U87MG-solut - U87MG:tä käyttävä glioblastomatutkimus ja sen vaikutus aivosyöpätutkimuksiin
U-87 MG, ihmisen primaarinen glioblastoomasolulinja, on laajalti käytössä biologisessa tutkimuksessa. Erityisesti näitä soluja käytetään neurotieteiden ja immuno-onkologian aloilla.
U-87 MG -solulinjan yleiset ominaisuudet ja alkuperä
Tässä jaksossa käsitellään U87-87-solulinjan alkuperää ja yleisiä ominaisuuksia. Opit Mitä U-87 MG-solut ovat? Mistä U87-solut ovat peräisin? Mikä on U-87 MG:n täysmuoto? Kuinka suuria U87-solut ovat? Mikä on U87-solulinjan morfologia?
- U87-solulinja on glioblastooma-, astrosytooma-solulinja. Se perustettiin vuonna 1966 Uppsalan yliopistossa. Solut saatiin 44-vuotiaalta valkoihoiselta mieheltä, joka sairasti glioblastoomaa. Tätä solulinjaa kutsutaan virallisesti nimellä U 87 MG, joka tarkoittaa Uppsala 87 Malignant Glioma.
- U 87 MG:n solut edustavat epiteelisolujen kaltaista morfologiaa.
- U 87 MG:n solujen koko on halkaisijaltaan 12-14 µm.
- Tämä ihmisen glioblastoomasolulinja on hypodiploidinen, ja sen solupopulaatiosta noin 48 prosentilla on kromosomiluku 44. Tämä solulinjan solulinja on hypodiploidinen. Kuitenkin 5,9 prosentissa solupopulaatiosta esiintyy myös korkeampia ploideja.
U-87 MG-solujen viljelyä koskevat tiedot
Ennen kuin työskentelet U 87 MG-solujen kanssa, sinun on hyvä tutustua seuraaviin keskeisiin seikkoihin näiden glioblastoomasolujen viljelyssä. Erityisesti sinun tulisi tietää: Mikä on U 87 MG-solujen populaation kaksinkertaistumisaika? Mitä elatusainetta käytetään U87-solujen viljelyyn? Mikä on U 87 MG -solulinjan kylvötiheys?
U-87 MG-solujen viljelyä koskevat keskeiset seikat
|
Populaation kaksinkertaistumisaika: |
U 87 MG-solujen populaation kaksinkertaistumisaika vaihtelee 18-38 tunnin välillä. |
|
Adheesiossa tai suspensiossa: |
U 87 MG on tarttuva solulinja. Soluilla on pitkänomainen muoto ja ne kasvavat yksikerroksisina. |
|
Kylvötiheys: |
Glioblastoomasolulinja U 87 MG suositellaan kylvettäväksi solutiheydellä 1 x104 solua/cm2. Tarttuvat U87-solut pestään 1 x PBS:llä ja inkuboidaan Accutase-liuoksella. Tämän jälkeen dissosioituneet solut sentrifugoidaan ja otetaan talteen. Solut resuspendoidaan varovasti ja lisätään uusiin kasvualustaa sisältäviin pulloihin. |
|
Kasvualusta: |
U 87 MG-solulinjaa viljellään EMEM:ssä (Eagle's minimal essential medium), johon on lisätty 1,0 g/l L-glukoosia, 2,0 mM L-glutamiinia, 2,2 g/l NaHCO3:a, 1 % NEAA:ta, 1 mM natriumpyruvaattia ja 10 % FBS-liuosta. Väliaine on uusittava 2-3 päivän välein. |
|
Kasvuolosuhteet: |
U-87 MG-solut tarvitsevat kosteutetun inkubaattorin, jossa on 5 % CO2-lisäys ja 37 °C:n lämpötila optimaalisen kasvun varmistamiseksi. |
|
Varastointi: |
U87-solut säilytetään joko nestemäisen typen höyryfaasissa tai alle -150 °C:n lämpötilassa glioblastoomasolujen maksimaalisen elinkelpoisuuden säilyttämiseksi. |
|
Pakastusprosessi ja väliaine: |
CM-1- tai CM-ACF-pakastusmedia soveltuu U 87 MG-solujen pakastamiseen. Hidas pakastusprosessi on suositeltava, koska se estää solujen sokin ja suojaa solujen elinkelpoisuutta. |
|
Sulatusprosessi: |
Pakastetut U-87 MG -solulinjan injektiopullot sulatetaan 37 °C:n vesihauteessa. Soluihin lisätään kasvualustaa, ne suspendoidaan uudelleen ja annostellaan viljeltäväksi uusiin pulloihin. Toisin kuin U87-solut voidaan sentrifugoida pakastusmedian poistamiseksi ja sitten viljellä. |
|
Bioturvallisuustaso: |
U 87 MG-soluviljelmien käsittelyssä vaaditaan bioturvallisuustaso 1. |
U-87 MG-kennojen edut ja haitat
Kun ajattelemme solulinjaa, ensimmäinen asia, joka tulee mieleemme, on: Mitä etuja U-87 MG-solujen käytöstä on? Mitkä ovat U87-solujen haitat?
Edut
U 87 MG-solulinjoja käytetään laajasti tutkimuksessa. Muutamia tähän solulinjaan liittyviä etuja ovat:
Edut
- Helppo kasvattaa: U 87 MG-solut on helppo ylläpitää viljelyssä. Ne eivät vaadi hankalia tai monimutkaisia soluviljelyvaatimuksia
- Homogeenisuus: U-87 MG on homogeeninen solulinja. Useimmilla populaation soluilla on sama geneettinen perimä ja siten samanlaiset ominaisuudet. Näitä soluja käytetään soluprosessien tutkimiseen, lääkkeiden seulontaan ja testaukseen
- Hyvin karakterisoitu: Tämä glioblastoomasolulinja on hyvin karakterisoitu kasvuominaisuuksien, morfologian ja geeniekspression perusteella, mikä tekee siitä arvokkaan tutkimusvälineen
Haitat
- Rajoitettu sovellettavuus: U 87 MG on glioblastoomasolulinja, joten sen sovellukset rajoittuvat ensisijaisesti glioblastoomien ja niiden taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen. Se ei välttämättä sovellu muiden syöpätyyppien tutkimiseen.
Tutkimussovellukset, joissa käytetään U-87 MG-soluja
U87MG-glioblastoomasolulinjaa hyödynnetään laajalti syöpätutkimuksissa, erityisesti glioblastoomien tutkimuksessa. Joitakin U 87 MG-solujen tutkimussovelluksia ovat:
- Syöpäbiologian tutkimus: U87-gom-solulinjaa käytetään syövän kasvun ja kehityksen, taustalla olevien molekyylimekanismien, signaalireittien ja kasvaimen mikroympäristön tutkimiseen. Vuonna 2020 julkaistussa tutkimuksessa käytettiin glioblastooman in vitro -mallia, U-87 MG -solulinjaa, tutkimaan BMAL1-geeniä (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) terapeuttisena kohteena. Tulokset osoittivat, että BMAL1-geeni estää glioblastoomasolujen proliferaatiota, migraatiota ja invasiota tukahduttamalla sykliini B1:n, metalloproteinaasi-9:n ja fosfo-AKT-geenin ilmentymistä [1]. Toisessa vuonna 2019 tehdyssä tutkimuksessa hyödynnettiin U87-solulinjaa ja tutkittiin, että Lipopolysakkaridien aiheuttaman tuumorinekroositekijä-alfa-tekijän (LITAF) transkriptiotekijän alareguloitu ilmentyminen voi lisätä glioomasolujen säteilyherkkyyttä FOXO-1-reitin ylössäätelyn kautta. LITAF tunnetaan myös nimellä p53-indusoitu geeni 7 (PIG7) [2].
- Lääkkeiden löytäminen ja kehittäminen: U-87 MG-soluja voidaan käyttää lääkkeiden seulontaan ja testaukseen, jolloin tutkijat voivat tunnistaa uusia mahdollisia syöpälääkkeitä ja arvioida niiden tehoa ja toksisuutta. Tutkimuksessa käytettiin U 87 MG glioblastoomasolulinjaa arvioitaessa Inula helenium (L.) -uutteen antioksidanttista ja syöpää ehkäisevää potentiaalia [3]. Vastaavasti toisessa julkaisussa mainittiin U87-solulinjan käyttö kasviuutteiden sytotoksisen ja apoptoottisen vaikutuksen testaamiseksi [4]. Lisäksi vuonna 2018 julkaistussa tutkimuksessa tutkittiin Nuphar-kasveista uutettujen seskitterpeenialkaloidien sytotoksista vaikutusta herkkiin ja lääkeresistentteihin U 87 MG-solulinjoihin [5].
Tilaa U87 MG Glioma -solulinja tänään
U-87 MG-solulinja: Tutkimusjulkaisut
Seuraavassa on joitakin merkittäviä tutkimusjulkaisuja, joissa esiintyy U-87 MG-solulinja.
Tässä Neuroreport 2018 -lehdessä julkaistussa artikkelissa ehdotettiin, että hypoksia voisi lisätä ihmisen glioblastoomasolujen migraatiota ja invasiota säätelemällä PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α-signalointireittiä.
Tämä tutkimus on julkaistu Frontiers in Pharmacology -lehdessä vuonna 2020. Tutkimustuloksissa todetaan, että flavonoidi Eriodictyolilla on syövänvastaisia vaikutuksia U87-solulinjaan ja se estää solujen lisääntymistä ja metastaasien muodostumista. Yhdiste välittää kasvainvastaiset ominaisuutensa moduloimalla PI3K/Akt/NF-κB-reittiä.
Tämä Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine -lehdessä (2018) julkaistu tutkimus viittaa siihen, että kiinalainen kasviperäinen kaava nimeltä Xihuang-pilleri voi indusoida apoptoosia U87-soluissa kohdentamalla ROS-aktivoitua Akt/mTOR/FOXO1-kaskadia.
LITAF parantaa ihmisen glioomasolujen sädeherkkyyttä FoxO1-reitin kautta
Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin Cellular and Molecular Neurobiology -lehdessä vuonna 2019. Tutkimuksessa ehdotettiin, että transkriptiotekijä LITAF alentaa ja parantaa glioomasolujen säteilyherkkyyttä säätelemällä FOXO-1-signalointireittiä.
Tämä artikkeli on julkaistu Biointerface Research in Applied Chemistry -lehdessä (2019). Tutkijat käyttivät U 87 MG-soluja kurkumiinilla ladattujen PLGA-nanohiukkasten sytotoksisen vaikutuksen tutkimiseen.
U-87 MG-soluja koskevat resurssit: U-87-8: Protokollia, videoita ja muuta
U87MG-glioblastoomasolulinjaa käytetään monissa syöpätutkimuslaboratorioissa. Muutamia resursseja, joissa tämä solulinja esiintyy, ovat:
- U87-solulinjan transfektio: Tässä asiakirjassa kuvataan sinulle U 87 MG-solujen transfektioprotokolla.
- U 87 MG-solulinjan transfektio: Tämä video on opetusohjelma, jossa selitetään vaihe vaiheelta U87-solujen transfektioprotokolla.
U87-solujen soluviljelyprotokollaa koskeva lähde on lueteltu alla:
- U87 MG-solut: Tämä linkki sisältää perustiedot U 87 MG-solulinjasta. Se sisältää lyhyet solujen jakamis-, jäädytys- ja sulatusprotokollat.
Oivalluksia U87 MG -glioomatutkimuksesta: Gliama Gliama: Usein kysytyt kysymykset
Viitteet
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 tukahduttaa U87MG-solujen leviämistä, migraatiota ja invasiota alentamalla sykliini B1: n, fosfo-AKT: n ja metalloproteinaasi-9: n toimintaa. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF parantaa ihmisen glioomasolujen säteilyherkkyyttä FoxO1-reitin kautta. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., Inula helenium (L.) -uutteen antioksidanttiset ja syövänvastaiset vaikutukset ihmisen U-87 MG glioblastoomasolulinjassa. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh ja A. Ghasempour, Sytotoksisuus ja apoptoosin induktio rintasyöpä-, ihosyöpä- ja glioblastoomasoluissa kasviuutteiden avulla. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Nuphar-kasveista peräisin olevien seskiterpeenialkaloidien sytotoksisuus herkkiä ja lääkeresistenttejä solulinjoja kohtaan. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.