MX-1-solulinja

MX-1 on ihmisen rinta-adenokarsinooma-solulinja, joka on johdettu rintasyövän ksenotransplantaattimallissa atyymisissä hiirissä. Ihmisen rinta-adenokarsinoomasolut on saatu 29-vuotiaan valkoihoisen naisen rintakasvaimesta. MX1-solut ovat kolmoisnegatiivisia rintasyöpäsoluja (TNBC), joita hyödynnetään laajasti lääkeresistenssin, solusignalisaation, lääkevastusmekanismin jne. tutkimuksessa.

MX-1-solujen alkuperä ja yleisiä tietoja

Ennen kuin työskentelet tämän solulinjan kanssa, sinun tulisi oppia sen pähkinät ja pultit. Käymme läpi lähes kaikki MX-1-solulinjaa koskevat yleiset tiedot.

Kuolematon MX-1-solulinja on tuumorigeeninen solulinja, joka on luotu kasvaimen ksenograftista. MX-1-soluja pidetään kolmoisnegatiivisen rintasyövän (TNBC) tyyppinä [1]. Lisäksi nämä solut ovat estrogeenireseptori- ja p53-negatiivisia, koska ne eivät ilmentä näitä geenejä.

MX-1-solut - kolmoisnegatiivisen rintasyövän mallijärjestelmä

MX-1-solulinjan viljelyolosuhteet eivät ole hankalat. Näitä soluja voidaan helposti lisätä ja käyttää eri tutkimuslaboratorioissa transfektiotutkimuksiin. Ohimenevällä transfektiomenetelmällä tutkitaan yleisesti solujen taustalla olevia mekanismeja ja geeniekspressiomalleja tässä solulinjassa [2, 3].

Tämä solulinja on hyvä mallijärjestelmä rintasyöville. Sitä voidaan käyttää taudin etenemisen taustalla olevien molekyylimekanismien ymmärtämiseen sekä taudin torjuntaan tarkoitettujen lääkkeiden seulontaan ja kehittämiseen. Tarkemmin sanottuna ihmisen MX-1-rinta-adenokarsinoomasolulinja voi olla vaihtoehto TNBC-soluille, koska se on estrogeenireseptorinegatiivinen [4].

MX-1-solulinja: Viljelyä koskevat tiedot

• Kaksinkertaistumisaika: INS-1-solujen populaation kaksinkertaistumisaika on noin 44 tuntia.
• Adheesiossa tai suspensiossa: INS-1-solut kasvavat sekä suspensiossa että adheesiomuodossa.
• Osaviljelysuhde: INS-1-soluja subkultivoidaan jakosuhteella 1:3. Lyhyesti sanottuna suspensiosolut kerätään. Tarttuvat solut huuhdellaan PBS:llä ja inkuboidaan Accutase-liuoksen kanssa. Irrotuksen jälkeen solut lisätään tuoreeseen väliaineeseen. Tämän jälkeen sekä suspendoituneet että adheesiosolut sentrifugoidaan ja kerätään. Solut suspendoidaan varovasti uudelleen ja annostellaan uusiin pulloihin kasvua varten.
• Kasvualusta: RPMI 1640:tä käytetään rotan INS-1-insulinoomasolulinjan viljelyyn. Väliaineeseen lisätään 10 % lämpöinaktivoitua naudan sikiöseerumia, 2,1 mM stabiilia glutamiinia, 10 mM HEPES:ää, 2,0 g/l NaHCO3:a ja 1 mM natriumpyruvaattia.
• Kasvuolosuhteet: INS-1-soluja pidetään kostutetussa inkubaattorissa, jonka lämpötila on 37 °C ja jossa on jatkuva 5 %:n hiilidioksidipitoisuus.
• Varastointi: INS-1-beetasoluja voidaan säilyttää nestemäisen typen höyryfaasissa tai alle -150 °C:n lämpötilassa sähköisessä pakastimessa pitkällä aikavälillä.
• Pakastusprosessi ja väliaine: INS-1-solujen jäädyttämiseen käytetään CM-1- tai CM-ACF-mediaa hitaan jäädytysprosessin avulla. Se sallii vain 1 °C:n lämpötilan laskun minuutissa solujen elinkelpoisuuden suojelemiseksi.
• Sulatusprosessi: Jäädytetyt INS-1-solut sulatetaan vesihauteessa, joka on esiasetettu 37 celsiusasteen lämpötilaan 40-60 sekunnin ajaksi. Sulattamisen jälkeen solut lisätään tuoreeseen väliaineeseen ja kaadetaan suoraan uuteen pulloon kasvattamista varten. Vuorokauden kuluttua väliaine vaihdetaan, jotta jäädytysmedian komponentit saadaan poistettua.
• Bioturvallisuustaso: INS-1-rottien insulinoomasolujen viljelyyn tarvitaan bioturvallisuustaso 1 -laboratorio.

MX-1-solut: MX-1: Tutkimussovellukset

Tätä ihmisen rinta-adenokarsinooman MX-1-solulinjaa käytetään yleisesti rintasyöpätutkimuksissa MDA-MB-231- tai MCF-7-solujen sijasta. Seuraavassa on muutamia tämän solulinjan erityissovelluksia syöpätutkimuksissa.

Lääkeresistenssimekanismit

MX-1-soluja käytetään tutkimaan molekyylitekijöitä, jotka välittävät resistenssin kehittymistä rintasyöpälääkkeitä vastaan. Tutkimuksissa on laajalti käytetty MX-1-soluja lääkeresistenttien mallien luomiseen. Vuonna 2021 julkaistussa tutkimuksessa raportoitiin MX-1-solujen käytöstä doksorubisiinille resistentin rintasyöpäsolulinjan tuottamiseen. Kehitetyssä solumallissa validoitiin ABC-kuljettaja ABCB1:n ja epiteeli-mesenkymaalisen siirtymän (EMT) osallistuminen kemoresistenssin hankkimiseen [5].

Geeniekspressio/solusignaalireitti

MX-1-solulinja voidaan transfektoida ohimenevästi geenien ilmentymismallien ja solusignalointireittien selvittämiseksi. Tutkimuksissa on käytetty MX-1-soluja shRNA:n (short hairpin RNA) ja ei-koodaavan RNA:n transfektioon niiden vaikutuksen tutkimiseksi rintasyöpäsolujen proliferaatioon ja kasvuun. Lisäksi on selvitetty niihin liittyviä geenien signalointireittejä [2, 6].

Mahdollisten inhibiittorien seulonta

MX-1-soluja voidaan käyttää mahdollisten rintasyöpää vastaan tarkoitettujen lääkkeiden seulontaan, koska ne jäljittelevät syöpäsolujen mikroympäristöä. Eräässä tutkimuksessa on osoitettu, että mikrotubulustoksiini vinorelbiini, joka laukaisi solukuoleman ja polyploidian MX-1-soluissa, on terapeuttisesti aktiivinen [4].

Tilaa MX-1-solulinja tänään

MX-1-solulinja Resurssit: Materiaalit: Protokollia, videoita ja muuta

Viljely- ja transfektiomenetelmiä koskevia resursseja on saatavilla rajoitetusti, mutta olemme keränneet mahdollisimman paljon tietoa.

Soluviljelyprotokollat

MX-1-soluja käytetään monissa ohimenevän transfektion analyysitutkimuksissa. Olemme listanneet tähän muutamia resursseja, jotka auttavat sinua transfektioprotokollien kanssa.

• MX-1-solujen transfektio: Tässä julkaisussa kuvataan protokolla siRNA:n transfektiota varten MX-1-soluissa geenin knock-out-mallin kehittämiseksi.
• Nisäkässolujen transfektio: Tässä artikkelissa on kaikki olennaiset tiedot nisäkässolulinjoissa käytettävistä transfektiomenetelmistä.

Toivomme, että tämä artikkeli on antanut sinulle arvokasta tietoa MX-1-solulinjasta ja että olet saanut paremman käsityksen siitä, miten näitä soluja viljellään, ylläpidetään ja hyödynnetään tutkimuksessasi. Jos olet kiinnostunut työskentelemään MX-1-solulinjan kanssa, älä epäröi tilata meiltä, jotta voit aloittaa tutkimusmatkasi!

Usein kysytyt kysymykset MX-1-rintasyöpäsolulinjasta

Viitteet

1. Stefanski, C.D. ja J.R. Prosperi, CHK1-resistenssin torjuminen kolmoisnegatiivisessa rintasyövässä: EGFR:n esto mahdollisena yhdistelmähoitona. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al., cGAMP:n analogi, c-di-AMP, aktivoi STING-välitteisen solukuolemareitin estrogeenireseptorinegatiivisissa rintasyöpäsoluissa. Apoptosis, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Proteominen analyysi apoptoosiproteiininkaltaisen proteiinin-2: n inhibiittorinvaikutuksesta rintasyöpäsolujen proliferaatioon. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa ja J. Magae, Vinorelbine, a Microtubule Toxin, Induces Apoptosis and Polyploidy in MX-1, a Human Triple-Negative Breast Cancer Cell Line. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Kubiliute, R., et al., Ei-genotoksinen ABCB1-aktivaattori tetrafenyylifosfonium voi edistää doksorubisiiniresistenssiä MX-1-rintasyöpäsolulinjassa. Tieteelliset raportit, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Jiang, R., et al., Mixomics-analyysi rintasyövästä: Pitkä ei-koodaava RNA linc01561 toimii ceRNA:na, joka osallistuu rintasyövän etenemiseen. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: p. 1-9.