"Passage Number" -luvun ymmärtäminen

Käsite "passage number" on keskeinen soluviljelyssä, ja sillä tarkoitetaan sitä, kuinka monta kertaa solulinja on subkulturoitu tai siirretty tuoreeseen kasvualustaan sen jälkeen, kun se on alun perin herätetty henkiin kryosäilytyksestä tai saatu vertailusolupankista. Tämä mittari on keskeinen soluviljelmän sukupuun ja historian seurannassa.

Prosessin yleiskatsaus

• Kun solut saavuttavat tietyn tiheyden, ne siirretään rutiininomaisessa soluviljelykäytännössä uuteen väliaineeseen kasvun ylläpitämiseksi ja ylikasvun estämiseksi. Kukin tällainen siirto kirjataan siirtona.
• Perinteisesti, kun saimme tallettajalta solulinjan, esimerkiksi solupassagessa 60, jatkoimme tästä passageluvusta lähtien ja kasvatimme sitä jokaisella subkulttuurilla. Tämä käytäntö, joka säilytti historiallisen säikeen, johti usein korkeisiin passage-lukuihin alusta alkaen. Koska tiettyjä solulinjoja, kuten vuonna 1951 perustettua HeLa-solulinjaa, käytetään laajasti ja usein vuosikymmeniä, ei ole mahdollista määrittää solulinjan perustamisesta lähtien tehtyjen passagointien kokonaismäärää.
• Parantaaksemme soluviljelyprosessiemme selkeyttä ja laatua tarkistimme tätä lähestymistapaa vuoden 2023 alussa. Nyt kun aloitamme viljelyn uudesta injektiopullosta, riippumatta tallettajan antamasta passage-numerosta, nollaamme ja aloitamme laskennan alusta jokaisen valmistetun erän osalta

Perustelut

Läpikäynti on elintärkeä menettely, jolla varmistetaan soluviljelmien terveys ja käyttökelpoisuus tutkimuksessa. Kun solut kasvavat liikaa, ne kärsivät kontakti-inhibitiosta, mikä vähentää niiden lisääntymisnopeutta, mikä voi vaikuttaa haitallisesti kokeellisiin tuloksiin. Näiden ongelmien lieventämiseksi Cytion valvoo tiukasti solutiheyksiä, joilla subkultivointi tapahtuu, ja ylläpitää näin alhaisia läpivirtauslukuja solulinjojensa valmistuksen aikana. Tämä varotoimenpide auttaa estämään liiallisen passivoinnin haittavaikutuksia, kuten morfologisia poikkeavuuksia, kasvunopeuden muutoksia ja geneettistä ajautumista, jotka voivat aiheuttaa solujen huomattavia eroja niiden alkuperäisestä tilasta. Pitkät subkulturointijaksot voivat myös lisätä mikrobikontaminaation riskiä.

Lupauksemme

Varmistamme, että tutkijoille toimitettavat solut ovat mahdollisimman lähellä alkuperäistä geneettistä koostumusta ja fenotyyppisiä ominaisuuksia, mikä parantaa kokeellisten tietojen luotettavuutta. Lisäksi Cytion dokumentoi jokaisen solupassin huolellisesti ja edistää näin tutkimuksen jäljitettävyyttä ja toistettavuutta, mikä on osoitus soluviljelyn korkeista käytännesäännöistä. Tutkijoita kannustetaan pitämään tarkkaa kirjaa läpivientien numeroista sekä viljelyastioissa että laboratoriokirjoissaan, jotta he voivat seurata soluviljelmiensä terveyttä ja historiaa.