Cellules B16-F10 - Exploration de la lignée cellulaire de mélanome B16-F10 dans la recherche sur les métastases
Les cellulesB16-F10 constituent une lignée cellulaire de mélanome issue de la souris C57BL/6J. Elles sont largement utilisées dans la recherche sur le cancer de la peau. Les chercheurs utilisent ces cellules pour étudier le développement et la progression des tumeurs et les interventions thérapeutiques. Cet article couvre les aspects fondamentaux des cellules de mélanome B16-F10. Il comprendra notamment
- Origine et caractéristiques générales de la lignée cellulaire B16-F10
- Informations sur la culture des cellules B16-F10
- Les cellules B16-F10 : Avantages et inconvénients
- Applications des cellules B16-F10 dans la recherche
- Publications comportant la lignée cellulaire B16-F10
- Ressources pour la lignée cellulaire B16-F10 : Protocoles, vidéos et autres
1. Origine et caractéristiques générales de la lignée cellulaire B16-F10
Cette section vous donnera un aperçu de l'origine et des caractéristiques distinctives des cellules tumorales de mélanome B16-F10. Elle vous aidera à utiliser efficacement la lignée cellulaire dans vos travaux de recherche. Vous apprendrez principalement Qu'est-ce que les cellules B16-F10 ? De quoi les cellules B16F10 sont-elles dérivées ? Quelle est la morphologie de la lignée cellulaire B16F12 ? Quelle est la taille de la cellule B16F10 ?
- B16-F10 est un sous-clone de la lignée cellulaire tumorale B16 dérivée du tissu cutané de la souris C57BL/6J. Les cellules de mélanome B16F10 ont été développées après injection intraveineuse de la lignée B16 à des souris immunodéprimées ou syngéniques. Ces cellules ont été sélectionnées pour leur capacité à former des colonies pulmonaires métastasées in vivo, puis établies après dix cycles de formation de colonies pulmonaires in vitro [1]. Elle a été mise au point par Fidler et ses collègues en 1976.
- Les lignées cellulaires B16-F10 ont un aspect épithélial et fusiforme.
- La taille approximative des cellules B16-F10 est de 15,4 ± 1,4 μm [2].
Cellules B16-F1 et B16-F10
Les cellules B16-F1 et B16-F10 sont dérivées de la lignée cellulaire parentale B16. Elles ont toutes deux la même origine et possèdent des caractéristiques presque similaires. Cependant, la principale différence réside dans leur capacité métastatique. Les cellules B16-F10 ont un potentiel métastatique élevé, tandis que les cellules B16-F1 ont un potentiel métastatique faible [3].
2.informations sur la culture des cellules B16-F10
Avant de manipuler et de cultiver une lignée cellulaire, vous devez connaître son temps de doublement, les milieux de croissance, les conditions et les protocoles de culture cellulaire. Cette section aborde les points suivants : Quel est le temps de doublement des cellules B16-F10 ? Comment cultiver les cellules B16F10 ? Quel est le milieu de culture des cellules B16-F10 ? Quelles sont les conditions de culture recommandées pour les cellules B16-F10 ?
Points clés pour la culture des cellules B16-F10
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Temps de doublement : |
Le temps de doublement des cellules B16-F10 est d'environ 20,1 heures. Il peut varier de 17 à 21 heures, selon les conditions de culture. |
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Adhérentes ou en suspension : |
B16-F10 est une lignée cellulaire adhérente. Les cellules se développent rapidement et forment des monocouches. |
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Rapport de division : |
Les cellules B16-F10 sont sous-cultivées à un ratio de division de 1:2 à 1:4. Les cellules sont lavées avec un tampon phosphate salin (1x) puis incubées avec la solution de passage Accutase pendant 8 à 10 minutes à température ambiante. Les cellules sont ajoutées à du milieu frais et centrifugées. Le culot cellulaire récolté est à nouveau remis en suspension et les cellules sont réparties dans le nouveau flacon contenant le milieu de culture frais selon le ratio de division. |
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Milieu de croissance : |
Les cellules B16-F10 sont cultivées dans le milieu DMEM. Le milieu est supplémenté avec 10% de FBS, 4 mM de L-Glutamine, 1,5 g/L de NaHCO3, 4,5 g/L de Glucose et 1,0 mM de pyruvate de sodium pour une croissance cellulaire idéale. Le milieu doit être remplacé 2 à 3 fois par semaine. |
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Conditions de croissance : |
Les cellules B16-F10 sont cultivées dans un incubateur humidifié à 37 °C avec un apport de 5 % de CO2. |
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Stockage : |
Les cellules congelées sont conservées à une température inférieure à -150 °C dans un congélateur électrique à ultra-basse température ou dans la phase vapeur de l'azote liquide afin de maintenir la viabilité des cellules. |
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Processus de congélation et milieu : |
Les cellules B16-F10 sont congelées dans les milieux CM-1 ou CM-ACF pour le stockage. Pour cela, il est recommandé d'utiliser un processus de congélation lent qui ne permet qu'une baisse de température de 1°C par minute afin d'éviter que les cellules ne subissent un choc. |
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Processus de décongélation : |
Les cellules B16-F10 congelées sont décongelées dans un bain-marie préréglé à 37°C pendant 40 à 60 secondes. Ensuite, les cellules sont ajoutées à un milieu frais et centrifugées pour éliminer les composants du milieu de congélation. Les cellules recueillies sont remises en suspension dans un milieu de croissance et versées dans des flacons pour la culture. |
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Niveau de biosécurité : |
Un laboratoire de niveau de biosécurité 1 est nécessaire pour manipuler et maintenir la lignée cellulaire B16-F10. |
3.cellules B16-F10 : Avantages et inconvénients
Comme d'autres lignées cellulaires, la lignée B16-F10 présente également des avantages et des inconvénients. Cette section présente quelques avantages et inconvénients significatifs de cette lignée cellulaire de mélanome cutané.
Avantages
La lignée cellulaire B16-F10 est largement utilisée dans la recherche sur le cancer. Les avantages des cellules B16-F10 sont les suivants :
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Potentiel métastatique |
Les cellules B16-F10 du mélanome de la peau présentent un potentiel métastatique élevé, ce qui les rend précieuses pour l'étude des métastases du cancer et des mécanismes sous-jacents. |
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Modèle tumoral in vitro |
Les cellules B16-F10 servent de modèle in vitro pour l'étude de la progression et de la croissance du cancer, aidant les chercheurs à comprendre les mécanismes cellulaires et moléculaires à l'origine du cancer. |
Inconvénients
Les inconvénients associés à la lignée cellulaire B16-F10 sont les suivants :
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Lignée cellulaire dérivée de la souris |
La lignée cellulaire B16-F10 est dérivée de la souris, ce qui limite son applicabilité à des études spécifiques à l'homme. Les résultats de la recherche obtenus à partir de ces cellules ne sont pas toujours réellement transposables à la biologie humaine. |
4.applications de la recherche sur les cellules B16-F10
La lignée cellulaire B16-F10 est largement utilisée dans la recherche sur le cancer. Quelques applications prometteuses de cette lignée cellulaire sont présentées ici.
- Recherche sur le cancer : La lignée cellulaire B16-F10 est un modèle précieux pour étudier les processus des cellules cancéreuses, notamment la prolifération, l'invasion, la migration et la mort cellulaire ou l'apoptose. En outre, elle aide les chercheurs à mieux comprendre les mécanismes moléculaires et les voies qui régissent ces processus cellulaires. Une étude menée en 2018 a exploré le rôle du CCR5 (récepteur de chimiokine C-C de type cinq) dans la transition des cellules de mélanome de l'état épithélial à l'état mésenchymateux et dans les métastases. Les résultats ont révélé que la déficience en CCR5 limite la croissance tumorale et les métastases, tandis qu'une forte expression entraîne une augmentation de la croissance et des métastases des cellules B16-F10. D'autres recherches ont montré que CCR5 régule l'expression du TGFβ1, qui régule la signalisation PI3K/AKT/GSK3β pour favoriser la transition épithéliale-mésenchymateuse et la migration cellulaire [4].
- Test et développement de médicaments : Les cellules tumorales du mélanome B16F10 sont très agressives et conviennent donc pour tester des médicaments et des traitements antitumoraux potentiels. Les chercheurs utilisent ces cellules et évaluent l'effet de différents composés sur la croissance cellulaire, la prolifération et les métastases, ce qui facilite le développement de médicaments. Une étude réalisée en 2018 par Valentina Nanni et ses collègues a examiné les effets thérapeutiques de l'extrait hydroalcoolique de fleurs de Spartium junceum . L'étude a proposé que l'extrait de fleur soit efficace pour induire la sénescence dans les cellules B16-F10, ce qui conduit à la croissance cellulaire et à la suppression de la mélanogénèse ; il peut donc exercer des activités anticancéreuses potentielles [5].
5.publications mettant en vedette la lignée cellulaire B16-F10
Voici quelques publications de recherche significatives présentant la lignée cellulaire de mélanome B16-F10 :
Cette étude a été publiée dans Nutrients (2020). Elle propose que l'extrait éthanolique de Sorghum bicolor ait un effet anti-mélanogène sur les cellules de mélanome de la peau B16F10.
Le calcitriol inhibe la prolifération et induit potentiellement l'apoptose dans les cellules B16-F10
La recherche publiée dans Medical Science Monitor Basic Research (2022) propose que le calcitriol exerce des effets antitumoraux sur les cellules de mélanome B16-F10 en inhibant la prolifération et en induisant l'apoptose.
Cet article est publié dans Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Les résultats révèlent que les cardols, lipides résorcinoliques, exercent une cytotoxicité intense sur la lignée cellulaire B16-F10.
L'étude publiée dans Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) a exploré le potentiel antimétastatique de l'extrait d'exocarpe de Ginkgo biloba en utilisant des cellules B16-F10.
Cette recherche parue dans World Neurosurgery (2018) a proposé que la thymoquinone puisse être une thérapie efficace contre les lésions métastatiques intracérébrales car elle supprime la croissance des cellules B16-F10 et induit l'apoptose.
6.ressources pour la lignée cellulaire B16-F10 : Protocoles, vidéos et autres
Les cellules endothéliales B16F10 sont largement utilisées dans la recherche sur le cancer de la peau. Voici quelques ressources en ligne expliquant ses protocoles de culture et de transfection :
- Transfection de cellules de mélanome B16F10 : Ce tutoriel vidéo peut vous aider à apprendre le protocole de transfection des cellules B16-F10.
- Transfection des cellules B16-F10 : Ce document explique le protocole de transfection in vitro de l'ADN des cellules du mélanome cutané B16F10.
Le lien suivant contient le protocole de culture des cellules B16-F10 :
- B16-F10 subculturing (sous-culture de cellules B16-F10) : Ce site web contient des informations utiles sur les cellules tumorales de mélanome B16F10. Il comprend les milieux de croissance, le temps de doublement, les conditions de culture et le protocole de sous-culture des cellules, ainsi que la manipulation des cultures cryoconservées et prolifératives.
Références
- Poste, G., et al, Comparison of the metastatic properties of B16 melanoma clones isolated from cultured cell lines, subcutaneous tumors, and individual lung metastases. Cancer Research, 1982. 42(7) : p. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono, et S. Sugita, Mechanophenotyping of B16 Melanoma Cell Variants for the Assessment of the Efficacy of (-)-Epigallocatechin Gallate Treatment Using a Tapered Microfluidic Device. Micromachines, 2019. 10(3) : p. 207.
- Danciu, C., et al, Behaviour of four different B16 murine melanoma cell sublines : C57BL/6J skin. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2) : p. 73-80.
- Liu, J., et al, High expression of CCR5 in melanoma enhances epithelial-mesenchymal transition and metastasis via TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4) : p. 481-493.
- Nanni, V., et al, L 'extrait hydroalcoolique de fleurs de Spartium junceum L. inhibe la croissance et la mélanogenèse dans les cellules B16-F10 en induisant la sénescence. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.