SiHa-solut - valoa kohdunkaulan syövän tutkimukseen

SiHa-solut ovat biolääketieteellisessä tutkimuksessa laajalti käytettyjä kohdunkaulan syöpäsoluja. Ne ovat erinomaisia transfektioisäntiä ja sopivat siten geeniekspressiotutkimuksiin. Ihmisperäisyytensä ja kohdunkaulan syövän merkityksensä vuoksi näitä soluja käytetään pääasiassa syöpäbiologian, virologian ja lääkekehityksen tutkimuksissa.

SiHa-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä

Solulinjan alkuperän ja yleisten ominaisuuksien ymmärtäminen on ratkaisevan tärkeää, koska se vaikuttaa sen käyttöön tutkimuksessasi. Tässä artikkelin osassa saat tietoa SiHa-solulinjan alkuperästä, erityispiirteistä ja paljon muuta: Mikä on SiHa-syöpäsolulinja? Mitä SiHa-solut ovat HPV? Mikä on SiHa-solulinjan alkuperä? Mikä on SiHa:n morfologia?

SiHa, kohdunkaulan karsinooman solulinja, on peräisin palasista, jotka on otettu primaarisesta kohdun biopsiasta aasialaiselta naiselta (55-vuotias), jolla oli levyepiteelisyöpä [1].
SiHa-solulinjalla on hypertriploidinen karyotyyppi. Useimpien solujen keskimääräinen kromosomiluku on 69-72. Kuitenkin noin 24 prosentilla soluista kromosomiluku on 71.
SiHa-solut ovat ihmisen papilloomavirus 16 -positiivisia. Niissä integroituu noin 1-2 kopiota HPV-genomia solua kohti [2].
Näillä kohdunkaulan syöpäsoluilla on epiteelimorfologia.

HeLa-kohdunkaulan syöpäsolujen jakautuminen mikroskoopilla.

SiHa-solulinja: Viljelyä koskevat tiedot

Solulinjaviljelyn ylläpitäminen ei ole helppoa, ennen kuin tunnet kaikki solulinjan viljelyyn liittyvät keskeiset seikat. Sinun tulisi tietää: Mikä on SiHa-solun kaksinkertaistumisaika? Mikä on SiHa-solualusta? Miten SiHa-solulinjaa viljellään?

SiHa-solujen viljelyyn liittyvät keskeiset seikat

Kaksinkertaistumisaika:	SiHa-solujen kaksinkertaistumisaika on noin 17 tuntia.
Adheesiossa tai suspensiossa:	SiHa on tarttuva solulinja.
Aliviljelysuhde:	SiHa-solujen subkultivointisuhde on 1:2-1:4. Passagea varten ja adherentit solut huuhdellaan 1x PBS:llä. Lisätään akkutaasiliuos ja soluja inkuboidaan 8-10 minuuttia huoneenlämmössä. Seuraavaksi lisätään kasvatusmediaa ja solut sentrifugoidaan. Solupelletti suspendoidaan uudelleen, ja solut kaadetaan uuteen kolviin viljelyä varten.
Kasvualusta:	SiHa-solujen ihanteelliseen kasvuun käytetään Eagle's Minimum Essential Mediumia (EMEM), joka sisältää 10 % FBS:ää, 2 mM L-Glutamiinia, 2,2 g/l NaHCO3:a ja Earlen tasapainotettua suolaliuosta (EBSS). Väliaine vaihdetaan 2-3 kertaa viikossa.
Kasvuolosuhteet:	SiHa-soluja pidetään 37 °C:n kostutetussa inkubaattorissa, jossa on 5 % CO2.
Varastointi:	Pakastetut SiHa-kohdunkaulan syöpäsolulinjan injektiopullot säilytetään pidempään alle -150 °C:n lämpötilassa sähköisessä pakastimessa tai nestemäisen typen höyryfaasissa.
Pakastusprosessi ja väliaine:	SiHa-solujen jäädyttämiseen käytetään CM-1- tai CM-ACF-pakastusmediaa. Solut pakastetaan käyttäen hidasta pakastusmenetelmää, jossa solujen elinkelpoisuuden suojelemiseksi lämpötila laskee vain 1 °C minuutissa.
Sulatusprosessi:	Pakastettuja soluja pidetään 40-60 sekuntia 37 °C:n vesihauteessa, kunnes jäljellä on pieni jääkerrostuma. Sen jälkeen lisätään tuoretta kasvualustaa ja solut sentrifugoidaan pakastusmedian komponenttien poistamiseksi. Solupelletti suspendoidaan uudelleen, ja solut annostellaan kasvatuspulloon kasvatusta varten.
Bioturvallisuustaso:	SiHa-soluviljelmien käsittelyyn ja ylläpitoon tarvitaan bioturvallisuustason 1 laboratorio.

SiHa-solujen adheesiokerros 10× ja 20× suurennoksella.

SiHa-solulinjan edut ja haitat

Kuten muillakin ihmisen karsinoomasolulinjoilla, myös SiHa:lla on joitakin erityispiirteitä, joihin liittyy tiettyjä etuja ja haittoja. Olemme käsitelleet tässä muutamia merkittäviä niistä.

SiHa-kohdunkaulan syöpäsolulinjan edut

Kohdunkaulan syövän malli
- Johdettu kohdunkaulan levyepiteelisolusyövästä.
- Käytetään kohdunkaulan syövän mekanismien, kasvun ja kehityksen tutkimiseen.
- Ilmentää geenejä p53+ ja pRB+, jotka liittyvät DNA:n korjaamiseen, solusyklin säätelyyn ja kasvaimen suppressioon.
Tumorigeeninen potentiaali
- SiHa-solut ovat tumorigeenisiä ja voivat indusoida huonosti erilaistuneita III asteen epidermoidikasvaimia alasti elävissä hiirissä.
- Käytetään in vivo -syöpätutkimukseen ja syöpähoitojen testaamiseen.

SiHa-solujen haitat

Proliferaationopeus
- SiHa-solut lisääntyvät nopeasti, mikä johtaa liikakasvuun.
- Vaatii tiheää passagointia, mikä lisää geneettisen epävakauden riskiä, mikä voi vaikuttaa solujen käyttäytymiseen ajan mittaan.

SiHa-kennojen tutkimussovellukset

SiHa-solulinjaa käytetään laajasti kohdunkaulan syövän tutkimuksessa. Tässä käsitellään muutamia tämän solulinjan erityisiä sovelluksia.

Ihmisen papilloomavirukseen (HPV) liittyvät tutkimukset: SiHa-solut ovat HPV 16 -positiivisia, joten ne ovat arvokkaita yksiköitä tutkittaessa ihmisen papilloomavirusinfektiota, sen molekyylimekanismeja ja sen merkitystä kohdunkaulan syövän kehittymisessä ja etenemisessä. Tutkijat käyttävät näitä soluja myös tutkiakseen viruksen replikaatiota, integroitumista ja sen vaikutusta isäntäsolujen prosesseihin. Vuonna 2020 tehdyssä tutkimuksessa SiHa-solulinjaa käytettiin tutkimaan HPV E6/E7 -onkoproteiinien roolia kohdunkaulan syövän kehittymisessä kohdentamalla se CRISPR-tekniikalla. Tulokset osoittivat, että E6/E7-geenien tyrmäys aiheutti SiHa-solujen kasvun estymisen ja apoptoosin. Näin ollen nämä viruksen geenit voivat toimia tärkeinä lääkekohteina kehitettäessä hoitoja HPV:hen liittyvää kohdunkaulan syöpää vastaan [3].
Syöpäbiologia: SiHa-solut ovat korvaamaton malli kohdunkaulan syövän biologian tutkimiseen, mukaan lukien syövän kehittyminen, eteneminen, etäpesäkkeet ja invaasio. Tutkijat käyttävät näitä soluja tutkiakseen geneettisiä mutaatioita ja taustalla olevia molekyylireittejä, jotka vaikuttavat kohdunkaulan syövän kehittymiseen ja kasvuun, kuten esimerkiksi SiHa-soluja hyödyntävässä tutkimuksessa, jossa havaittiin, että säännelty SEC61G (SEC61-translokonin alayksikön gamma) edistää kohdunkaulan syövän solujen proliferaatiota MAPK-kaskadin aktivaation kautta [4].
Lääkkeiden seulonta ja testaus: SiHa on laajalti käytetty kohdunkaulan syöpälinja, jonka avulla voidaan arvioida mahdollisten HPV:n aiheuttamaan kohdunkaulan syöpään spesifisesti vaikuttavien syöpälääkkeiden tehoa. Tutkijat tutkivat näiden solujen avulla lääkkeiden antiproliferatiivista, apoptoottista ja metastaattista potentiaalia. Tällainen on esimerkiksi vuonna 2019 tehty tutkimus, jossa tutkittiin Vatica diospyroides Symington Type SS -hedelmäuutteiden sytotoksisia mahdollisuuksia SiHa-kohdunkaulan syöpäsolulinjassa [5].

SiHa-solut tutkimustasi varten!

430,00 €*

Sisältö: 1.5 milliliter

Hinnat ilman veroja ja toimituskuluja

cryovial

Tuotenumero: 305023

Tutkimusjulkaisut, joissa on SiHa-soluja

Eräissä merkittävissä ja usein siteeratuissa tutkimusjulkaisuissa käytetään SiHa-kohdunkaulan levyepiteelikarsinooman solulinjaa.

Aloe-emodiinin kasvainvastainen vaikutus kohdunkaulan syöpäsoluihin liittyi ihmisen papilloomavirukseen E6/E7 ja glukoosiaineenvaihduntaan

Tässä OncoTargets and Therapy -lehdessä (2019) julkaistussa julkaisussa ehdotettiin, että luontainen yhdiste aloe-emodiini aiheuttaa HPV E6/E7:ään ja glukoosiaineenvaihduntaan liittyviä apoptoottisia vaikutuksia SiHa-kohdunkaulan syöpäsoluissa.

Excoecaria agallocha (L.) -lehtiuutteen syövänvastaisen potentiaalin arviointi ihmisen kohdunkaulan syövän (SiHa) solulinjalla ja taustalla olevan vaikutusmekanismin arviointi

Tämä artikkeli julkaistiin Future Journal of Pharmaceutical Sciences -lehdessä vuonna 2022. Tässä tutkimuksessa tutkittiin Excoecaria agallocha (L.) -kasvin lehtiuutteen kasvainvastaista vaikutusta SiHa-kohdunkaulan syöpäsolulinjassa.

Sulfaattisiin ZnO-nanohiukkasiin yhdistetyn 1, 10-fenantroliinin antiproliferatiivinen vaikutus SiHa-kohdunkaulan syöpäsolulinjassa

Tässä Journal of Sol-Gel Science and Technology -lehdessä (2022) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että 1, 10-Fenantroliini-molekyyli kytkeytyessään sinkkisulfaatti-nanohiukkasiin aiheuttaa merkittäviä antiproliferatiivisia vaikutuksia SiHa-soluissa.

Astragalosidi IV estää SiHa-kohdunkaulan syöpäsolujen invaasiota ja metastaasia TGF-β1-välitteisten PI3K- ja MAPK-reittien välityksellä

Tämä tutkimus julkaistiin Oncology Reports -lehdessä vuonna 2019. Tutkimus osoitti, että luonnontuote Astragalosidi IV estää SiHa-solujen migraatiota ja invasiota moduloimalla TGF-β1-välitteisiä PI3K- ja MAPK-signalointireittejä.

IFI16 edistää kohdunkaulan syövän etenemistä säätelemällä PD-L1:tä immunomikroympäristössä STING-TBK1-NF-kB-reitin kautta

Tämä Biomedicine & Pharmacotherapy -lehdessä (2020) julkaistu tutkimus paljasti, että IFI16 (interferon-gamma-indusoituva proteiini 16) säätelee PD-L1-geeniä aktivoimalla STING-TBK1-NF-kB-reitin edistääkseen SiHa-kohdunkaulan syöpäsolujen kasvua.

SiHa-solulinjan resurssit: SiAa: Protokollia, videoita ja muuta

Tässä on joitakin SiHa-soluja esitteleviä verkkolähteitä.

SiHa-solujen transfektio: SiHa-solujen transfektio: Tämä tutkimusartikkeli sisältää protokollan SiHa-kohdunkaulan syöpäsolujen ylläpitoa ja SiHa-solujen transfektiota varten.

Seuraava linkki sisältää SiHa-solujen soluviljelyä koskevia tietoja.

SiHa-solulinja: Tämä verkkosivusto sisältää paljon arvokasta tietoa SiHa-solulinjasta. Siihen sisältyy tietoa kasvualustoista, viljelyolosuhteista, SiHa-solujen subkulturointiin tarkoitetuista protokollista sekä sen proliferatiivisten ja kryosäilöttyjen viljelmien käsittelystä.

SiHa-kohdunkaulan karsinoomasoluja koskevat usein kysytyt kysymykset

Viitteet

Melzer, C., J. von der Ohe ja R. Hass, Concise review: crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential. Stem cells, 2018. 36(7): p. 951-968.
Ostrowska, K.M., et al., Korkean riskin ihmisen papilloomaviruksen vaikutuksen tutkiminen kohdunkaulan syöpäsolujen biokemialliseen koostumukseen värähtelyspektroskopian avulla. Analyst, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
Chen, Y., et al., In vitro ja in vivo ihmisen kohdunkaulan syöpäsolujen kasvun estäminen ihmisen papilloomaviruksen E6/E7 mRNA:n pilkkomisen avulla CRISPR/Cas13a-järjestelmällä. Antiviral Research, 2020. 178: p. 104794.
Fan, Y., et al., SEC61G edistää kohdunkaulan syövän leviämistä aktivoimalla MAPK-signalointireitin. Disease Markers, 2022. 2022.
Chothiphirat, A., et al., Vatica diospyroides symingtonin tyyppi SS:n hedelmäuutteiden syöpää ehkäisevä potentiaali ja niiden vaikutus kohdunkaulan syövän solulinjojen ohjelmalliseen solukuolemaan. The Scientific World Journal, 2019. 2019.