NCI-H460-solut - Keuhkosyöpätutkimuksen navigointi NCI-H460-tietämyksen avulla
NCI-H460-solut ovat ihmisestä peräisin olevia ei-pienisoluisia keuhkosyöpäsoluja, joita käytetään yleisesti keuhkokarsinooman ja toksikologian tutkimuksessa. Tämä solulinja on arvokas väline erilaisten syöpäbiologisten näkökohtien tutkimiseen, jotka liittyvät kasvaimen kehitykseen, kasvuun ja lääkeresistenssiin. Lisäksi NCI-H460-solut ovat sopiva malli syövänvastaisten reagenssien kehittämiseen.
NCI-H460-solut: Alkuperä ja yleiset ominaisuudet
Solulinjan alkuperä ja yleiset ominaisuudet vaikuttavat merkittävästi sen tutkimussovelluksiin. Tämä artikkelin osa auttaa sinua oppimaan NCI-H460-keuhkosyöpäsolujen alkuperän ja keskeiset ominaisuudet. Saat tietää: Mitä NCI-H460-solut ovat? Mikä on NCI-H460-solulinjan tyyppi? Mikä on NCI-H460-solujen morfologia?
- NCI-H460-solulinja on peräisin suurisoluista keuhkosyöpää sairastavan eurooppalaisen miehen pleuraeritteestä. A.F. Gazdar ja kollegat perustivat sen vuonna 1982.
- NCI-H460-keuhkosyöpäsoluilla on epiteelimorfologia.
- NCI-H460 on tumorigeeninen solulinja, jolla on hypotriploidinen karyotyyppi. Näiden solujen modaalinen kromosomiluku on 57. NCI-H460-soluilla on myös 58 modaalinen kromosomiluku vertailukelpoisessa määrin.
- Näillä keuhkosyöpäsoluilla on monia NCI-NCI-H460-mutaatioita kuten ei-pienisoluisissa keuhkokasvaimissa, kuten NCI-H460 KRAS-mutaatio, jotka osallistuvat solujen lisääntymiseen, kasvuun, invaasioon ja metastaasiin.
NCI-H460-solujen viljelyä koskevat tiedot
Sinun on tiedettävä seuraavat keskeiset seikat NCI-H460-solulinjan asianmukaista käsittelyä ja ylläpitoa varten. Saat tietoa NCI-H460-kaksinkertaistumisajasta, NCI-H460-viljelyalustasta ja NCI-H460-keuhkosyöpäsolujen perussoluviljelymenetelmistä.
NCI-H460-solujen viljelyä koskevat keskeiset seikat
|
Kaksinkertaistumisaika: |
NCI-H460-solujen kaksinkertaistumisaika on noin 33 tuntia. |
|
Adheesiossa tai suspensiossa: |
NCI-H460-keuhkosyöpäsolut ovat tarttuvia. |
|
Osaviljelysuhde: |
NCI-H460-solulinjalle suositeltu jakosuhde on 1:2 ja 1:4. Vanhan elatusaineen poistamisen jälkeen adherentit solut huuhdellaan 1 x fosfaattipuskurisuolaliuoksella. Tämän jälkeen soluja inkuboidaan Accutase passaging -liuoksessa 8-10 minuuttia huoneenlämmössä. Dissosioituneet solut suspendoidaan uudelleen elatusaineeseen ja sentrifugoidaan. Kerätyt solut suspendoidaan uudelleen ja kaadetaan uuteen pulloon viljelyä varten. |
|
Kasvualusta: |
NCI-H460-kasvatusalustana käytetään RPMI 1640:tä. Sitä täydennetään 10 %:lla naudan sikiöseerumilla, 2,1 mM stabiililla glutamiinilla ja 2,0 g/l NaHCO3:lla. Väliaine on vaihdettava 2-3 kertaa viikossa. |
|
Kasvuolosuhteet: |
NCI-H460-viljelmiä pidetään 37 °C:n lämpötilassa kostutetussa inkubaattorissa, jossa on jatkuva 5 %:n hiilidioksidipitoisuus. |
|
Varastointi: |
NCI-H460-keuhkosyöpäsoluja voidaan säilyttää nestemäisen typen höyryfaasissa tai alle -150 °C:n lämpötilassa sähköisessä ultramatalan lämpötilan pakastimessa pitkällä aikavälillä. |
|
Pakastusprosessi ja -media: |
NCI-H460-solujen jäädyttämiseen ja säilyttämiseen käytetään CM-1- tai CM-ACF-mediaa. Hidas pakastusmenetelmä on suositeltava solujen maksimaalisen elinkelpoisuuden turvaamiseksi. |
|
Sulatusprosessi: |
Pakastettuja NCI-H460-soluja sulatetaan esilämmitetyssä vesihauteessa (37 °C:n lämpötilassa) 40-60 sekunnin ajan, kunnes jäljellä on pieni jääkerrostuma. Sulatettuihin soluihin lisätään tuoretta elatusainetta ja ne sentrifugoidaan pakastusmedian komponenttien poistamiseksi. Kerätty solupelletti suspendoidaan uudelleen, ja solut annostellaan uusiin pulloihin, jotka sisältävät kasvualustaa. NCI-H460-solujen kiinnittyminen pullon pinnalle voi kestää lähes 24 tuntia. |
|
Bioturvallisuustaso: |
NCI-H460-keuhkosyöpäsoluja käsitellään ja ylläpidetään bioturvallisuustason 1 laboratorioissa. |
NCI-H460-solujen edut ja haitat
NCI-H460 on laajalti käytetty solulinja keuhkosyöpätutkimuksessa. Tässä jaksossa käsitellään NCI-H460-keuhkosyöpäsoluihin liittyviä yleisiä etuja ja haittoja.
Edut
NCI-H460 ei-pienisoluisen keuhkosyövän solulinjan etuja ovat:
-
Kasvaimen alkuperä
NCI-H460-solulinja on peräisin suurisoluisesta keuhkosyöpäpotilaasta, joka edustaa tätä erityistä keuhkosyöpätyyppiä. Niitä käytetään mallina keuhkosyövän biologian tutkimiseen ja uusien tehokkaiden hoitojen kehittämiseen. NCI-H460-soluilla on tumorigeeninen potentiaali, ja ne voidaan ruiskuttaa immuunipuutteisiin hiiriin, jotta voidaan luoda in vivo -kasvainmalleja kasvaimen kasvun, kehityksen ja mahdollisten lääkkeiden tehon tutkimiseksi.
-
Korkea proliferaatiovauhti
NCI-H460:n kasvuvauhti on korkeampi kuin muilla ei-pienisoluisen keuhkosyövän solulinjoilla, kuten A549:llä. Tämä etu lisää niiden saatavuutta ja auttaa tutkijoita tekemään toistettavia ja ajallisesti herkkiä kokeita.
Haitat
NCI-H460-keuhkosyöpäsoluihin liittyviä haittoja ovat:
-
Homogeenisuus
NCI-H460-solut ovat homogeenisia, koska ne on saatu yhdestä potilaan kasvaimesta. Siksi niistä puuttuu yleensä potilaan kasvaimissa havaittu monimutkaisuus ja heterogeenisuus.
NCI-H460-solujen tutkimussovellukset
NCI-H460-keuhkosyöpäsoluja käytetään laajasti keuhkosyöpään liittyvissä tutkimuksissa. Seuraavassa on lueteltu joitakin NCI-H460-solujen tärkeitä tutkimussovelluksia:
- Keuhkosyöpätutkimus: NCI-H460-solut ovat korvaamaton malli kasvaimen kehittymiseen, kasvuun ja etäpesäkkeisiin liittyvien solu- ja molekyylimekanismien tutkimiseen. Lisäksi niitä käytetään tutkimaan välttämättömiä signaalireittejä, molekyylikohteita ja erilaisia geneettisiä mutaatioita, jotka liittyvät keuhkosyövän etenemiseen. NCI-H460-soluilla on tehty useita tutkimuksia näiden tekijöiden tutkimiseksi tehokkaasti. Vuonna 2019 tehdyssä tutkimuksessa ehdotettiin, että ylikorostunut ydin-ubiquitous kaseiini ja sykliiniriippuvaisten kinaasien substraatti (NUCKS) osallistuvat kasvainsolujen kasvuun PI3K/AKT-signalointireitin säätelyn kautta [1]. Vastaavasti in vitro- ja in vivo -tutkimuksessa käytettiin NCI-H460-soluja eIF4E-geenin roolin tutkimiseen. Tulokset osoittivat, että eIF4E-geeni osallistuu keuhkokarsinooman kasvuun ja angiogeneesiin, ja siihen voidaan kohdistaa lupaavia keuhkosyöpälääkkeitä [2].
- Lääkkeiden löytäminen ja kehittäminen: NCI-H460 on ihmisen keuhkosyöpäsolulinja, jota käytetään laajalti lääkkeiden löytämis- ja kehittämistutkimuksissa. Tutkijat käyttävät näitä soluja tutkiessaan uusien lääkeaihioiden, kohdennettujen hoitojen ja pääasiassa NCI-H460 KRAS-mutaatioihin kohdistuvien hoitojen toksisuutta ja tehoa. Haoyue Hun ja kollegoiden vuonna 2023 tekemässä tutkimuksessa käytettiin NCI-H460-soluja anlotinib-lääkkeen syöpää ehkäisevien vaikutusten tutkimiseen. Tulokset osoittivat, että anlotinibi vaikutti osittain KRAS-mutanttien keuhkosyöpäsolujen kasvuun estämällä MEK/ERK-signalointikaskadia [3]. Samoin fenolisen yhdisteen, karnosiinihapon, antiproliferatiivisia ja proapoptoottisia vaikutuksia tutkittiin NCI-H460-soluilla [4].
- Lääkeresistenssi: NCI-H460-solulinja sopii erinomaisesti keuhkokarsinooman lääkeresistenssimekanismin tutkimiseen. Tutkijat käyttävät näitä soluja lääkeresistenssimallien kehittämiseen, jotta voidaan tunnistaa taustalla olevat geenit, molekyylitekijät ja signaalireitit. Esimerkiksi eräässä tutkimuksessa kehitettiin pemetreksedille, joka on monikohdistettu antifolaattilääke, resistenttejä NCI-H460-soluja pemetreksediresistenssin taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseksi ei-pienisoluisissa keuhkosyöpäsoluissa [5].
Osta NCI-H460-solulinja: N604H60: Sinun porttisi keuhkosyöpätutkimukseen
NCI-H460-soluja sisältävät tutkimusjulkaisut
Tässä on joitakin mielenkiintoisia tutkimusjulkaisuja NCI-H460-keuhkosyöpäsolulinjasta.
Mustapavun luonnollinen glukaani estää syöpäsolujen lisääntymistä PI3K-Akt- ja MAPK-reitin kautta
Tässä Molecules-lehdessä (2023) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että mustapavusta peräisin oleva luonnollinen α-1,6-glukaani, BBWPW, estää NCI-H460-solujen proliferaatiota PI3K/AKT/MAPK-reitin säätelyn kautta.
Tässä Phytomedicine-lehden artikkelissa (2019) tutkittiin, että diosiini-6′-O-asetaatti, uusi luonnollinen yhdiste, vaikuttaa antiproliferatiivisesti NCI-H460-keuhkosyöpäsoluihin.
miRNA-425-5p tehostaa keuhkosyövän kasvua PTEN/PI3K/AKT-signalointiakselin kautta
BMC Pulmonary Medicine (2020) -tutkimuksessa todetaan, että mikroRNA-425-5p tehostaa keuhkosyövän kasvainten kasvua PTEN/PI3K/AKT-reitin kautta.
Tässä Molecular Medicine Reports -lehdessä (2017) julkaistussa artikkelissa ehdotettiin kvinalisariiniyhdisteen kasvainvastaista potentiaalia ja sen taustalla olevia mekanismeja NCI-H460- ja muissa keuhkosyöpäsoluissa.
Tämä Food and Function -lehdessä (2019) julkaistu tutkimus korostaa Eucalyptus globulus labill. uutteen mahdollista syöpää ehkäisevää vaikutusta NCI-H460-soluja käyttäen. Tulokset osoittivat, että kasviuute osoitti nämä vaikutukset lisäämällä NCI-H460:n p53-ekspressiota ja muuttamalla solusykliprofiilia.
NCI-H460-solulinjan resurssit: H4H604-H4C4: Protokollien, videoiden ja muiden
Seuraavassa on joitakin NCI-H460-keuhkosyöpäsoluja esitteleviä online-resursseja.
- NCI-H460-solujen transfektio: NCI-H460-solujen transfektointi plasmidi-DNA:lla: Tämä opetusvideo on vaiheittainen opas NCI-H460-solujen transfektointiin plasmidi-DNA:lla.
Seuraavat linkit sisältävät pakollisia soluviljelytietoja H460-soluille.
- NCI-H460-solut: Tällä verkkosivustolla on tärkeää tietoa NCI-H460-solujen elatusaineista, subkulturoinnista, pakastamisesta ja sulattamisesta.
- NCI-H460-solujen kuljettaminen: Tämä asiakirja opastaa sinua NCI-H460-solulinjan passage- ja subkulturointimenetelmissä. Lisäksi se auttaa sinua oppimaan NCI-H460-solujen transfektioprotokollan.
NCI-H460-solulinjan tutkiminen: N605-460: Usein kysytyt kysymykset ja oivallukset: Usein kysytyt kysymykset ja näkemykset
Viitteet
- Hu, C., et al., NUCKS edistää keuhkosyöpäsolujen leviämistä, migraatiota ja invasiota Pi3k / Akt-signalointireitin kautta. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): s. E55-61.
- Qi, X., et al., EGPI-1, uusi eIF4E/eIF4G-vuorovaikutuksen estäjä, estää keuhkosyöpäsolujen kasvua ja angiogeneesiä Ras/MNK/ERK/eIF4E-signalointireitin kautta. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotinibilla on syövänvastaisia vaikutuksia KRAS-mutaation omaaviin keuhkosyöpäsoluihin MEK/ERK-reitin tukahduttamisen kautta. Cancer Management and Research, 2020: s. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Karnosiinihapolla on antiproliferatiivisia ja proapoptoottisia vaikutuksia tumoraalisissa NCI-H460- ja ei-tumoraalisissa IMR-90-keuhkosoluissa. Journal of Toxicology and Environmental Health, osa A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al., Pemetreksedille resistenttien NCI-H460/PMT-solujen perustaminen ja karakterisointi. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (aiemmin Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.