Siirry etusivulle

HT-29-solulinja

HT-29 on ihmisen paksusuolisyövän solulinja, jolla on laaja valikoima sovelluksia syöpä- ja toksikologian tutkimuksessa. Nämä solut ovat esimerkiksi herkkiä tavanomaisille paksusuolisyövän kemoterapioille. Lisäksi HT-29-solulinja on hyvin karakterisoitu in vitro -malli suoliston epiteelin reaktion tutkimiseen bakteeri-infektiossa. HT-29-solut jäljittelevät kypsien suolistokudosten, eli enterosyyttien, ominaisuuksia, ja ovat siten sopivia kiinnittymis- ja mekanistisiin tutkimuksiin.

📋 HT-29-solulinja — Pikatietoja
Kasvatusväliaine
Katso tuotesivu
Kaksinkertaistumisaika
Katso tuotesivu
Kasvutyyppi
Adherentti
Bioturvallisuustaso
BSL-1

HT-29-solut: Alkuperä ja yleistä tietoa

Ennen solulinjan käyttöä sinun tulisi tuntea sen yleiset ominaisuudet ja alkuperä. Tässä osiossa kerrotaan: Mitä ovat HT-29-solut? Onko HT-29 kolorektaalisyövän solulinja? Millainen on HT-29-solujen morfologia?

Mikä on HT-29-solulinja? HT-29 on kolorektaalisen adenokarsinooman solulinja, jonka Trempe ja Fogh perustivat vuonna 1964. Solut on alun perin eristetty kolorektaalisen adenokarsinooman primaarikasvaimesta valkoihoisella naisella (44-vuotias) [1]. Perustamisestaan lähtien tätä solulinjaa on käytetty syöpien biologian tutkimiseen.

HT-29-solujen morfologia: HT-29-solulinjalla on yleensä epiteelin kaltainen morfologia. Eriytyneet solut kasvavat yksikerroksisina, muodostavat tiiviitä solujen välisiä liitoksia ja niillä on apikaalinen harjasreuna. Jos näitä soluja kasvatetaan glukoosipuutteisessa elatusaineessa tai niille annetaan indusoijia, kuten butyraattia tai happoa, ne osoittavat enterosyyttien kaltaisia piirteitä.

Solun koko: HT-29-kolorektaalisyöpäsolulinjan halkaisija on 11 μm.

Genomi ja ploidia: HT-29-solulinjan kromosomien modaaliluku on 71. Se voi vaihdella välillä 68–72. Lisäksi HT-29-solujen viritetty kromosomiluku on hypertriploidi, ja 2S-komponentti esiintyy 2,4 %:n osuudella.

Mikä on HT29 MTX? HT29 MTX on metotreksaattiresistentti solulinja, joka on eristetty alkuperäisestä HT-29-ihmisen paksusuolisyöpäsolulinjasta sopeuttamalla se 10 µM:n metotreksaattiin. Näillä soluilla on liman erittäviä kypsiä pikarisoluja muistuttavia ominaisuuksia.

Paksusuolisyöpäsolujen jakautuminen ja liikkuminen mikroskoopin alla.

HT-29-solulinjan viljelyohjeet

Solulinjan perusviljelyvaatimusten tunteminen voi helpottaa sen kanssa työskentelyä. Sinun tulisi tietää: mikä on HT-29-solulinjan kaksinkertaistumisaika? Mikä on HT-29-solujen kylvötiheys? Mitä viljelyalustoja HT-29-soluille käytetään?

Kaksinkertaistumisaika

HT-29-solulinjan keskimääräinen kaksinkertaistumisaika on 24 tuntia.

Adherentti/suspensio

HT-29 on adheesiivinen solulinja. 

Kylvötiheys

HT-29-soluille suositeltu kylvötiheys on 3 x 104 solua/cm2. Kasvatetut solut pestään 1X PBS:llä ja irrotetaan Accutase-inkuboinnin jälkeen 8–10 minuutin kuluttua. Lisätään tuoretta elatusainetta ja solut sentrifugoidaan. Solupelletti suspendoidaan uudelleen ja solut annostellaan uusiin pulloihin suositellulla solutiheydellä.

Kasvatusväliaine

HT-29-solujen optimaaliseen viljelyyn käytetään Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) -kasvatusliuosta, johon on lisätty 2,5 mM L-glutamiinia ja 10 % FBS:ää. Kasvatusliuos tulee vaihtaa 2–3 kertaa viikossa.

Kasvuolosuhteet

HT-29-solujen kasvatus edellyttää kostutettua inkubaattoria, jonka lämpötila on 37 °C ja CO2-pitoisuus 5 %.

Säilytys

Nämä solut säilytetään nestemäisen typen höyryvaiheessa alle -195 °C:n lämpötilassa.  

 

Jäädytysväliaine ja -prosessi

HT-29-solulinjalle käytettävä pakastusaine on CM-1 tai CM-ACF. Solut pakastetaan hitaalla pakastusprosessilla, joka aiheuttaa 1 °C:n lämpötilan laskun ja suojaa tehokkaasti solujen elinkelpoisuutta.

Sulatusprosessi

Jäädytetyt HT-29-solut sulatetaan 37 °C:n lämpötilaan asetetussa vesihauteessa. Nämä solut voidaan suspendoida uudelleen ja annostella suoraan tuoreeseen kasvualustapulloon. Toisaalta sulatetut solut voidaan sentrifugoida jäädytysaineen poistamiseksi, suspendoida uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja viljellä pulloissa.

Bioturvallisuustaso

HT-29-solulinjan käsittelyssä ja ylläpidossa käytetään bioturvallisuustasoa 1.

Ht 29 cells

HT-29-solut 10- ja 20-kertaisella suurennuksella.

HT-29-solut: Edut ja rajoitukset

Jokaisella solulinjalla on omat etunsa ja haittansa, jotka erottavat sen muista solulinjoista. Tässä osiossa käsitellään HT-29-solujen tärkeimpiä etuja ja rajoituksia.

Edut

HT-29-solujen tärkeimmät edut ovat:

  • Helppo viljellä

    HT-29-solulinja on helppo käsitellä ja ylläpitää, eikä sen viljelyyn liity monimutkaisia vaatimuksia. Sitä viljellään laajalti tutkimuslaboratorioissa.

  • Suolistokudosten in vitro -malli

    HT-29-solut voivat erilaistua kypsiksi suolistosoluiksi (enterosyytteiksi ja limaa tuottaviksi soluiksi) tietyissä viljelyolosuhteissa. Niitä käytetään solumallina ruoansulatuksen ja biologisen hyötyosuuden tutkimiseen.

  • Korkea transfektiotehokkuus

    HT-29-paksusuolisyöpäsolut tarjoavat korkean transfektiotehokkuuden, mikä tekee niistä sopivia geenien ilmentymisen ja säätelyn tutkimuksiin. Sekä väliaikaisia että pysyviä transfektiokokeita voidaan suorittaa käyttämällä erilaisia menetelmiä.

  • Lääkeherkkyys

    HT-29-solut ovat herkkiä paksusuolisyövän hoidossa yleisesti käytetyille kemoterapeuttisille lääkkeille, kuten fluorourasiilille ja oksaliplatiinille. Niitä käytetään lääkeresistenssin tutkimiseen ja potentiaalisten lääkeaineiden seulontaan kolorektaalisyövän hoidossa.

Rajoitukset

  • Heterogeenisyys

    HT-29-solut, kuten muutkin syöpäsolulinjat, ovat heterogeenisiä eivätkä välttämättä muodosta yhtenäistä solupopulaatiota. Tämä voi vaikuttaa tulosten toistettavuuteen tietyissä määrityksissä ja johtaa pieniin vaihteluihin kokeiden tuloksissa.

  • Rajoitettu erilaistuminen

    HT-29-soluilla on rajoitettu erilaistumispotentiaali. Ne eivät erilaistu täysin suoli- tai paksusuolisoluiksi, vaan niillä on vain muutamia tyypillisiä piirteitä. Tämä rajoitus voi rajoittaa niiden käyttöä monimutkaisempien biologisten prosessien tutkimuksessa.

HT-29-solut: Sovellukset

HT-29-solulinjaa viljellään laajasti tutkimuslaboratorioissa sen monipuolisten sovellusten vuoksi. Tässä osiossa käsitellään vain muutamia merkittäviä HT-29-solujen sovelluksia.

Syöpätutkimus: HT-29 on kolorektaalisen adenokarsinooman solulinja, joten sitä käytetään syövän etenemisen, kehittymisen ja taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen. Vuonna 2018 tehdyssä tutkimuksessa käytettiin HT-29-solulinjaa metastaasista vastuussa olevien solumolekyylien tutkimiseen. Tutkimuksessa havaittiin, että vimentiini- ja CXCR4-geenit säätelevät solujen metastaasien muodostumista. MikroRNA-193a-5p-mimeetin transfektio voi puolestaan vähentää näiden geenien mRNA-tasoja ja onnistuneesti vähentää syöpäsolujen metastaasien muodostumista [2].

Toksikologinen tutkimus: HT-29-solulinjaa käytetään laajasti toksikologisessa tutkimuksessa. Näitä kolorektaalisia karsinoomasoluja käytetään arvioimaan eri lääkeaineiden myrkyllisyyttä erilaisilla määrityksillä. Esimerkiksi yhdessä tutkimuksessa selvitettiin Syzygium cumini -kasvin etanoliuutteen myrkyllisyyspotentiaalia HT-29-solulinjalla. Tulokset osoittivat HT-29-solujen kasvun merkittävän hidastumisen, mikä viittaa uutteen lupaaviin syöpälääkeominaisuuksiin [3].

Mikrobiologia: HT-29:ää voidaan käyttää isäntäsolujärjestelmänä potentiaalisten mikrobien, eli bakteerien ja virusten, patogeneesin tutkimiseen. Tutkijat voivat tartuttaa HT-29-soluja mikrobeilla niiden virulenssin ja isäntävasteen tutkimiseksi. Eräässä tutkimuksessa käytettiin HT-29-soluja maitohappobakteerien probioottisten ominaisuuksien tutkimiseen [4]. Toisessa tutkimuksessa käytettiin HT-29-soluja bakteriofaagihoitojen tehokkuuden ja turvallisuuden arviointiin [5].

5. HT-29-soluja käsittelevät tutkimusjulkaisut

Tässä osiossa esitellään joitakin merkittäviä HT-29-soluja koskevia julkaisuja, jotka auttavat sinua suunnittelemaan tutkimustasi.

Syzygium cumini -etanoliuutteiden syöpälääkkeiden vaikutuksen arviointi HT-29-paksusuolisolulinjalla

Tässä tutkimuksessa ehdotettiin Syzygium cumini -etanoliuutetta potentiaaliseksi syöpälääkkeeksi kolorektaalisyöpäsolulinjaa HT-29 vastaan. Uute hillitsi merkittävästi syöpäsolujen kasvua.

Tetrandriini estää paksusuolisyövän HT-29-solujen kasvua Bcl-2/Caspase 3/PARP-reitin ja G1/S-vaiheen kautta

Tässä Bioscience Reports -julkaisussa testattiin tetrandriini-yhdisteen syöpälääkevaikutusta HT-29-soluissa. Tulokset osoittivat, että tetrandriini estää syöpäsolujen lisääntymistä ja kasvua säätelemällä solujen signalointireittejä.

mikroRNA-193a-5p estää ihmisen HT-29-paksusuolisyöpäsolujen siirtymistä estämällä metastaasireitin

Tässä tutkimuksessa esitettiin, että miRNA-193a-5p voi mahdollisesti säätää HT-29-solujen metastaaseja säätelemällä metastaaseihin liittyviä geenejä.

Bakteriofagit ovat virulentimpia ihmisen soluja sisältäville bakteereille kuin bakteeriviljelmille; havainnot HT-29-soluista

Tämä artikkeli on julkaistu Nature Scientific Reports -lehdessä vuonna 2018. Tässä tutkimuksessa käytettiin HT-29-kasvainsolulinjaa suoliston solumallina ehdotetun bakteriofaagihoidon tehokkuuden arvioimiseksi.

Laktobasillien probioottiset ominaisuudet ja niiden kyky estää enteropatogeenisten bakteerien tarttumista Caco-2- ja HT-29-soluille

Tässä tutkimuksessa tutkijat käyttivät HT-29-soluja maitohappobakteerien probioottisten vaikutusten tutkimiseen. Mielenkiintoista on, että tutkimus osoitti, että laktobasillit estävät patogeenisten bakteerien kiinnittymistä paksusuolisoluihin.

HT-29-solut Resurssit: Protokollat, videot ja muuta

Tässä osiossa käsitellään HT-29-soluista saatavilla olevia verkkoresursseja, jotka auttavat oppimaan niiden ylläpito-, viljely- ja transfektioprotokollat.

Soluviljelyprotokollat

Seuraavat resurssit opastavat sinua HT-29-solujen aliviljelyssä.

  • HT-29-solujen viljely: Tämä linkki tarjoaa perustietoa HT-29-solujen kasvualustasta, sulatuksesta ja aliviljelystä.
  • HT-29-viljelmien ylläpito: Tämä artikkeli sisältää kaikki hyödylliset tiedot HT-29-solujen viljelystä ja ylläpidosta.

Transfektioprotokollat

HT-29-solulinjalla on erinomainen transfektiotehokkuus, ja sitä käytetään usein geeniekspressiotutkimuksissa. Seuraavat lähteet kuvaavat näiden solujen mahdollisia transfektioprotokollia.

HT-29-solulinjaan liittyvät videot

Tässä on muutamia videoita tämän tuumorigeenisen solulinjan viljelystä ja ylläpidosta.

Toivomme, että tämän artikkelin tiedot ovat hyödyllisiä ja riittävät HT-29-solulinjan käsittelyyn ja ylläpitoon. Jos aiot käyttää HT-29-soluja tutkimuksessasi, tilaa ne meiltä.

Viitteet

  1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles ja I. Recio, HT29-solulinja. Elintarvikkeiden bioaktiivisten aineiden vaikutus terveyteen: in vitro- ja ex vivo -mallit, 2015: s. 113–124.
  2. Shirafkan, N. ym., mikroRNA-193a-5p estää ihmisen HT-29-paksusuolisyöpäsolujen siirtymistä tukahduttamalla metastaasireitin. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): s. 8775–8783.
  3. Khodavirdipour, A., R. Zarean ja R. Safaralizadeh, Syzygium cumini -etanoliuutteen syöpälääkinnällisen vaikutuksen arviointi HT-29-paksusuolisolulinjalla. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: s. 575–581.
  4. Fonseca, H.C. ym., Laktobasillien probioottiset ominaisuudet ja niiden kyky estää enteropatogeenisten bakteerien tarttumista Caco-2- ja HT-29-soluihin. Probiotics and antimicrobial proteins, 2021. 13: s. 102–112.
  5. Shan, J. ym., Bakteriofagit ovat virulentimpia ihmisen soluja sisältäville bakteereille kuin bakteeriviljelmille; havaintoja HT-29-soluista. Scientific reports, 2018. 8(1): s. 5091.

 

Olemme havainneet, että olet eri maassa tai käytät eri selaimen kieltä kuin tällä hetkellä valittu. Haluatko hyväksyä ehdotetut asetukset?

Sulje