T98G-solulinja
T98G-solut ovat ihmisen glioblastoomasolulinja, jota käytetään yleisesti biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Erityisesti näitä soluja käytetään aivosyöpätutkimuksissa, joissa tutkitaan ratkaisevia soluja ja molekyylitekijöitä, jotka vaikuttavat siihen. Lisäksi ne auttavat tutkijoita seulomaan ja testaamaan uusia syöpälääkkeitä, jotka voivat auttaa lääkekehityksessä.
Tähän artikkeliin sisällytetään kaikki olennaiset tiedot T98G-solulinjasta, joita tarvitset ennen kuin aloitat työskentelyn sen kanssa, kuten esimerkiksi
- T98G-solulinjan yleiset ominaisuudet ja alkuperä
- T98G-solulinjan viljelyä koskevat tiedot
- T98G-solulinja: T98G98G-työryhmä: edut ja haitat
- T98G-solujen sovellukset
- Tutkimusjulkaisut, joissa on T98G-soluja
- T98G-soluja koskevat resurssit: T98G98 T98G: Protokollia, videoita ja muuta
1. T98G-solulinjan yleiset ominaisuudet ja alkuperä
Tässä artikkelin osassa tutustutaan T98G-solulinjan perusominaisuuksiin. Se sisältää solulinjan alkuperää, morfologiaa, kokoa ja ploidiaa koskevat tiedot. Lisäksi siinä ymmärretään kattavasti seuraavat tiedustelut: Mitä T98G-solut ovat? Minkä tyyppinen solu on T98G? Mistä T98G on peräisin? Mitkä ovat T98G-solulinjan ominaisuudet? Mikä on glioblastoomasolulinja T98G U87?
- T98G-solulinjan perusti GH Stein. Se koostuu fibroblastien kaltaisista soluista, jotka on saatu 61-vuotiaan valkoihoisen miehen aivokudoksesta, jolla oli glioblastoma multiforme [1].
- T98G-solut eivät ole tuumorigeenisiä; ne eivät aiheuta kasvaimia, kun ne ruiskutetaan alastomiin hiiriin. Niillä on kuitenkin taipumus lisääntyä sopivalla ankkuroitumisella soluviljelmässä.
- Näillä soluilla on fibroblastisolujen kaltainen morfologia.
- Glioblastoomasolulinja T98G edustaa hyperpentaploidiaa. Modaalinen kromosomimäärä vaihtelee 128-132 välillä. Korkeampaa ploidiaa voi esiintyä 1,39 prosentissa solupopulaatiosta.
T98 vs. T98G
Molemmat ovat ihmisen glioblastoomasolulinjoja, ja niillä on samanlainen alkuperä. Ainoa ero näiden solulinjojen välillä on kromosomien lukumäärä. T98G:llä on lähes kaksinkertainen määrä kromosomeja T98:aan verrattuna. Siksi T98G tunnetaan T98:n polyploidisena muunnoksena.
T98G vs. U87
U87 ja T98G ovat molemmat aivosyöpätutkimuksessa käytettäviä ihmisen glioblastoomasolulinjoja. U87:llä on aggressiivisempi fenotyyppi verrattuna T98G GBM:ään.
2. T98G-solulinjaa koskevat viljelytiedot
Solulinjaa koskevat viljelytiedot on tärkeää tietää ennen kuin aloitat työskentelyn sen kanssa. Niiden avulla voit käsitellä solulinjaa helposti ja kätevästi laboratoriossa. Sinun tulisi tietää: Mikä on T98G-solulinjan kaksinkertaistumisaika? Mikä kasvualusta on paras T98G-soluille? Mitkä ovat T98G:n kasvuominaisuudet? Mikä on T98G-solujen kylvötiheys? Miten T98G-solut pakastetaan?
T98G-solujen viljelyä koskevat keskeiset seikat
|
Kaksinkertaistumisaika: |
T98G-solujen likimääräinen kaksinkertaistumisaika on 40 tuntia. Se voi vaihdella viljelyolosuhteista riippuen. |
|
Adheesiossa tai suspensiossa: |
T98G-solut ovat tarttuvia. Ne kiinnittyvät viljelyastioiden pohjalle ja muodostavat monokerroksia. |
|
Jakosuhde: |
T98G-soluja viljellään jakosuhteella 1:2-1:5. Tätä varten solut pestään ensin 1 X PBS-puskurilla ja inkuboidaan sitten passaging-liuoksella (Accutase) 8-10 minuuttia huoneenlämmössä. Inkuboinnin jälkeen irronneet solut lisätään tuoreeseen kasvualustaan ja sentrifugoidaan. Tämän jälkeen kerätty solupelletti suspendoidaan huolellisesti uudelleen, ja solut annostellaan kasvualustaa sisältävään kasvatuspulloon. |
|
Kasvualusta: |
T98G-solujen viljelyyn käytetään EMEM-mediaa, joka sisältää 10 % naudan sikiöseerumia, 2 mM L-glutamiinia, 2,2 g/l NaHCO3:a ja EBSS:ää. Väliaine on vaihdettava 3-4 kertaa viikossa. |
|
Kasvuolosuhteet: |
T98G-soluja pidetään kostutetussa inkubaattorissa, jonka lämpötila on 37 °C ja joka on kytketty CO2-syöttöön. |
|
Varastointi: |
Jäädytettyjä soluja voidaan säilyttää alle -150 °C:ssa tai nestemäisen typen höyryfaasissa solujen elinkelpoisuuden säilyttämiseksi pitkällä aikavälillä. |
|
Pakastusprosessi ja -media: |
T98G-solut suositellaan pakastettavaksi CM-1- tai CM-ACF-solujen pakastusmediassa. Tätä varten suositellaan hidasta pakastusprosessia, jossa lämpötila laskee vain 1 °C minuutissa. Tämä estää soluja saamasta shokkia ja säilyttää niiden elinkelpoisuuden. |
|
Sulatusprosessi: |
Jäädytetyt solut sulatetaan varovasti asettamalla ne esilämmitettyyn vesihauteeseen 37 celsiusasteeseen 40-60 sekunniksi. Tämän jälkeen ne suspendoidaan uudelleen tuoreeseen kasvualustaan ja siirretään uuteen pulloon. 24 tunnin inkubaation jälkeen väliaine vaihdetaan, jotta jäädytysmedian komponentit saadaan poistettua. |
|
Bioturvallisuustaso: |
T98G-viljelmiä ylläpidetään bioturvallisuusluokan 1 laboratoriossa. |
3. T98G-solulinja: T98G: Edut ja haitat
T98G on laajalti käytetty ihmisestä peräisin oleva glioblastoomasolulinja. Sillä on useita etuja ja haittoja, jotka erottavat sen muista. Tässä artikkelin osassa käsitellään muutamia merkittäviä niistä.
Edut
T98G-solujen etuja ovat:
-
Hyvin karakterisoitu
Vakiintunut ja hyvin karakterisoitu solulinja. Laajasti tutkittu ja kirjallisuudessa dokumentoitu.
-
In vitro -malli
Edustaa aggressiivisimman aivokasvaimen, glioblastooman, ominaisuuksia. Arvokas väline taudin tutkimiseen, biologian ymmärtämiseen ja hoidon kehittämiseen.
Haitat
T98G-soluihin liittyvät haitat ovat:
-
Heterogeenisuus
T98G-solupopulaation geneettinen heterogeenisuus voi johtaa kokeellisten tulosten epäjohdonmukaisuuteen ja vaikeuttaa tietojen tulkintaa.
4. T98G-solujen sovellukset
T98G-solulinja on arvokas väline syöpätutkimuksessa. Tässä luetellaan muutamia T98G-solujen tärkeimpiä tutkimussovelluksia:
- Syöpätutkimus: T98G-solulinja on arvokas väline glioblastoomakasvainten biologian tutkimiseen. Näitä soluja käytetään pääasiassa tutkimaan glioblastooman taudin kehittymisen ja etenemisen taustalla olevia monimutkaisia molekyylireittejä. Lisäksi niitä käytetään tunnistamaan kasvaimen kasvua ohjaavia geneettisiä mutaatioita ja muita syöpäsolujen mekanismeja. Yang Chen ja kollegat työskentelivät näillä soluilla ja havaitsivat, että miRNA-21:n yliekspressio vähentää PDCD4:n (Programmed cell death protein 4) tasoja T98G-soluissa. Tämä johtaa PDCD4:n välittämän T98G-solujen apoptoosin estymiseen. Näin ollen tutkimus viittaa siihen, että miRNa-21 on potentiaalinen kohde hoitojen kehittämiseksi [2]. Tämän tutkimuksen tavoin Fanqiang Kong ja kollegat tutkivat mikroRNA-15a:n roolia T98G-glioblastoomasolujen proliferaatiossa ja invasiossa. He havaitsivat, että miRNA-15a-5p edistää näitä soluprosesseja kohdentamalla soluadheesiomolekyyliä 1 (CADM1) [3].
- Lääkkeiden testaus ja terapeuttinen kehittäminen: T98G toimii erinomaisena glioblastooman in vitro -mallina uusien lääkkeiden seulontaan ja tarjoaa alustan mahdollisten syöpähoitojen tehokkuuden arvioimiseksi. Tutkijat testaavat myös erilaisia yhdisteitä ja hoitomuotoja, jotta he voivat tunnistaa ja löytää lääkeaihioita, joilla on lupaavimmat glioblastoomaa vastaan vaikuttavat ominaisuudet. Tämä johtaa uusien lääkkeiden ja hoitostrategioiden kehittämiseen, mikä antaa toivoa glioblastoomapotilaille. Tällaisessa tutkimuksessa tutkittiin korilagiiniksi kutsutun luonnonyhdisteen syöpää ehkäisevää potentiaalia temotsolomidille temotsolomidille resistentissä T98G GBM-solulinjassa. Tutkimustuloksissa ehdotettiin, että korilagiini yhdessä temotsolomidin kanssa saa aikaan korkeampia solujen antiproliferatiivisia ja antiapoptoottisia vaikutuksia [4].
5. Tutkimusjulkaisut, joissa on T98G-soluja
Seuraavassa on joitakin mielenkiintoisia ja usein siteerattuja tutkimusjulkaisuja T98G:stä, glioblastoomasolulinjasta.
REV-ERB-agonisti SR9009:n kemoterapeuttinen vaikutus ihmisen glioblastooma T98G-soluihin
Tässä ASN Neuro -lehdessä (2019) julkaistussa julkaisussa tutkittiin REV-ERB-agonisti SR9009:n syöpää ehkäiseviä vaikutuksia T98G-glioblastoomasoluihin.
Tässä Neurochemical research -lehdessä (2019) julkaistussa tutkimusartikkelissa ehdotettiin, että natriumbutyraatti ja kversetiini estävät synergistisesti suojaavaa autofagiaa T98G-soluissa ja lisäävät solujen apoptoosia.
Tässä Genes-lehdessä (2023) julkaistussa tutkimuksessa T98G-hypoksiaan sopeutuneelle T98G-solulinjalle tehtiin RNA-sekvensointi ja ehdotettiin IRE1:tä (Inositol-requiring enzyme 1) lupaavaksi terapeuttiseksi kohteeksi.
Tämä artikkeli on julkaistu Oncology Letters -lehdessä (2017). Tutkimuksessa tutkittiin, että miRNA-548c-3p kohdistuu T98G-onkogeeniin (c-Myb) estääkseen T98G-solujen proliferaatiota ja migraatiota.
Tässä Journal of Medicinal Plants Research -lehdessä (2011) julkaistussa artikkelissa ehdotettiin, että Dracocephalum tanguticum -kloroformiuute vaikuttaa T98G-soluihin antiproliferatiivisesti moduloimalla kaspaasi-3-, Bax- ja P21-geenejä.
6. T98G-soluja koskevat resurssit: T98G T98G: Protokollia, videoita ja muuta
T98G-solujen viljely- ja transfektioprotokollat sisältävät saatavilla olevat resurssit on mainittu tässä.
- T98G-transfektio: Tämä tutkimusartikkeli sisältää T98G-transfektioprotokollan. Siinä selitetään lyhyesti menetelmä ja tarvittava reagenssi.
Seuraavat linkit auttavat sinua suuresti oppimaan T98G-soluviljelyprotokollan ja tekemään työskentelystäsi helppoa sen avulla.
- T98G-solut: T98G-soluviljelyprotokollia koskevat olennaiset tiedot, mukaan lukien subkultivointi ja proliferatiivisten ja kryosäilytettyjen viljelmien käsittely. Lisäksi se auttaa sinua oppimaan solujen kasvualustat, olosuhteet ja kaksinkertaistumisajan.
Viitteet
- Haehl, E., Endoteelisolujen aiheuttama radioresistenssi glioblastoomassa. 2021, Universität Tübingen.
- Chen, Y., et al., MicroRNA-21 alentaa kasvainsuppressori PDCD4:n ilmentymistä ihmisen glioblastoomasolussa T98G. Cancer letters, 2008. 272(2): p. 197-205.
- Kong, F., et al., MicroRNA-15a-5pedistää T98G-glioblastoomasolujen proliferaatiota ja invasiota kohdistamalla solun adheesiomolekyyli 1:een. Oncology Letters, 2021. 21(2): p. 1-1.
- Milani, R., et al., Corilagin Induces High Levels of Apoptosis in the Temozolomide-Resistant T98G Glioma Cell Line. Oncol Res, 2018. 26(9): p. 1307-1315.