Ihmisen napavaltimon endoteelisolut (HUVEC)

HUVEC ovat primaarisia endoteelisoluja, jotka ovat tärkeä väline biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Niiden avulla tutkijat voivat tutkia angiogeneesiä, verisuonibiologiaa ja sairauksia, kuten ateroskleroosia ja syöpää. HUVEC-soluja käytetään endoteelisolujen käyttäytymisen, solujen signalointimekanismien ja lääketestien tutkimiseen, ja ne tarjoavat arvokasta tietoa sydän- ja verisuonitautien ja syövän mahdollisista hoitomuodoista tai hoidoista. Se toimii myös mallijärjestelmänä verisuonibiologisissa tutkimuksissa.

Tähän artikkeliin on koottu kaikki perustiedot, joita tarvitset ennen HUVEC-solujen kanssa työskentelyä. Se kattaa:

HUVEC-solujen alkuperä ja yleiset ominaisuudet
HUVEC-solulinjan viljelyä koskevat tiedot
HUVEC-solulinja: HUVECVEC-luokka: edut ja rajoitukset: edut ja rajoitukset
HUVEC-solujen sovellukset tutkimuksessa
HUVEC-soluja sisältävät julkaisut
HUVEC-solulinjan resurssit: HUVEC-vuori: protokollat, videot ja muut: protokollat, videot ja muut

1. HUVEC-solujen alkuperä ja yleiset ominaisuudets

Tieto solulinjan alkuperästä ja yleisistä ominaisuuksista on ratkaisevaa päätettäessä, soveltuuko se tutkimukseesi. Tämä osio auttaa sinua oppimaan nämä olennaiset tiedot HUVEC-endoteelisoluista: Mihin HUVEC-soluja käytetään? Mikä on HUVEC-solujen täydellinen muoto? Mitkä ovat HUVEC-solujen erityispiirteet? Mikä on Huvecin morfologia? Mikä on HUVEC-solujen halkaisija? Mikä on Huvec-solujen koko?

HUVEC-solut saadaan ihmisen napanuorasuonen endoteelistä.
HUVEC-solujen morfologia on endoteelin kaltainen. Ne ovat yleensä monikulmion muotoisia, ja niiden keskellä on pyöreä ydin.
HUVEC-solujen koko on 17 μm halkaisijaltaan.
Nämä endoteelisolut ovat diploideja. Niiden modaalinen kromosomimäärä on 46.

HUVEC TERT2

HUVEC TERT2 on kuolematon solulinja, joka on johdettu primaarisista ihmisen napavaltimon endoteelisoluista (HUVEC). Se kehitettiin lisäämällä ihmisen telomeraasi-reversiologinen transkriptaasi (TERT) -geeni HUVEC-solujen genomiin. Tämä muutos auttoi pidentämään niiden elinikää viljelyssä, mikä mahdollisti pidempiaikaiset kokeet ilman primaarisiin HUVEC-soluihin liittyviä rajoituksia.

Mitä eroa on HUVEC- ja HMEC-1-soluilla?

HUVEC- ja HMEC-1-endoteelisolulinjojen rakenne ja monimutkaisuus ovat vertailukelpoisia. HMEC-1-solut ovat kuitenkin solujen koon ja rakeisuuden suhteen homogeenisempia kuin HUVEC-solut. Tämä saattaa vähentää vaihtelua kokeellisissa tiedoissa.

Laadukas mikroskooppimatka useilla suurennoksilla - sujuva liike ja oikean ihmisen laskimonäytteen tarkennettu tutkiminen.

2.hUVEC-solulinjaa koskevat viljelytiedot

Tässä artikkelin osassa keskitytään antamaan sinulle ratkaisevan tärkeää tietoa HUVEC-soluviljelystä. Tämä auttaa suuresti työskentelyäsi niiden kanssa. Tästä löydät vastaukset seuraaviin usein kysyttyihin kysymyksiin: Mikä on HUVEC:n kaksinkertaistumisaika? Mikä on HUVEC:n kylvötiheys? Kuinka monta läpikäyntiä HUVEC-soluissa on? Mikä on HUVEC-solujen solumedia? Miten HUVEC-soluja viljellään?

HUVEC-solujen viljelyä koskevat keskeiset seikat

Kaksinkertaistumisaika:	HUVEC-solujen kaksinkertaistumisaika on noin 23,5 tuntia. Se voi kuitenkin vaihdella soluviljelyolosuhteiden ja solupassagemäärän mukaan.
Adheesiossa tai suspensiossa:	HUVEC on tarttuva solulinja. Solut kasvavat ja muodostavat monokerroksia.
Jakosuhde:	HUVEC-solujen jakosuhde on 1:2-1:4. Kylvöä varten solut pestään 1x fosfaattipuskurisuolaliuoksella ja lisätään dissosiaatioliuosta (Accutase) 8-10 minuutin ajan huoneenlämmössä. Tämän jälkeen lisätään kasvatusmedia ja irrotetut solut sentrifugoidaan. Supernatantti hylätään ja solupelletti suspendoidaan varovasti uudelleen. Solut annostellaan uuteen kasvatuspulloon kasvatusta varten.
Kasvualusta:	HUVEC-solujen viljelyyn käytetään endoteelisolujen kasvualustaa. Kasvualusta vaihdetaan 2-3 päivän välein. HUVEC-soluja on hyvä käyttää jopa 8-10 passagea varten.
Kasvuolosuhteet:	Ihmisen endoteelisolulinjaa (HUVEC) pidetään kostutetussa inkubaattorissa, jossa on 5 % CO2 37 °C:ssa.
Varastointi:	HUVEC-solut säilytetään yleensä alle -150 °C:n lämpötilassa erittäin alhaisen lämpötilan pakastimessa tai nestemäisen typen höyryfaasissa. Tämä suojaa solujen elinkelpoisuutta pidempään.
Pakastusprosessi ja väliaine:	HUVEC-solujen säilyttämiseen suositellaan CM-1- tai CM-ACF-pakastusmediaa. Yleensä suositellaan hidasta pakastusprosessia, koska se mahdollistaa vain 1 °C:n lämpötilan laskun minuutissa, mikä estää solujen sokin ja säilyttää elinkelpoisuuden.
Sulatusprosessi:	Pakastetut solut sulatetaan asettamalla ne 37 °C:n esilämmitettyyn vesihauteeseen 40-60 sekunniksi, kunnes jäljellä on vain pieni jäämöhkäle. Tämän jälkeen lisätään soluihin tuoretta väliaineita ja sentrifugoidaan. Tämä vaihe on tarpeen solujen poistamiseksi, jotta pakastusmedian jäänteet saadaan poistettua. Resuspendoi solupelletti ja siirrä solut uuteen kolviin, jossa on kasvatusmediumia.
Bioturvallisuustaso:	HUVEC-soluviljelmien asianmukainen käsittely edellyttää bioturvallisuustason 1 laboratoriota.

Yksityiskohtainen mikroskooppikuva ihmisen napanuorasuonen endoteelisoluista eri tiheyksillä ja suurennoksilla.

3. Edut ja rajoitukset

Kuten muillakin ihmisen solulinjoilla, myös HUVEC-soluilla on omat etunsa ja rajoituksensa. Tässä jaksossa tarkastelemme joitakin merkittäviä niistä, jotka vaikuttavat merkittävästi niiden käyttöön tutkimuksessa.

Edut

HUVEC-solujen tärkeimmät edut ovat:

Endoteelisolujen malli
Erittäin merkitykselliset mallit angiogeneesin, verisuonibiologian ja endoteelin toimintaan liittyvien sairauksien tutkimiseen.
Helppo viljellä
Suhteellisen helppo eristää ihmisen napanuorasta. Ei ole hankalia soluviljelyvaatimuksia, ja ne ovat helposti ylläpidettävissä tutkimuslaboratorioissa.

Rajoitukset

HUVEC-endoteelisolulinjaan liittyvät rajoitukset ovat seuraavat:

Rajallinen elinikä
HUVEC-soluilla on rajallinen elinikä, joka on tyypillisesti hyvä 8-10 läpikäyntiä varten, mikä rajoittaa pitkäaikaisia kokeita. Niissä voi tapahtua senesenssiä, kun läpivientien määrä kasvaa.

4. HUVEC-solujen sovellukset tutkimuksessa

HUVEC-soluilla on merkittäviä mahdollisuuksia erilaisiin sovelluksiin biolääketieteen alalla. Seuraavassa tuomme esiin joitakin tärkeitä HUVEC-solujen tutkimuskäyttöjä.

Sydän- ja verisuonitautitutkimukset: HUVEC-solulinja on arvokas endoteelisolumalli, joka tarjoaa siten tietoa sydän- ja verisuonitautien, kuten ateroskleroosin, tromboosin ja verenpainetaudin, taustalla olevista mekanismeista. Tutkijat käyttävät näitä soluja endoteelin toimintahäiriöiden, oksidatiivisen stressin ja tulehduksen taustalla olevien mekanismien tutkimiseen. Esimerkiksi vuonna 2020 tehdyssä tutkimuksessa käytettiin HUVEC-soluja ja tutkittiin, että pitkällä ei-koodaavalla RNA:lla TTTY15 on keskeinen rooli hypoksia-välitteisen verisuonten endoteelisoluvaurion parantamisessa kohdistamalla miRNA-186-5p-akseli [1].
Syöpätutkimus: HUVEC-solut ovat ihanteellisia verisuonibiologian tutkimiseen. Siksi niitä käytetään kasvainten angiogeneesin ja endoteelisolujen vuorovaikutuksen tutkimiseen. Tämä auttaa tutkijoita ymmärtämään, miten kasvaimet saavat ylimääräisen verenkierron ja lisääntyvät. Esimerkiksi Hui Wang ja kollegat havaitsivat, että suun levyepiteelisolusyövän (OSCC) solujen vapauttamat eksosomit nostavat miRNA-210-3p-tasoja ja vähentävät efriini A3:n ilmentymistä HUVEC-soluissa ja edistävät putkien muodostumista säätelemällä PI3K/AKT-kaskadia, mikä on vahvistettu HUVEC-putkien muodostusmäärityksellä [2].
Huumeiden testaus: HUVEC-endoteelisoluja käytetään laajalti lääketestaukseen. Tutkijat voivat arvioida luonnollisten yhdisteiden, nanohiukkasten ja muiden terapeuttisten aineiden tehoa, toksisuutta ja mahdollisia sivuvaikutuksia in vitro HUVEC-solujen avulla. Esimerkiksi eräässä tutkimuksessa arvioitiin Rheum ribes -uutteesta syntetisoitujen hopean nanohiukkasten toksisuutta käyttäen HUVEC-soluja [3].

5. Julkaisut, joissa on HUVEC-soluja

Tässä osassa luetellaan muutamia usein siteerattuja ja mielenkiintoisia tutkimusjulkaisuja, joissa on HUVEC-soluja.

Uusi mekanismi, jolla gamma-aminovoihappo (GABA) suojaa ihmisen napanuorasuonen endoteelisoluja (HUVEC) H2O2:n aiheuttamalta hapettumisvauriolta

Tämä tutkimus on julkaistu Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology -lehdessä (2019). Siinä todettiin, että gamma-aminovoihappo (GABA), välittäjäaine, estää _H2O2_{:n aiheuttamaa}oksidatiivista stressiä HUVEC-soluissa; näin ollen se voisi olla tehokas farmakologinen aine oksidatiivisiin vaurioihin liittyviä sydän- ja verisuonitauteja vastaan.

Estrogeeni alentaa gp130:n ilmentymistä HUVEC-soluissa säätelemällä ADAM10:tä ja ADAM17:ää estrogeenireseptorin välityksellä

Tässä Biochemical and Biophysical Research Communications -lehdessä (2020) julkaistussa tutkimuksessa selvitettiin, miten estrogeeni säätelee signaalinsiirtäjää, glykoproteiini130:tä (gp130) HUVEC-soluissa.

Substraatin jäykkyys sääteli A549-solujen ja HUVEC-solujen migraatio- ja angiogeneesipotentiaalia

Tässä Journal of Cellular Physiology -lehdessä (2017) julkaistussa tutkimusartikkelissa tutkittiin vaihtelevan alustan jäykkyyden vaikutuksia endoteelisolujen (A549- ja HUVEC-solut) migraatioon ja angiogeneesiin. He suorittivat HUVEC-migraatio- ja HUVEC-angiogeneesimääritykset näiden vaikutusten arvioimiseksi.

Kuparioksidinanohiukkasten lysosomaalinen laskeutuminen laukaisee HUVEC-solujen kuoleman

Tässä Biomaterials-lehdessä (2018) julkaistussa tutkimuksessa tutkitaan mahdollisia mekanismeja, jotka ovat vastuussa kuparioksidinanohiukkasten toksisuudesta verisuonten endoteelisoluissa.

Kversetiini estää TNF-α:n indusoimaa HUVEC-solujen apoptoosia ja tulehdusta alentamalla NF-kB- ja AP-1-signalointireittiä in vitro

Tässä Medicine-lehdessä (2020) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että luonnollinen yhdiste, kversetiini, estää TNF-alfa-välitteistä HUVEC:n apoptoosia ja tulehdusta säätelemällä AP-1- ja NF-kB-signalointireittejä.

430,00 €*

Sisältö: 1.5 milliliter

Hinnat ilman veroja ja toimituskuluja

cryovial

Tuotenumero: 300605

6. HUVEC-solulinjan resurssit: HUECVEC: Protokollien, videoiden ja muiden

Seuraavassa on muutamia HUVEC-soluista saatavilla olevia verkkolähteitä.

HUVEC-transfektio: HUVEC-transfektio: Tämä verkkosivulinkki tarjoaa kattavat tiedot HUVEC-transfektiosta. Se sisältää esimerkiksi tietoa transfektioreagensseista ja protokollan in vitro HUVEC-transfektiota varten.

Seuraava linkki sisältää HUVEC-soluviljelyprotokollan.

HUVEC-soluviljely: Tämä asiakirja auttaa sinua oppimaan HUVEC-soluviljelyprotokollat subkultivointia ja kryosäilöttyjen viljelmien käsittelyä varten.

Viitteet

Zheng, J., et al., LncRNA TTTY15 säätelee hypoksian aiheuttamaa verisuonten endoteelisolujen vaurioitumista kohdistamalla miR-186-5p: tä sydän- ja verisuonisairauksissa. European Review for Medical & Pharmacological Sciences, 2020. 24(6).
Wang, H., et al., OSCC-eksosomit säätelevät miR-210-3p:tä, joka kohdistuu EFNA3:een edistääkseen suusyövän angiogeneesiä PI3K/AKT-reitin kautta. BioMed research international, 2020. 2020.
Unal, İ. ja S. Egri, Hopean nanohiukkasten biosynteesi Rheum ribesin vesipitoisen uutteen avulla, karakterisointi ja sen myrkyllisyyden arviointi HUVECs: lle ja Artemia salina. Inorganic and Nano-Metal Chemistry, 2022: s. 1-14.