Hep3B-solut: Hepatosellulaarisen karsinooman tutkimus ja löytäminen

HEP3B on kuolematon ihmisestä peräisin oleva hepatosyyttikarsinooman solulinja. Sitä käytetään laajalti hepatotoksisuuden ja lääkemetabolian tutkimuksessa. HEP3B:n transfektiotehokkuus on huomattava, minkä vuoksi näitä soluja käytetään yleisesti maksasyövän kehityksen, etenemisen ja terapeuttisten toimenpiteiden tutkimiseen. Tässä artikkelissa käsitellään kaikki tarvittavat tiedot HEP3B-solulinjasta, jotta voit työskennellä sen kanssa. Pääasiassa se sisältää:

HEP3B-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä
HEP3B-solulinjan viljelyä koskevat tiedot
HEP3B-solulinja: HEPB3 HEPB3: edut ja rajoitukset: edut ja rajoitukset
HEP3B-solujen sovellukset tutkimuksessa
HEP3B-solulinjaa koskevat julkaisut
HEP3B-solulinjaa koskevat resurssit: HEPB3 HEPB3: protokollat, videot ja paljon muuta: HEPB3 HEPB3: protokollat, videot ja paljon muuta

1.hEP3B-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä

Solulinjasta tarvitaan ensisijaisesti tietoa sen alkuperästä ja yleisistä ominaisuuksista. Ne voivat auttaa sinua päättämään sen käytöstä tutkimuksessasi ja auttaa sinua sen käsittelyssä. Tämä artikkeliosio kattaa kaikki olennaiset tiedot HEP3B:n alkuperästä ja ominaisuuksista. Täältä opit: Mikä on Hep 3B-solulinja? Mikä on Hep3B-solujen alkuperä? Mikä on HEP3B-solujen morfologia?

HEP3B, jatkuva ihmisen hepatoomasolulinja, on peräisin 8-vuotiaan afrikkalaisen pojan maksakudoksesta, jolla oli hepatosellulaarinen karsinooma (HCC). Aden ja kollegat perustivat sen vuonna 1979 Barbara B. Knowlesin laboratoriossa Wistar-instituutissa Philadelphiassa, Yhdysvalloissa [1].
HEP3B-solujen kromosomiin on integroitunut hepatiitti B -viruksen (HBV) genomi.
Näillä hepatosyyttikarsinoomasoluilla on epiteelimorfologia.
HEP3B-solujen modaalinen kromosomiluku on 60. Toisin kuin HepG2-soluilla, niillä ei ole uudelleenjärjestäytynyttä kromosomia 1.

Mitä eroa on HepG2:n ja Hep3B:n välillä?

HepG2 ja HEP3B eroavat toisistaan kromosomien lukumäärän suhteen solua kohti. HEP3B:ssä on 60 kromosomia, kun taas HepG2-soluissa on keskimäärin 55 kromosomia. Lisäksi HepG2 on ei-tuumorigeeninen ja hepatiitti B -negatiivinen, kun taas HEP3B on tumorigeeninen ja HBV-positiivinen.

Maksasyöpä suurennettuna mikroskoopilla.

2.hEP3B-solulinjan viljelyä koskevat tiedot

Tieto solulinjan viljelytiedoista voi helpottaa sen käsittelyä. Tässä osiossa käsitellään kaikki HEP3B HBV -solulinjan viljelyyn liittyvät keskeiset seikat, mukaan lukien: Mikä on Hep3B-solujen kaksinkertaistumisaika? Mitkä ovat HEP3B:n viljelyolosuhteet? Miten HEP3B:n HCC-soluja viljellään?

HEP3B-solujen viljelyyn liittyvät keskeiset seikat

Kaksinkertaistumisaika:	HEP3B-solujen kaksinkertaistumisaika on noin 36 tuntia.
Adheesiossa tai suspensiossa:	Tämä hepatoomasolulinja on tarttuva.
Jakosuhde:	HEP3B-soluja viljellään suhteessa 1:2-1:4. Adherentit HEP3B-solut huuhdellaan 1 x PBS:llä ja inkuboidaan sitten Accutase-dissosiaatioliuoksella. 8-10 minuutin kuluttua lisätään tuoretta mediaa ja solut sentrifugoidaan. Kerätyt solut resuspendoidaan sitten varovasti ja kaadetaan pulloihin, jotka sisältävät kasvatusmediaa suositellussa jakosuhteessa.
Kasvualusta:	HEP3B-solujen viljelyyn käytetään EMEM-mediaa, joka sisältää 10 % FBS:ää, 2,2 g/l NaHCO3:a, 2 mM L-Glutamiinia ja Earlen tasapainotettua suolaliuosta (EBSS).
Kasvuolosuhteet:	HEP3B-soluja viljellään 37 °C:n kostutetussa inkubaattorissa, jossa on jatkuva 5 %:n hiilidioksidipitoisuus.
Varastointi:	Pakastetut HEP3B-solut säilytetään alle -150 °C:n lämpötilassa sähköpakastimessa tai nestemäisen typen höyryfaasissa.
Pakastusprosessi ja väliaine:	HEP3B-soluille suositeltu pakastusmedia on CM-1 tai CM-ACF. Solut pakastetaan käyttämällä hidasta pakastusprosessia, jossa lämpötila laskee vain 1 °C minuutissa solujen elinkelpoisuuden suojelemiseksi.
Sulatusprosessi:	Pakastetut solut sulatetaan 37 °C:n vesihauteessa 40-60 sekunnin ajan. Myöhemmin solut lisätään tuoreeseen kasvualustaan ja sentrifugoidaan pakastusmedian osien poistamiseksi. Kerätyt solut suspendoidaan uudelleen ja annostellaan uusiin pulloihin kasvua varten.
Bioturvallisuustaso:	HEP3B-solujen viljelyyn tarvitaan bioturvallisuustason 1 laboratorio.

Hep3B-solujen adheentti, puoliksi juokseva kerros 10× ja 20× suurennoksella.

3.hEP3B-solulinja: HEPBEP: Edut ja rajoitukset

HEP3B on laajalti käytetty hepatosellulaarisen karsinooman solulinja. Tässä jaksossa keskitytään näiden hepatoomasolujen eräisiin keskeisiin etuihin ja rajoituksiin.

Edut

HEP3B-solujen tärkeimmät edut ovat:

Helppo viljellä	HEP3B-soluilla ei ole hankalia soluviljelyvaatimuksia, joten niitä on helppo käsitellä ja ylläpitää tutkimuslaboratoriossa. Tämä yksinkertaistaa kokeellisia menettelyjä.
Korkea transfektiotehokkuus	HEP3B-soluilla on huomattava transfektiotehokkuus, minkä vuoksi niitä käytetään laajalti geneettisessä manipuloinnissa ja geeniekspressioon liittyvissä tutkimuksissa.
Kasvainvaikuttavuus	HEP3B on tumorigeeninen hepatosellulaarisen karsinooman solulinja, joka pystyy muodostamaan kasvaimia, kun se injektoidaan immuunipuutteiseen hiireen. Tämä helpottaa syövän etenemisen ja kehittymisen tutkimista HEP3B-ksenotransplantaattimallien avulla.
HEP3B:n P53-status	HEP3B-soluilla on P53-geenimutaatio, joka on samanlainen kuin hepatosellulaarisella karsinoomalla (HCC) ja muilla syövillä, minkä vuoksi ne ovat merkityksellisiä tutkittaessa P53-mutaation vaikutuksia syövän kasvuun, kehitykseen ja etenemiseen.

Rajoitukset

HEP3B-solulinjaan liittyvä rajoitus on:

In vitro -solumalli

HEP3B-solulinja toimii hepatosellulaarisen karsinooman (HCC) solujen in vitro -mallina. Se ei kuitenkaan välttämättä edusta täysin HCC:n monimutkaisuutta, jota esiintyy elävissä organismeissa. Näin ollen kokeelliset tulokset in vitro voivat poiketa in vivo havaituista tuloksista.

4.hEP3B-solujen sovellukset tutkimuksessa

HEP3B-solulinja tarjoaa useita tutkimussovelluksia biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Joitakin HEP3B-solujen tärkeimpiä tutkimussovelluksia ovat mm. seuraavat:

Syöpäbiologia: HEP3B on ihmisen hepatosellulaarisen karsinooman solulinja. Se on korvaamaton solumalli HCC:n kehittymisen ja etenemisen taustalla olevien solu- ja molekyylimekanismien tutkimiseen. Tutkijat käyttävät näitä soluja tutkiakseen maksasyöpään liittyviä geneettisiä mutaatioita, soluprosesseja ja solusignaalireittejä. Esimerkiksi eräässä tutkimuksessa hyödynnettiin HEP3B-soluja ja todettiin, että mikroRNA-223-3p säätelee NLRP3-inflammasomin komponentteja, estää proliferaatiota ja tehostaa HEP3B-hepatokarsinoomasolujen apoptoosia [2].
Lääkkeiden seulonta ja kehittäminen: HEP3B-solulinjaa käytetään myös maksasyöpää vastaan tarkoitettujen uusien terapeuttisten aineiden testaamiseen, seulontaan ja kehittämiseen. Lisäksi sitä käytetään erilaisten syöpälääkkeiden ja -hoitojen toksisuuden ja tehon arviointiin. Tutkijat käyttivät näitä hepatoomasoluja myös lääkeaineenvaihdunnan tutkimiseen. Tutkijat käyttivät HEP3B-soluja ja arvioivat Cotinus coggygria -kasviuutteen sytotoksista potentiaalia HEP3B-hepatosyyttikarsinoomasoluissa [3].
Virusinfektiot: HEP3B on hepatiitti B -viruspositiivinen solulinja, joten sitä käytetään sellaisten virusinfektioiden tutkimiseen, jotka voivat johtaa maksasyövän kehittymiseen, eli HBV:n ja HCV:n. Tämä voi auttaa ymmärtämään paremmin virusinfektioita ja kehittämään mahdollisia viruslääkkeitä. Esimerkiksi eräässä tutkimuksessa käytettiin HEP3B-hepatosyyttisyöpäsoluja ja tutkittiin ubikitinaation merkitystä hepatiitti c -viruksen leviämiselle. Tulokset viittasivat siihen, että ubikitiinispesifinen proteaasi 15 (USP15) osallistuu HCV:n leviämiseen säätelemällä hepatosyytti-spesifisiä toimintoja, kuten lipidipisaroiden muodostumista ja HCV:n RNA:n translaatiota [4].

430,00 €*

Sisältö: 1.5 milliliter

Hinnat ilman veroja ja toimituskuluja

cryovial

Tuotenumero: 305141

5.hEP3B-solulinjaa koskevat julkaisut

Tässä osassa käsitellään muutamia mielenkiintoisia tutkimusjulkaisuja HEP3B-soluista.

Apoptoosin ja autofagian säätely luteoliinilla ihmisen hepatosellulaarisissa Hep3B-soluissa

Tässä Biochemical and Biophysical Research Communications -lehdessä (2019) julkaistussa julkaisussa ehdotettiin, että luteoliiniyhdisteen aiheuttama endoplasmisen retikulumin stressi voi aiheuttaa P53-null HEP3B-soluissa kasvainvastaista vaikutusta P53:sta riippumattomalla tavalla.

Avicennia marina -kasvista eristetyn lupeolin potentiaalinen kohdistuminen Hep3B-maksasyöpäsoluihin

Archiv der Pharmazie -lehdessä (2021) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin pentasyklistä triterpenoidia, lupeolia, potentiaaliseksi syöpälääkkeeksi HEP3B-soluja vastaan.

Cnidium monnieri (L.) Cussonin etanoliuute indusoi solusyklin pysähtymisen ja apoptoosin p53-riippumattoman reitin säätelyn kautta HepG2- ja Hep3B-hepatosellulaarisissa karsinoomasoluissa

Tämä artikkeli on julkaistu Molecular Medicine Reports -lehdessä (2017). Tutkimustulosten mukaan Cnidium monnieri (L.) Cusson etanoliuute indusoi solukuolemaa (apoptoosia) ja solusyklin pysähtymistä hepatokarsinoomasoluissa HepG2 ja HEP3B p53- ja Akt/GSK-3β-signalointireitin säätelyn kautta.

Auranofiini tehostaa sulforafaanin välittämää apoptoosia hepatosellulaarisen karsinooman Hep3B-soluissa PI3K/Akt-signalointireitin inaktivoimisen kautta

Tässä Biomolecules and Therapeutics -lehdessä (2020) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että auranofiinilla on synergistinen vaikutus ja se edistää HEP3B-solujen sulforafaanivälitteistä apoptoosia PI3K/AKT-reitin aktivoinnin kautta.

Ympyrä RNA-0072309:llä on kasvainvastainen vaikutus Hep3B-solulinjassa kohdistamalla mikroRNA-665:een

Tässä BioFactors-lehdessä (2023) julkaistussa tutkimusartikkelissa ehdotettiin, että pyöreä RNA-0072309 vaikuttaa kasvainten vastaisesti hepatosellulaarisiin HEP3B-soluihin kohdistamalla miRNA-665:een.

6.hEP3B-solulinjan resurssit: HEPB3P3: protokollat, videot ja muuta

Seuraavassa on muutamia HEP3B-soluista saatavilla olevia resursseja:

HEP3B-transfektio: HEP3B-solujen transfektioprotokolla.
HEP3B-transfektion tehokkuus: Tämä linkki auttaa sinua oppimaan HEP3B DMEM-mediumin koostumuksen, solujen passagoinnin ja HEP3B-solujen transfektioprotokollan. Lisäksi se tarjoaa tietoa HEP3B lipofectamine 3000 -reagenssin optimoimiseksi transfektioprotokollassasi.

Seuraava linkki sisältää HEP3B-soluviljelyprotokollan:

HEP3B-soluviljelyolosuhteet: Tämän linkin avulla voit tutustua Huh7- ja HEP3B-soluviljelmien käsittelyä ja ylläpitoa koskevaan protokollaan.
HEP3B-solut: Tällä verkkosivustolla on runsaasti tietoa HEP3B-soluista, mukaan lukien HEP3B-mediat, solujen jakamisen protokolla, sulatus ja proliferatiivisten ja kryosäilytettyjen viljelmien käsittely.

Viitteet

Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origin and prop-erties of hepatocellular carcinoma cell lines. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
Wan, L., et al., miRNA-223-3p säätelee NLRP3:a edistääkseen apoptoosia ja estääkseen hep3B-solujen proliferaatiota. Kokeellinen ja terapeuttinen lääketiede, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
Danjolli-Hashani, D. ja S. Selen-Isbilir, Cotinus coggygria -uutteen sytotoksinen vaikutus Hep3B-syöpäsolulinjaan. Natural Product Research, 2022: s. 1-4.
Kusakabe, S., et al., USP15 osallistuu hepatiitti C -viruksen leviämiseen viruksen RNA-translaation ja lipidipisaroiden muodostumisen säätelyn kautta. Journal of Virology, 2019. 93(6): s. 10.1128/jvi. 01708-18.