Wilms11-solut

800,00 €*

Tuotteet toimitetaan jäädytettyinä kuivajäässä kryoputkissa. Jokainen kryoputki sisältää tyypillisesti 3 × 10 ⁶ solua adheesiivisille soluille tai 5 × 10⁶ solua suspensiosoluille (katso lisätietoja erän CoA-todistuksesta).

Hinnat ilman veroja ja toimituskuluja

cryovial

Tuotenumero: 300420

Käyttöturvallisuustiedote

Tuoteseloste

Analyysitodistus (CoA)

Materiaalin siirtosopimus

Kuvaus	Wilms11-solulinja on peräisin lapsipotilaan primaarisesta Wilmsin kasvaimesta (nefroblastooma). Toisin kuin monille muille Wilmsin kasvainsolulinjoille, Wilms11:lle on ominaista, että siinä esiintyy villityyppistä WT1:tä, mikä tarkoittaa, että siinä ei ole mutaatioita WT1-geenissä, mikä tyypillisesti liittyy aggressiivisempiin tai stroomaperäisiin Wilmsin kasvaimiin. Wilms11-kasvaimessa oli kuitenkin merkittävää stroomaalista erilaistumista, ja siinä oli laajoja rabdomyomatoottisia erilaistumisalueita, jotka viittaavat mesenkiomaalisiin elementteihin kasvaimessa. Villin tyypin WT1:n esiintyminen yhdessä kasvaimen stroomaalisen erilaistumisen kanssa tarjoaa ainutlaatuisen mallin Wilmsin kasvainten biologian ymmärtämiseksi tapauksissa, joissa WT1-mutaatioita ei ole. Wilmsin11 geneettiset tutkimukset ovat osoittaneet, että tässä solulinjassa on kasvainspesifinen mutaatio CTNNB1:ssä, joka koodaa β-kateniinia, jolla on ratkaiseva rooli Wnt-signalointireitillä. Wilms11:ssä tämä mutaatio vaikuttaa seriini 45:een, joka on keskeinen fosforylaatiokohta, joka osallistuu β-kateniinin hajoamiseen. CTNNB1-mutaatio johtaa β-kateniinin stabiloitumiseen, mikä johtaa sen kertymiseen ja solujen proliferaatiota ja kasvainten syntyä edistävän Wnt-signalointireitin konstitutiiviseen aktivoitumiseen. Tämä tekee Wilms11:stä tärkeän mallin Wnt-signaloinnin ja Wilmsin kasvainten kehittymisen välisen vuorovaikutuksen tutkimiseen, erityisesti tapauksissa, joissa WT1 säilyy ehjänä. Wilms11:n proteomianalyysit ovat paljastaneet useiden reseptorityrosiinikinaasien (RTK), kuten PDGFRβ:n ja AXL:n, aktivoituneen, ja ne osallistuvat kasvainsolujen kasvun ja eloonjäämisen ohjaamiseen. Wilms11-soluissa aktivoituvat myös alempana olevat signaalireitit, kuten MAPK- ja PI3K/AKT-reitit, jotka vaikuttavat osaltaan niiden tumorigeeniseen käyttäytymiseen. Wilms11-solujen kyky erilaistua mesenkymaalisesti, erityisesti rabdomyomatoottisesti, korostaa niiden potentiaalia mallina Wilmsin kasvaimen mesenkymaalisten komponenttien tutkimisessa. Kaiken kaikkiaan Wilms11 toimii arvokkaana välineenä tutkittaessa molekyylimekanismeja, jotka ohjaavat Wilmsin kasvainten syntyä ilman WT1-mutaatioita mutta Wnt-reitin aktivoitumisen yhteydessä.
Organismi	Ihminen
Kudos	Munuaiset
Tauti	Wilmsin kasvain
Sovellukset	In vitro -soluviljelymalli. Biokemialliset tutkimukset

Ikä	22 kuukautta
Sukupuoli	Mies
Etnisyys	Kaukasialainen
Morfologia	Karanmuotoinen
Solutyyppi	Wilmsin solut
Kasvuominaisuudet	Tarttuva

Viittaus	Wilms11 (Cytionin luettelonumero 300420)
Bioturvallisuustaso	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusLiittyminen	CVCL_A5SM

Mutaatioprofiili	WT1-mutaatiotilanne: homotsygoottinen WT1 c.901c>T, p.R301x. LOH: . CTNNB1-mutaation tila: villi tyyppi

Viljelyalusta	MSCGM-pakkaus (Lonza)
Dissosiaatioreagenssi	Accutase
Alakulttuuri	Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreessa väliaineessa ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Jäädytä väliaine	Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Solujen sulattaminen ja viljely	Varmista, että injektiopullo pysyy syväjäädytettynä toimitettaessa, sillä solut kuljetetaan kuivajäässä, jotta optimaalinen lämpötila säilyy kuljetuksen aikana. Vastaanotettaessa kryopullo joko säilytetään välittömästi alle -150 °C:n lämpötilassa solujen eheyden säilyttämiseksi tai edetään vaiheeseen 3, jos tarvitaan välitöntä viljelyä. Välitöntä viljelyä varten sulata injektiopullo nopeasti upottamalla se 37 °C:n vesihauteeseen, jossa on puhdasta vettä ja antimikrobista ainetta, ja sekoittamalla sitä varovasti 40-60 sekunnin ajan, kunnes jäästä on jäljellä pieni jäämöhkäle. Suorita kaikki seuraavat vaiheet steriileissä olosuhteissa virtaushupussa ja desinfioi kryopullo 70-prosenttisella etanolilla ennen avaamista. Avaa desinfioitu injektiopullo varovasti ja siirrä solususpensio 15 ml:n sentrifugiputkeen, joka sisältää 8 ml huoneenlämpöistä elatusainetta, varovasti sekoittaen. Sentrifugoi seosta 300 x g:n voimakkuudella 3 minuutin ajan solujen erottamiseksi ja hävitä varovasti supernatantti, joka sisältää jäännöspakastusmediumia. Suspendoidaan solupelletti varovasti uudelleen 10 ml:aan tuoretta elatusainetta. Jos solut ovat tarttuvia, jaa suspensio kahden T25-kolvin kesken; jos kyseessä ovat suspensioviljelmät, siirrä kaikki väliaine yhteen T25-kolviin solujen tehokkaan vuorovaikutuksen ja kasvun edistämiseksi. Noudata vakiintuneita aliviljelyprotokollia solulinjan jatkuvan kasvun ja ylläpidon varmistamiseksi ja luotettavien kokeellisten tulosten varmistamiseksi.
Inkubaatioilmapiiri	37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.
Pullon pinnoite	Ei mitään
Jäädytysmenettely	Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
Toimitusehdot	Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
Varastointiolosuhteet	Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Steriliteetti	Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä. Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Erän numero	Todistuksen tyyppi	Päivämäärä	Luettelonumero
300420-221	Analyysitodistus	23. May. 2025	300420
300420-240226	Analyysitodistus	25. Mar. 2026	300420

Jos aiot käyttää Cytion-solulinjoja yksinomaan sisäiseen tutkimukseen yhdellä tutkimuspaikalla, täytä ja allekirjoita materiaalinsiirtosopimus (MTA) ja lähetä se tilauksesi mukana.

Kaikissa kaupallisissa sovelluksissa – mukaan lukien mutta ei rajoittuen maksullisiin palveluihin, laadunvalvontatestaukseen, tuotteiden julkaisemiseen, diagnostiseen käyttöön tai sääntelytutkimuksiin – täytä käyttötarkoituksen lomake, jotta voimme laatia projektiisi sopivan sopimuksen.

Huomaa: MTA koskee vain tiettyjä solulinjoja. Jos tämä ilmoitus ja MTA-asiakirja näkyvät tuotesivulla, sopimus on voimassa. Solulinjoille, joita MTA ei koske, sopimusta ei mainita. MTA ei ole voimassa asiakkaille Amerikassa, Kiinassa tai Taiwanissa. Ota yhteyttä Yhdysvaltain yksikköömme saadaksesi sopivan sopimuksen.

Wilms11-solut

Yleisiä tietoja

Ominaisuudet

Sääntelytiedot

Biomolekyylitiedot

Käsittely

Laadunvalvonta / Geneettinen profiili / HLA

Analyysitodistus (CoA)

Materiaalin siirtosopimus