Accutase-solujen irrotusliuos – 100 ml

Accutase-solujen irrotusliuos, sisältää EDTA:ta ja fenolipunaväriainetta – 100 ml

Accutase on käyttövalmis, steriilisti suodatettu solujen irrotusliuos, joka on suunniteltu hellävaraiseksi vaihtoehdoksi trypsiinille/EDTA:lle kiinnittyneiden nisäkässolujen irrottamiseksi tavallisista kudosviljelymuovivälineistä ja tarttuviksi pinnoitetuista pinnoista. Se yhdistää proteolyyttisen ja kollageenolyyttisen entsyymiaktiivisuuden tasapainotetussa suolaliuoksessa tehokkaan mutta hallitun irrottamisen aikaansaamiseksi, säilyttäen solupinnan proteiinit ja tukien korkeaa elinkelpoisuutta siirron jälkeen sekä nopeaa uudelleenkiinnittymistä.

Accutase-valmiste perustuu Dulbeccon fosfaattipuskuroituun suolaliuokseen (DPBS), jossa on EDTA:ta ja fenolipunainen visuaalisena pH-indikaattorina. Entsyymit ovat peräisin muista kuin nisäkkäistä tai bakteereista, minkä vuoksi Accutase sopii erityisen hyvin kantasolututkimukseen, rokotetyönkulkuihin ja muihin sovelluksiin, joissa eläin- tai mikrobiperäisten kontaminanttien määrä on minimoitava. Liuos estää itsensä 37 °C:ssa, joten irrottamisen jälkeen ei tarvita neutraloivia reagensseja tai seerumia sisältävää elatusainetta – solut voidaan siirtää suoraan tuoreeseen elatusaineeseen.

Tärkeimmät ominaisuudet

• Käyttövalmis 1x steriilisuodatettu neste – laimentamista tai rekonstituointia ei tarvita
• Yhdistetty proteolyyttinen ja kollageenolyyttinen entsyymiaktiivisuus hellävaraista irrottamista varten
• Jokainen erä on standardoitu määriteltyyn irrottamisaktiivisuuteen eräkohtaisen yhdenmukaisuuden varmistamiseksi
• Entsyymit eivät ole peräisin nisäkkäistä tai bakteereista
• Inhiboi itsensä 37 °C:ssa – neutralointiliuosta ei tarvita
• Valmistettu Dulbeccon PBS:ssä EDTA:n kanssa
• Sisältää fenolipunaisen visuaalisena pH-indikaattorina
• pH 6,8–7,8

Tyypillisiä käyttökohteita

Accutase irrottaa hellävaraisesti monenlaisia kiinnittyneitä ja herkkiä solutyyppejä, mukaan lukien ihmisen alkion kantasolut (hESCs), ihmisen indusoidut pluripotentit kantasolut (iPSCs), hermoston kantasolut, primaariset neuronit sekä rutiinikäytössä olevat kiinnittyneet solulinjat, kuten HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 ja A549. Tyypillisiä käyttötapauksia ovat:

• Adheesiivisten nisäkässolujen rutiininen aliviljely ja siirto
• HES-solujen, iPS-solujen ja muiden herkkien solulinjojen hellävarainen yksittäisten solujen irrottaminen
• Näytteiden valmistelu virtaussytometriaa ja FACS-analyysiä varten
• Solupintamarkkerien analysointi, jossa epitopin eheys on tärkeää
• Solujen migraatio-, proliferaatio- ja apoptoosimääritykset
• Lepotilan määritykset seerumin puutteella ja onkogeenien transfektiotutkimukset
• Kasvainsolujen ja hermostopäällysteen solujen migraatiomääritykset
• Tuotannon laajentaminen bioreaktoriprosesseissa

Rutiinityössä levitä noin 10 ml Accutasea 75 cm²:n viljelypinta-alaa kohti ja inkuboi 5–10 minuuttia huoneenlämmössä. Optimaalinen inkubointiaika on määritettävä kullekin solulinjalle erikseen, eikä se saa ylittää yhtä tuntia. Ennen lisäystä huuhtele solukerros Ca²⁺/Mg²⁺-v^apaalla suolaliuoksella, kuten kalsiumia ja magnesiumia sisältämättömällä DPBS:llä, jotta poistat jäljellä olevan seerumin ja kaksiarvoiset kationit.

Käsittely ja säilytys

Säilytä avaamatonta pulloa pakastettuna -15 °C:ssa tai sitä alemmassa lämpötilassa. Sulata joko huoneenlämmössä tai yön yli +2 °C:ssa – +8 °C:ssa. Älä sulata Accutasea 37 °C:n vesihauteessa, sillä korkeat lämpötilat heikentävät entsyymiaktiivisuutta. Sulatuksen jälkeen liuosta voidaan säilyttää enintään 2 kuukautta +2 °C:ssa – +8 °C:ssa; älä säilytä huoneenlämmössä. Älä lämmitä reagenssia 37 °C:seen ennen käyttöä – lisää se suoraan pestyihin soluihin huoneenlämmössä. Pitkän säilyvyyden takaamiseksi suositellaan kertakäyttöisten alikvojen käyttöä, jotta vältytään toistuvilta sulatusjaksoilta. Työskentele aina aseptisissa olosuhteissa.

Laatu

Valmistettu tiukkojen laatustandardien mukaisesti. Jokainen Accutase-erä on steriilisuodatettu ja testattu steriilisyyden, pH:n, ulkonäön ja dissosiaatioaktiivisuuden osalta, jotta varmistetaan erästä toiseen yhdenmukainen ja toistettava suorituskyky.

Tuotetiedot

Koostumus (koostumus litraa kohti)

Accutase on Innovative Cell Technologies, Inc:n rekisteröity tavaramerkki.