkat E6.1 concernant les effets de certains bio-indols sur la fluidité de la membrane

Cette recherche a utilisé un système d'analyse de fluorescence polarisée pour comprendre l'impact des bio-indols, y compris la sérotonine, le tryptophane et la mélatonine, sur la fluidité de la membrane cellulaire dans les lignées cellulaires Jurkat E6.1.

Mécanisme moléculaire de l'induction de l'apoptose dans les cellules Jurkat E6-1 par l'extrait d'alcaloïdes de Tribulus terrestris

L'extrait alcaloïdedérivé du Tribulus terrestris induit l'apoptose dans les cellules Jurkat E6.1 afin de comprendre le mécanisme d'action sous-jacent.

L'augmentation de l'expression du LFA-1 renforce l'architecture des synapses immunitaires et la signalisation des récepteurs des cellules T dans les cellules Jurkat E6.1

La signalisation des récepteurs des cellules T dans les cellules Jurkat E6.1 a été améliorée en augmentant fortement l'expression du LFA-1.

5. avantages et limites

Comme d'autres lignées cellulaires, Jurkat E6.1 a ses avantages et ses limites.

Avantages

Il y a de nombreuses raisons pour lesquelles elle est préférée dans ces applications :

Mode de croissance
Jurkat E6.1 est une lignée cellulaire en suspension et non adhérente, ce qui signifie qu'elle se développe en suspension et n'adhère pas à la surface de culture.
Expression des gènes
La lignée cellulaire Jurkat E6.1 exprime les gènes codant pour l'interleukine-2 (IL-2) et le CD3. Lors de la stimulation avec des anticorps monoclonaux, des lectines ou des esters de phorbol contre le complexe antigénique T3, il a été démontré que ces cellules produisent de l'IL-2 amplifiée.
Expression des antigènes
La lignée cellulaire Jurkat E6.1 exprime l'antigène CD3, associé à l'activation des cellules T et à la signalisation.
Marqueurs d'expression
La lignée cellulaire exprime les marqueurs du récepteur de l'antigène des cellules T (TCR), qui jouent un rôle crucial dans la reconnaissance des cellules T et la réponse immunitaire.
Applicabilité pour la transfection
La lignée cellulaire Jurkat clone E6.1 se prête à des expériences de transfection de l'hôte, permettant l'introduction de matériel génétique exogène dans les cellules à diverses fins de recherche.

Limites

Après les avantages, voyons les limites associées à l'utilisation des lignées cellulaires Jurkat E6.1 :

Transfection des cellules avec un vecteur viral
La transfection des cellules Jurkat E6.1 est un défi en raison de leur origine lymphocytaire. En général, la modification génétique nécessite des vecteurs viraux coûteux et longs à mettre en œuvre. Les vecteurs non viraux ont montré une faible efficacité de transfection et une toxicité importante dans les cellules Jurkat.
Contamination bactérienne
Les cultures de cellules Jurkat E6.1 doivent être surveillées pour éviter toute contamination bactérienne potentielle afin de garantir l'intégrité des résultats expérimentaux.
Contaminations virales
Les lignées cellulaires Jurkat E6.1 expriment divers récepteurs de chimiokines et de faibles niveaux de CD4, ce qui facilite l'entrée virale. Elles sont donc sensibles aux virus infectant les cellules T, tels que le HTLV et le VIH.

430,00 €*

Contenu : 1.5 milliliter

Prix hors taxes plus frais d'expédition

cryovial

Numéro de produit : 300223

6.ressources : Protocoles, vidéos et autres

Cette section couvre les méthodes et protocoles de culture cellulaire et de transfection, ainsi que les vidéos éducatives relatives à cette lignée cellulaire :

Protocoles de culture cellulaire

Voici quelques procédures de culture de base à suivre pour cette lignée cellulaire :

Cell Culture SOP, Propagation of Jurkat : L'Université de Californie a également fourni une méthode de culture du clone E6-1 de Jurkat sur son USCS Genome browser.
Jurkat, Clone E6-1 Culture et manipulation : Elabscience a inclus un protocole de culture et de manipulation sur son site de description des produits.

Protocoles de transfection

Voici la liste des différents protocoles de transfection disponibles :

Protocole de transfection des cellules Jurkat Réactif Lipofectamine LTX : Protocole de transfection des cellules Jurkat utilisant le réactif Lipofectamine LTX, de ThermoFisher.
Amaxa™ 4D-Nucleofector™ Protocol for Jurkat clone E6.1 [ATCC®] : Le Lonza Group AG a fourni le protocole de transfection pour Jurkat clone E6.1 de l'ATCC en utilisant l'unité 4D-Nucleofector® X.

Vidéos sur Jurkat E6.1

Il existe plusieurs excellentes vidéos couvrant les concepts de culture cellulaire, les procédures, la prolifération, l'ensemencement et d'autres sujets.

Passage des cellules :Les bases de la culture cellulaire: Il s'agit d'une excellente vidéo pour le guide de base du passage des lignées cellulaires humaines par ThermoFisher.
Décongélation des cellules : Les bases de la culture cellulaire : Cette vidéo fournit des instructions de base sur la culture et la décongélation des cellules par ThermoFisher.
Protocole de transfection de l'ADN plasmidique: Cette vidéo porte sur le protocole de transfection de l'ADN plasmidique avec la Lipofectamine® LTX et le réactif Plus™, par ThermoFisher.
Mesure de l'apoptose avec des cellules Jurkat en suspension traitées avec 3 micromolaires de staurosporine: Cette vidéo montre comment réaliser un test d'apoptose sur le cytomètre image Celigo en utilisant les réactifs Hoechst et caspase 3/7 de Nexcelom Bioscience.