HT22-solulinja
HT22 on hiiren hermosolulinja, jota käytetään yleisesti neurotieteellisessä tutkimuksessa. Se on arvokas neurogeneratiivisten häiriöiden tutkimiseen ja mahdollisten neuroprotektiivisten hoitojen tai hoitojen testaamiseen. Lisäksi HT22-solut ovat glutamaattiherkkiä, joten niitä käytetään glutamaatin aiheuttaman myrkyllisyyden tai hermostovaurioiden tutkimiseen.
Tässä artikkelissa korostetaan HT22-solujen välttämättömiä näkökohtia, jotka voivat auttaa sinua tutkimustyössäsi. Siinä käsitellään pääasiassa seuraavia asioita:
- HT22-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä
- HT22-solulinjan viljelyä koskevat tiedot
- HT22-solulinjan edut ja haitat
- HT22-solulinjan tutkimussovellukset
- HT22-soluja sisältävät tutkimusjulkaisut
- HT22-soluja koskevat resurssit: H222222: protokollat, videot ja paljon muuta: protokollat, videot ja paljon muuta
1. HT22-solujen yleiset ominaisuudet ja alkuperä
Tässä artikkelin osassa valotetaan HT22-solujen alkuperää ja yleisiä ominaisuuksia. Näiden tietojen tunteminen solulinjasta on välttämätöntä ennen sen käsittelyn aloittamista. Tässä opit: Mitä HT22-solut ovat? Mikä on HT22-hippokampussolujen morfologia? Mikä on HT22-solujen koko?
HT22 on hiiren aivojen hippokampuksen alueelta peräisin oleva jatkuva solulinja. Se on vanhempien HT-4-solulinjan aliklooni, joka on kehitetty kuolemattomaksi muuttamalla hiiren hermosolukudoksia lämpötilaherkän polyomaviruksen simian virus 40 (SV40) T-antigeenin avulla.
Nämä solut eroavat kypsistä hippokampussoluista, koska niistä puuttuvat glutamaatti- ja kolinergiset reseptorit kuten kypsistä hippokampusperäisistä neuroneista. Näin ollen ne eivät sovellu muistiin liittyviin tutkimuksiin [1].
HT22-solut muistuttavat ulkonäöltään epiteelisoluja.
2. HT22-solulinjan viljelyä koskevat tiedot
HT22-soluja käytetään neurotieteen tutkimuslaboratorioissa. Ennen näiden solujen viljelyä tutkijat etsivät olennaisia soluviljelytietoja, jotka tekevät heidän työstään helppoa ja tehokasta. Tässä osiossa käsitellään kaikki HT22-solujen viljelyyn liittyvät keskeiset seikat. Saat tietää: Mikä on HT22-solujen kaksinkertaistumisaika? Miten HT22-soluja viljellään? Mikä on HT22-soluviljelyprotokolla? Mikä on HT22-solujen kasvatusmedia?
HT22-solujen viljelyyn liittyvät keskeiset seikat
|
Kaksinkertaistumisaika: |
HT22-solujen kaksinkertaistumisaika on noin 15 tuntia. |
|
Adheesiossa tai suspensiossa: |
HT22-solut ovat tarttuvia. |
|
Alakultivointisuhde: |
HT22-hippokampussolujen subkultivointisuhde on 1:3-1:6. Lyhyesti sanottuna väliaine poistetaan ja adheesiosolut huuhdellaan 1 x PBS:llä. Pulloon lisätään akkutaasin dissosiaatioliuos ja soluja inkuboidaan 8-10 minuuttia huoneenlämmössä. Tämän jälkeen lisätään tuoretta elatusainetta, ja solut kerätään pulloon sentrifugointia varten. Saatu solupelletti suspendoidaan huolellisesti uudelleen, ja solut annostellaan kasvatuspulloon kasvatusta varten. |
|
Kasvualusta: |
HT22-solujen viljelyyn käytetään DMEM-mediaa. Sitä täydennetään 10 % FBS:llä, 4,5 g/l glukoosilla, 4 mM L-glutamiinilla, 1,5 g/l NaHCO3:lla ja 1,0 mM natriumpyruvaatilla solujen optimaalisen kasvun varmistamiseksi. |
|
Kasvuolosuhteet: |
HT22-soluviljelmiä pidetään kostutetussa inkubaattorissa (37 °C:n lämpötilassa), jossa on 5 %CO2 . |
|
Varastointi: |
Jäädytetyt HT22-solut voidaan säilyttää alle -150 °C:n lämpötilassa joko nestemäisen typen höyryfaasissa tai erittäin alhaisen lämpötilan sähköisessä pakastimessa pitkällä aikavälillä. |
|
Pakastusprosessi ja -aine: |
HT22-solut voidaan pakastaa CM-1- tai CM-ACF-mediassa käyttäen hidasta pakastusmenetelmää. Tämä menetelmä mahdollistaa näytteen lämpötilan laskun vain 1 °C minuutissa, suojaa soluja sokilta ja auttaa säilyttämään niiden elinkelpoisuuden. |
|
Sulatusprosessi: |
Soluja sulatetaan 37 °C:n vesihauteessa 40-60 sekunnin ajan, kunnes jäljelle jää pieni jäämöhkäle. Tämän jälkeen soluihin lisätään viljelymediaa, ja ne sentrifugoidaan pakastusmedian komponenttien poistamiseksi. Solupelletti suspendoidaan uudelleen ja solut kaadetaan uuteen pulloon, joka sisältää viljelymediaa. Tämän jälkeen soluja inkuboidaan 37 °C:ssa inkubaattorissa vähintään 24 tuntia. |
|
Bioturvallisuustaso: |
HT22-solujen viljelyssä on noudatettava bioturvallisuustason 1 laboratorioasetuksia. |
3. HT22-solulinjan edut ja haitat
HT22-hippokampussoluihin liittyy joitakin etuja ja haittoja, jotka erottavat ne muista hermosolulinjoista. Tässä mainitaan joitakin solulinjan merkittäviä etuja ja haittoja.
Edut
HT22-hiiren hermosolulinjan etuja ovat:
-
Nopea kasvunopeus
HT22-solujen kaksinkertaistumisaika on 15 tuntia, mikä mahdollistaa nopeat ja tehokkaat kokeet ja auttaa saamaan ajoissa tutkimustuloksia.
-
Immortalisaatio
HT22 on immortalisoitu solulinja, joka takaa jatkuvan kasvun pitkiä aikoja. Tämä takaa solujen jatkuvan saatavuuden, vähentää aikaa ja kustannuksia sekä helpottaa pitkäaikaisia kokeita, joissa tulokset ovat johdonmukaisia.
Haitat
HT22-solujen haittoja ovat:
-
Hiiriperäinen alkuperä
HT22-solulinja on peräisin hiiren aivojen hippokampuskudoksesta, joka ei välttämättä edusta täysin ihmisen hermosolujen fysiologian ja käyttäytymisen monimutkaisuutta, mikä rajoittaa niiden translaatiorelevanssia.
4. HT22-solulinjan tutkimussovellukset
HT22-soluja käytetään laajasti neurobiologisessa tutkimuksessa. Artikkelin tässä osassa käsitellään muutamia tämän solulinjan lupaavia sovelluksia:
- Neurotieteellinen tutkimus: HT22-soluja käytetään laajalti neurodegeneratiivisten sairauksien eli Alzheimerin ja Parkinsonin taudin tutkimuksessa. Niitä pidetään arvokkaana tutkimusvälineenä näihin sairauksiin liittyvän neurotoksisuuden ja oksidatiivisen stressin mekanismien tutkimisessa. Vuonna 2020 tehdyissä tutkimuksissa havaittiin, että PI3K/AKT/CREB-reitti on mukana hyperglykemian aiheuttamassa hermomyrkyllisyydessä HT22-soluissa [2]. Vastaavasti hiljattain tehdyssä tutkimuksessa ehdotettiin, että Nrf2/HO-1-reitillä ja NF- κB-signalointiakselilla on merkittävä rooli HT22-amyloidi-beeta-toksisuudessa [3].
- Lääkkeiden seulonta: HT22-soluja käytetään laajalti lääkkeiden testaukseen ja seulontaan. Ne auttavat tutkijoita tunnistamaan mahdollisia terapeuttisia aineita, joilla on neuroprotektiivisia vaikutuksia neurodegeneratiivisten sairauksien torjumiseksi. Vuonna 2019 tehdyssä tutkimuksessa tutkittiin tetrahydrokurkumiiniyhdisteen neuroprotektiivista potentiaalia glutamaattikäsitellyissä HT22-hippokampussoluissa. Tässä tutkimuksessa glutamaatti aiheuttaa hapetusstressiä HT22-soluissa ja aiheuttaa solukuolemaa aktivoimalla mitogeeni-aktivoituja proteiinikinaaseja [4].
5. HT22-soluja sisältävät tutkimusjulkaisut
Tässä on joitakin mielenkiintoisia tutkimusjulkaisuja, joissa käytetään HT22-solulinjaa:
HT22-soluissa ja Alzheimerin tautia sairastavilla hiirillä
Tässä International Journal of Molecular Medicine -lehdessä (2019) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin Crocus sativus L:stä eristetyn yhdisteen, krosiinin, neuroprotektiivista potentiaaliaL-glutamaatinvaurioittamissaHT22-soluissa.
Tässä Neuropharmacology-lehdessä (2018) julkaistussa julkaisussa kerrottiin, että oksindolijohdannaiset suojaavat hapetusstressin aiheuttamalta HT22-solukuolemalta.
Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin Journal of Ginseng Research -lehdessä vuonna 2019. Tässä tutkimuksessa tutkittiin luonnontuotteen, ginsenosidi Rb2:n, neuroprotektiivisia vaikutuksia HT22-solulinjalla. Tutkimuksessa havaittiin, että ginsenosidi rb2 vähensi tehokkaasti glutamaatin aiheuttamaa oksidatiivista stressiä ja solukuolemaa hiiren hippokampussoluissa HT22.
Tässä Ecotoxicology and Environmental Safety -lehdessä (2021) julkaistussa tutkimuksessa arvioitiin hopean nanohiukkasten sytotoksista potentiaalia HT22-solulinjassa.
Ferrostatiini-1 suojaa HT-22-soluja oksidatiiviselta toksisuudelta
Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin vuonna 2020 Neural regeneration research -lehdessä. Siinä ehdotettiin, että ferrostatiini-1, ferroptoosin estäjä, ehkäisee hapettumisen aiheuttamaa toksisuutta HT22-hippokampussoluissa.
6. HT22-solujen resurssit: HT2222:t: protokollat, videot ja paljon muuta: protokollat, videot ja paljon muuta
Joissakin HT22-soluja koskevissa online-resursseissa selitetään niiden transfektiota, erilaistumista ja soluviljelyprotokollia:
- HT22-transfektio: Tämä asiakirja sisältää optimoidun protokollan HT22-transfektiota varten 24- ja 96-kuoppaisissa soluviljelylevyissä.
- HT22-solujen erilaistaminen: Tämä artikkeli opastaa kattavasti HT22-solujen erilaistamisprotokollasta.
Seuraava linkki sisältää HT22-soluviljelyprotokollan:
- HT22-solujen subkultivointi: Tämä linkki auttaa sinua oppimaan HT22-solulinjan subkultivointiprotokollan. Lisäksi se auttaa sinua oppimaan protokollan solujen neurotoksisuuden indusoimiseksi.
- HT22-hippokampussolut: Tämä verkkosivusto sisältää paljon hyödyllistä tietoa HT22-solujen kaksinkertaistumisajasta, väliaineista ja soluviljelyprotokollista.
Viitteet
- He, M., et al., Differentiaatio tekee alttiiksi eksitotoksisuudelle HT22-neuroneissa. Neural Regen Res, 2013. 8(14): p. 1297-306.
- Zhang, S., et al., Fisetiini estää HT22-soluja korkean glukoosin aiheuttamalta neurotoksisuudelta PI3K/Akt/CREB-signalointireitin kautta. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: p. 241.
- Zhang, R.-l., et al., Berberiinin suojaavat vaikutukset β-amyloidin aiheuttamaa neurotoksisuutta vastaan HT22-soluissa Nrf2/HO-1-reitin kautta. Bioorgaaninen kemia, 2023. 133: p. 106-210.
- Park, C.-H., et al., Tetrahydrokurkumiinin neuroprotektiiviset vaikutukset glutamaatin aiheuttamaa oksidatiivista stressiä vastaan hippokampuksen HT22-soluissa. Molecules, 2019. 25(1): p. 144.