Cellules endothéliales de la veine ombilicale humaine (HUVEC)
LesHUVEC sont des cellules endothéliales primaires qui constituent un outil essentiel pour la recherche biomédicale. Elles aident les chercheurs à étudier l'angiogenèse, la biologie vasculaire et des maladies comme l'athérosclérose et le cancer. Les HUVEC sont utilisées pour étudier le comportement des cellules endothéliales, les mécanismes de signalisation cellulaire et les tests de médicaments, ce qui permet d'obtenir des informations précieuses sur les thérapies ou traitements potentiels des maladies cardiovasculaires et du cancer. Elles servent également de système modèle pour les études de biologie vasculaire.
Cet article contient toutes les informations fondamentales dont vous avez besoin avant de travailler avec des cellules HUVEC. Il couvre les points suivants
- L'origine et les caractéristiques générales des cellules HUVEC
- Informations sur la culture de la lignée cellulaire HUVEC
- La lignée cellulaire HUVEC : Avantages et limites
- Applications des cellules HUVEC dans la recherche
- Publications présentant les cellules HUVEC
- Ressources pour la lignée cellulaire HUVEC : Protocoles, vidéos et autres
1. Origine et caractéristiques générales des cellules HUVECs
La connaissance de l'origine et des caractéristiques générales d'une lignée cellulaire est essentielle pour décider de son adéquation à votre étude. Cette section vous aidera à apprendre ces informations essentielles sur les cellules endothéliales HUVEC : À quoi servent les cellules HUVEC ? Quelle est la forme complète des cellules HUVEC ? Quelles sont les caractéristiques distinctives des cellules HUVEC ? Qu'est-ce que la morphologie de l'HUVEC ? Quel est le diamètre des HUVEC ? Quelle est la taille des cellules HUVEC ?
- Les cellules HUVEC sont extraites de l'endothélium de la veine du cordon ombilical humain.
- La morphologie des HUVEC est de type endothélial. Elles ont généralement une forme polygonale et un noyau rond au centre.
- La taille des cellules HUVEC est de 17 μm de diamètre.
- Ces cellules endothéliales sont diploïdes. Elles possèdent un nombre modal de chromosomes de 46.
HUVEC TERT2
HUVEC TERT2 est une lignée cellulaire immortalisée dérivée de cellules endothéliales primaires de la veine ombilicale humaine (HUVEC). Elle a été développée en introduisant le gène de la transcriptase inverse de la télomérase humaine (TERT) dans le génome des cellules HUVEC. Cette modification a contribué à prolonger leur durée de vie en culture, permettant des expériences à plus long terme sans les limitations associées aux HUVEC primaires.
Quelle est la différence entre HUVEC et HMEC-1 ?
La structure et la complexité des lignées de cellules endothéliales HUVEC et HMEC-1 sont comparables. Toutefois, les cellules HMEC-1 présentent une population plus homogène que les HUVEC en termes de taille et de granularité des cellules. Cela peut réduire les variations dans les données expérimentales.
2.informations sur la culture de la lignée cellulaire HUVEC
Cette section de l'article vise à vous fournir des connaissances essentielles sur la culture des cellules HUVEC. Cela vous aidera grandement à travailler avec ces cellules. Vous trouverez ici les réponses aux questions fréquemment posées : Quel est le temps de doublement des HUVEC ? Quelle est la densité d'ensemencement des HUVEC ? Combien de passages y a-t-il dans les HUVEC ? Qu'est-ce que le milieu cellulaire HUVEC ? Comment cultiver les HUVEC ?
Points clés pour la culture des cellules HUVEC
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Temps de doublement : |
Le temps de doublement des HUVEC est d'environ 23,5 heures. Néanmoins, il peut varier en fonction des conditions de culture cellulaire et du nombre de passages. |
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Adhérentes ou en suspension : |
Le HUVEC est une lignée cellulaire adhérente. Les cellules se développent et forment des monocouches. |
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Ratio de division : |
Le ratio de sous-culture pour les HUVEC est de 1:2 à 1:4. Pour l'ensemencement, les cellules sont lavées avec une solution saline tampon phosphate 1x et additionnées d'une solution de dissociation (Accutase) pendant 8 à 10 minutes à température ambiante. Ensuite, le milieu de culture est ajouté et les cellules détachées sont centrifugées. Le surnageant est éliminé et le culot cellulaire est soigneusement remis en suspension. Les cellules sont distribuées dans un nouveau flacon de culture pour la croissance. |
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Milieu de croissance : |
Le milieu de croissance des cellules endothéliales est utilisé pour la culture des cellules HUVEC. Le milieu est remplacé tous les 2 ou 3 jours. Les cellules HUVEC peuvent être utilisées jusqu'à 8-10 passages. |
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Conditions de croissance : |
La lignée de cellules endothéliales humaines (HUVEC) est maintenue dans un incubateur humidifié avec 5% de CO2 à 37°C. |
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Stockage : |
Les cellules HUVEC sont généralement conservées à une température inférieure à -150 °C dans un congélateur à ultra-basse température ou dans la phase vapeur de l'azote liquide. La viabilité des cellules est ainsi préservée à plus long terme. |
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Processus de congélation et milieu : |
Pour conserver les cellules HUVEC, il est conseillé d'utiliser le milieu de congélation CM-1 ou CM-ACF. En général, un processus de congélation lent est recommandé car il ne permet qu'une baisse de température de 1 °C par minute, ce qui empêche les cellules de subir un choc et préserve leur viabilité. |
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Processus de décongélation : |
Pour décongeler des cellules congelées, les placer dans un bain d'eau préchauffé à 37°C pendant 40 à 60 secondes jusqu'à ce qu'il ne reste plus qu'un petit amas de glace. Ensuite, ajoutez du milieu frais dans les cellules et centrifugez. Cette étape est nécessaire pour retirer les cellules et éliminer tout résidu de milieu de congélation. Remettre en suspension le culot cellulaire et transférer les cellules dans un nouveau flacon avec le milieu de culture. |
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Niveau de biosécurité : |
Un laboratoire de niveau de biosécurité 1 est nécessaire pour manipuler correctement les cultures de cellules HUVEC. |
3. Avantages et limites
Comme les autres lignées cellulaires humaines, les cellules HUVEC ont leurs propres avantages et limites. Dans cette section, nous allons nous pencher sur certaines d'entre elles qui ont un impact significatif sur leur utilisation dans la recherche.
Avantages des cellules HUVEC
Les principaux avantages des cellules HUVEC sont les suivants :
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Modèle de cellule endothéliale
Modèles très pertinents pour l'étude de l'angiogenèse, de la biologie vasculaire et des maladies liées à la fonction endothéliale.
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Facilité de culture
Relativement faciles à isoler à partir de cordons ombilicaux humains. Les exigences en matière de culture cellulaire sont peu contraignantes et les laboratoires de recherche peuvent facilement les entretenir.
Limites
Les limites associées à la lignée de cellules endothéliales HUVEC sont les suivantes :
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Durée de vie limitée
Les HUVEC ont une durée de vie limitée, généralement de 8 à 10 passages, ce qui constitue une limite pour les expériences à long terme. Elles peuvent subir une sénescence au fur et à mesure que le nombre de passages augmente.
4. Applications des cellules HUVEC dans la recherche
Les cellules HUVEC présentent un potentiel important pour diverses applications dans le domaine biomédical. Nous présentons ici quelques utilisations importantes des cellules HUVEC dans le domaine de la recherche.
- Études sur les maladies cardiovasculaires : La lignée cellulaire HUVEC est un modèle de cellules endothéliales précieux, qui permet de comprendre les mécanismes sous-jacents aux maladies cardiovasculaires telles que l'athérosclérose, la thrombose et l'hypertension. Les chercheurs utilisent ces cellules pour étudier les mécanismes qui sous-tendent le dysfonctionnement endothélial, le stress oxydatif et l'inflammation. Par exemple, une étude menée en 2020 sur des HUVEC a révélé que le long ARN non codant TTTY15 joue un rôle essentiel dans l'amélioration des lésions des cellules endothéliales vasculaires provoquées par l'hypoxie en ciblant l'axe miRNA-186-5p [1].
- Recherche sur le cancer : Les HUVEC sont idéales pour étudier la biologie vasculaire. Elles sont donc utilisées pour étudier l'angiogenèse tumorale et les interactions entre les cellules endothéliales. Cela aide les chercheurs à comprendre comment les tumeurs obtiennent un surplus de sang et prolifèrent. Par exemple, Hui Wang et ses collègues ont découvert que les exosomes libérés par les cellules de carcinome épidermoïde oral (OSCC) augmentent les niveaux de miRNA-210-3p et diminuent l'expression de l'éphrine A3 dans les cellules HUVEC et favorisent la formation de tubes en régulant la cascade PI3K/AKT, comme l'a confirmé le test de formation de tubes HUVEC [2].
- Test de médicaments : Les cellules endothéliales HUVEC sont largement utilisées pour tester les médicaments. Les chercheurs peuvent évaluer l'efficacité, la toxicité et les effets secondaires potentiels des composés naturels, des nanoparticules et d'autres agents thérapeutiques in vitro en utilisant les HUVEC. Par exemple, une étude a évalué la toxicité de nanoparticules d'argent synthétisées à partir d'un extrait de Rheum ribes en utilisant des cellules HUVEC [3].
5. Publications comportant des cellules HUVEC
Cette section de l'article énumère quelques publications de recherche intéressantes et fréquemment citées concernant les cellules HUVEC.
Cette étude a été publiée dans Comparative Biochemistry and Physiology Part C : Toxicology & Pharmacology (2019). Elle indique que l'acide gamma-aminobutyrique (GABA), un neurotransmetteur, inhibe le stress oxydatifinduit parH2O2 dans les cellules HUVEC ; il pourrait donc s'agir d'un agent pharmacologique efficace contre les maladies cardiovasculaires liées aux dommages oxydatifs.
Cette étude parue dans Biochemical and Biophysical Research Communications (2020) explore la manière dont les œstrogènes régulent un transducteur de signaux, la glycoprotéine 130 (gp130) dans les cellules HUVEC.
Cet article de recherche paru dans le Journal of Cellular Physiology (2017) a étudié les effets de la variation de la rigidité du substrat sur la migration et l'angiogenèse des cellules endothéliales (A549 et HUVECs). Ils ont réalisé les essais de migration HUVEC et d'angiogenèse HUVEC pour évaluer ces effets.
Le dépôt lysosomal de nanoparticules d'oxyde de cuivre déclenche la mort des cellules HUVEC
Cette recherche parue dans Biomaterials (2018) étudie les mécanismes potentiels responsables de la toxicité des nanoparticules d'oxyde de cuivre dans les cellules endothéliales vasculaires.
Cette étude parue dans Medicine (2020) propose qu'un composé naturel, la quercétine, supprime l'apoptose et l'inflammation des HUVECs induites par le TNF-alpha en régulant les voies de signalisation AP-1 et NF-kB.
6. Ressources pour la lignée cellulaire HUVEC : Protocoles, vidéos et autres
Voici quelques ressources en ligne disponibles sur les cellules HUVEC.
- Transfection des cellules HUVEC : Ce site web fournit des informations complètes sur la transfection des cellules HUVEC. Il contient par exemple des informations sur les réactifs de transfection et un protocole pour la transfection in vitro des HUVEC.
Le lien suivant contient le protocole de culture des cellules HUVEC.
- Culture de cellules HUVEC: Ce document vous aidera à apprendre les protocoles de culture de cellules HUVEC pour la sous-culture et la manipulation de cultures cryoconservées.
Références
- Zheng, J., et al, LncRNA TTTY15 regulates hypoxia-induced vascular endothelial cell injury via targeting miR-186-5p in cardiovascular disease. European Review for Medical & Pharmacological Sciences, 2020. 24(6).
- Wang, H., et al, OSCC exosomes regulate miR-210-3p targeting EFNA3 to promote oral cancer angiogenesis through the PI3K/AKT pathway. BioMed research international, 2020. 2020.
- Unal, İ. et S. Egri, B iosynthesis of silver nanoparticles using the aqueous extract of Rheum ribes, characterization and the evaluation of its toxicity on HUVECs and Artemia salina. Inorganic and Nano-Metal Chemistry, 2022 : p. 1-14.