Ihmisen napanuoran laskimoiden endoteelisolut (HUVEC)
HUVEC-solut ovat primaarisia endoteelisoluja, jotka ovat tärkeä työkalu biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Niiden avulla tutkijat voivat tutkia angiogeneesiä, verisuonibiologiaa sekä sairauksia, kuten ateroskleroosia ja syöpää. HUVEC-soluja käytetään endoteelisolujen käyttäytymisen, solujen signalointimekanismien ja lääketestauksen tutkimiseen, ja ne tarjoavat arvokasta tietoa sydän- ja verisuonitautien sekä syövän mahdollisista hoitomuodoista. Ne toimivat myös mallijärjestelmänä verisuonibiologian tutkimuksissa.
HUVEC-solujen alkuperä ja yleiset ominaisuudet
Tieto solulinjan alkuperästä ja yleisistä ominaisuuksista on keskeistä sen sopivuuden arvioinnissa tutkimukseesi. Tämä osio auttaa sinua oppimaan tämän olennaisen tiedon HUVEC-endoteelisoluista: Mihin HUVEC-soluja käytetään? Mikä on HUVEC-solujen täydellinen nimi? Mitkä ovat HUVEC-solujen erottuvat ominaisuudet? Mikä on HUVEC-solujen morfologia? Mikä on HUVEC-solujen halkaisija? Mikä on HUVEC-solujen koko?
- HUVEC-solut eristetään ihmisen napanuoraveren laskimoiden endoteelista.
- HUVEC-solujen morfologia on endoteelisolujen kaltainen. Ne ovat yleensä monikulmaisia ja niiden keskellä on pyöreä tuma.
- HUVEC-solujen halkaisija on 17 μm.
- Nämä endoteelisolut ovat diploidisia. Niiden modaalinen kromosomiluku on 46.
HUVEC TERT2
HUVEC TERT2 on ikuistettu solulinja, joka on peräisin primaarisista ihmisen napanuoran laskimoiden endoteelisoluista (HUVEC). Se kehitettiin tuomalla ihmisen telomeraasi-käänteiskopioijaentsyymi (TERT) -geeni HUVEC-solujen genomiin. Tämä muutos auttoi pidentämään niiden elinikää viljelmässä, mikä mahdollisti pidemmän aikavälin kokeet ilman primaarisiin HUVEC-soluun liittyviä rajoituksia.
Mitä eroa on HUVEC- ja HMEC-1-soluilla?
HUVEC- ja HMEC-1-endoteelisolulinjojen rakenne ja monimutkaisuus ovat vertailukelpoisia. HMEC-1-solut muodostavat kuitenkin HUVEC-soluja homogeenisemman populaation solujen koon ja rakeisuuden suhteen. Tämä voi vähentää kokeellisten tietojen vaihtelua.
HUVEC-solulinjan viljelyohjeet
Tämän artikkelin osio keskittyy antamaan sinulle tärkeää tietoa HUVEC-soluviljelystä. Tämä auttaa sinua suuresti työskentelyssäsi niiden kanssa. Täältä löydät vastaukset seuraaviin usein kysyttyihin kysymyksiin: Mikä on HUVEC-solujen kaksinkertaistumisaika? Mikä on HUVEC-solujen siemennestiheys? Kuinka monta siirtoa HUVEC-soluissa on? Mikä on HUVEC-soluviljelyalusta? Kuinka HUVEC-soluja viljellään?
HUVEC-solujen viljelyn avainkohdat
Kaksinkertaistumisaika:
HUVEC-solujen kaksinkertaistumisaika on noin 23,5 tuntia. Se voi kuitenkin vaihdella soluviljelyolosuhteiden ja passagien lukumäärän mukaan.
Adherentti vai suspensiossa:
HUVEC on kiinnittyvä solulinja. Solut kasvavat ja muodostavat monokerroksia.
Jakosuhde:
HUVEC-solujen subkultivointisuhde on 1:2–1:4. Istutusta varten solut pestään 1x fosfaattipuskuriliuoksella ja niihin lisätään dissosiaatioliuosta (Accutase) 8–10 minuutiksi huoneenlämpötilassa. Sen jälkeen lisätään viljelyväliaine ja irronneet solut sentrifugoidaan. Supernatantti heitetään pois ja solupelletti suspendoidaan varovasti uudelleen. Solut siirretään uuteen viljelypulloon kasvattamista varten.
Kasvatusväliaine:
HUVEC-solujen viljelyyn käytetään endoteelisolujen kasvualustaa. Alusta vaihdetaan 2–3 päivän välein. HUVEC-soluja voidaan käyttää 8–10 sukupolvea.
Kasvatusolosuhteet:
Ihmisen endoteelisolulinjaa (HUVEC) ylläpidetään kostutetussa inkubaattorissa, jossa on 5 % CO2 ja lämpötila 37 °C.
Säilytys:
HUVEC-soluja säilytetään yleensä alle -150 °C:n lämpötilassa ultra-matalalämpötilaisessa pakastimessa tai nestemäisen typen höyryvaiheessa. Tämä suojaa solujen elinkelpoisuutta pidemmällä aikavälillä.
Jäädytysprosessi ja väliaine:
HUVEC-solujen säilyttämiseen suositellaan CM-1- tai CM-ACF-pakastusväliainetta. Yleensä suositellaan hidasta pakastusprosessia, koska se mahdollistaa vain 1 °C:n lämpötilan laskun minuutissa, mikä estää soluja kärsimästä shokista ja säilyttää elinkelpoisuuden.
Sulatusprosessi:
Sulata jäädytetyt solut asettamalla ne 37 °C:n esilämmitettyyn vesihauteeseen 40–60 sekunniksi, kunnes jäljellä on vain pieni jääpalanen. Lisää seuraavaksi tuoretta elatusainetta soluihin ja sentrifugoi. Tämä vaihe on tarpeen, jotta solut puhdistuvat jäätyneen elatusaineen jäännöksistä. Suspendoi solupelletti uudelleen ja siirrä solut uuteen pulloon, jossa on viljelyelatusainetta.
Bioturvallisuustaso:
HUVEC-soluviljelmien asianmukaiseen käsittelyyn tarvitaan bioturvallisuustason 1 laboratorio.
Julkaistu: 2023 | Viimeksi tarkistettu: toukokuu 2026
Edut ja rajoitukset
Muiden ihmisen solulinjojen tavoin HUVEC-soluilla on omat etunsa ja rajoituksensa. Tässä osiossa syvennymme joihinkin merkittävimpiin seikkoihin, jotka vaikuttavat merkittävästi niiden käyttöön tutkimuksessa.
Edut
HUVEC-solujen tärkeimmät edut ovat:
-
Endoteelisolumalli
Erittäin merkitykselliset mallit angiogeneesin, verisuonibiologian ja endoteelitoimintaan liittyvien sairauksien tutkimiseen.
-
Helppo viljellä
Suhteellisen helppo eristää ihmisen napanuorasta. Soluviljelyvaatimukset eivät ole vaativia, ja soluja on helppo ylläpitää tutkimuslaboratorioissa.
Rajoitukset
HUVEC-endoteelisolulinjaan liittyvät rajoitukset ovat:
-
Rajoitettu elinikä
HUVEC-soluilla on rajallinen elinikä, tyypillisesti 8–10 soluviljelykierrosta, mikä on rajoitus pitkäaikaisille kokeille. Ne voivat ikääntyä soluviljelykierrosten lisääntyessä.
HUVEC-solujen sovellukset tutkimuksessa
HUVEC-soluilla on merkittävä potentiaali erilaisissa sovelluksissa biolääketieteen alalla. Tässä esittelemme joitakin tärkeitä HUVEC-solujen tutkimuskäyttöjä.
- Sydän- ja verisuonitautien tutkimukset: HUVEC-solulinja on arvokas endoteelisolumalli, joka tarjoaa tietoa ateroskleroosin, tromboosin ja verenpainetaudin kaltaisten sydän- ja verisuonitautien taustalla olevista mekanismeista. Tutkijat käyttävät näitä soluja endoteelitoiminnan häiriöiden, oksidatiivisen stressin ja tulehduksen taustalla olevien mekanismien tutkimiseen. Esimerkiksi vuonna 2020 tehdyssä tutkimuksessa käytettiin HUVEC-soluja ja selvitettiin, että pitkä ei-koodaava RNA TTTY15:llä on keskeinen rooli hypoksian välittämän verisuonten endoteelisolujen vaurion lieventämisessä kohdistumalla miRNA-186-5p-akseliin [1].
- Syöpätutkimus: HUVEC-solut ovat ihanteellisia verisuonibiologian tutkimiseen. Siksi niitä käytetään tutkimaan kasvaimen angiogeneesiä ja endoteelisolujen vuorovaikutusta. Tämä auttaa tutkijoita ymmärtämään, miten kasvaimet saavat ylimääräistä verenkiertoa ja lisääntyvät. Esimerkiksi Hui Wang ja kollegat havaitsivat, että suun limakalvon levyepiteelisyövän (OSCC) vapauttavat eksosomit lisäävät miRNA-210-3p-tasoja ja vähentävät ephrin A3:n ilmentymistä HUVEC-soluissa sekä edistävät putkien muodostumista säätelemällä PI3K/AKT-kaskadia, mikä on vahvistettu HUVEC-putkien muodostumistestillä [2].
- Lääketutkimus: HUVEC-endoteelisoluja käytetään laajalti lääketutkimuksessa. Tutkijat voivat arvioida lääkkeiden tehoa, myrkyllisyyttä ja luonnollisten yhdisteiden, nanohiukkasten ja muiden terapeuttisten aineiden mahdollisia sivuvaikutuksia in vitro käyttämällä HUVEC-soluja. Esimerkiksi eräässä tutkimuksessa arvioitiin Rheum ribes -uutteesta syntetisoitujen hopeananohiukkasten myrkyllisyyttä HUVEC-soluilla [3].
HUVEC-soluja käsittelevät julkaisut
Tässä artikkelin osiossa luetellaan muutamia usein siteerattuja ja mielenkiintoisia tutkimusjulkaisuja, joissa käsitellään HUVEC-soluja.
Tämä tutkimus julkaistiin lehdessä Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology (2019). Siinä todettiin, että gamma-aminovoihappo (GABA), joka on välittäjäaine, estää H2O2:n aiheuttamaa oksidatiivista stressiä HUVEC-soluissa; näin ollen se voisi olla tehokas farmakologinen aine oksidatiiviseen vaurioon liittyvien sydän- ja verisuonitautien hoidossa.
Tämä Biochemical and Biophysical Research Communications -lehdessä (2020) julkaistu tutkimus selvitti, kuinka estrogeeni säätelee signaalinvälittäjää, glykoproteiini 130:tä (gp130), HUVEC-soluissa.
Substraatin jäykkyys sääteli A549-solujen ja HUVEC-solujen migraatiota ja angiogeneesipotentiaalia
Tämä Journal of Cellular Physiology -lehdessä (2017) julkaistu tutkimusartikkeli tutki vaihtelevan substraatin jäykkyyden vaikutuksia endoteelisolujen (A549 ja HUVEC-solut) migraatioon ja angiogeneesiin. Tutkijat suorittivat HUVEC-solujen migraatio- ja angiogeneesitestejä näiden vaikutusten arvioimiseksi.
Kuparioksidin nanopartikkelien kertyminen lysosomeihin aiheuttaa HUVEC-solujen kuoleman
Tämä Biomaterials-lehdessä (2018) julkaistu tutkimus tutkii mahdollisia mekanismeja, jotka ovat vastuussa kuparioksidin nanopartikkelien toksisuudesta verisuonten endoteelisoluissa.
Tämä Medicine-lehdessä (2020) julkaistu tutkimus esittää, että luonnollinen yhdiste, kversetiini, estää TNF-alfa-välitteistä HUVEC-apoptoosia ja tulehdusta säätelemällä AP-1- ja NF-kB-signalointireittejä.
6. HUVEC-solulinjan resurssit: ohjeet, videot ja muuta
Seuraavassa on muutamia HUVEC-soluja koskevia verkkolähteitä.
- HUVEC-transfektio: Tämä verkkosivusto tarjoaa kattavaa tietoa HUVEC-transfektiosta. Se sisältää esimerkiksi transfektioreagensseja koskevia tietoja ja protokollan in vitro -HUVEC-transfektiota varten.
Seuraava linkki sisältää HUVEC-soluviljelyprotokollan.
- HUVEC-soluviljely: Tämä asiakirja auttaa sinua oppimaan HUVEC-soluviljelyprotokollat aliviljelyä ja kryosäilöttyjen viljelmien käsittelyä varten.
Viitteet
- Zheng, J., et al., LncRNA TTTY15 säätelee hypoksian aiheuttamaa verisuonten endoteelisolujen vaurioitumista kohdentamalla miR-186-5p:n sydän- ja verisuonitaudeissa. European Review for Medical & Pharmacological Sciences, 2020. 24(6).
- Wang, H., et al., OSCC-eksoosomit säätelevät miR-210-3p:tä kohdentamalla EFNA3:n edistääkseen suun syövän angiogeneesiä PI3K/AKT-reitin kautta. BioMed research international, 2020. 2020.
- Unal, İ. ja S. Egri, Hopeananohiukkasten biosynteesi Rheum ribes -kasvin vesiliuoksella, karakterisointi ja sen toksisuuden arviointi HUVEC-soluilla ja Artemia salina -suvun organismeilla. Inorganic and Nano-Metal Chemistry, 2022: s. 1–14.