HT-29-solulinja

HT-29 on ihmisen paksusuolen syöpäsolulinja, jolla on monenlaisia syöpä- ja toksikologisia tutkimussovelluksia. Nämä solut ovat esimerkiksi herkkiä tavanomaisille kemoterapeuttisille hoidoille paksusuolisyöpää vastaan. Lisäksi HT-29-solulinja on hyvin karakterisoitu in vitro -malli, jolla tutkitaan suoliston epiteelin vastetta bakteeri-infektiolle. HT-29-solut jäljittelevät kypsien suolistosolujen eli enterosyyttien ominaisuuksia, joten ne soveltuvat kiinnittymis- ja mekanistisiin tutkimuksiin.

Tässä artikkelissa käsitellään kaikkia HT-29-solulinjan näkökohtia, jotka sinun on tiedettävä ennen sen kanssa työskentelyä. Pääasiassa se sisältää:

HT-29-solut: Alkuperää ja yleisiä tietoja
HT-29-solulinjan soluviljelytiedot
HT-29-solut: -29-29-29-29: edut ja rajoitukset
HT-29-solut: Sovellukset
HT-29-soluja koskevat tutkimusjulkaisut
HT-29-solut Resurssit: 29-29-29-29 -menetelmät: Protokollia, videoita ja muuta

1. HT-29-solut: -29-29: Alkuperä ja yleistä tietoa

Ennen kuin käytät mitä tahansa solulinjaa, sinun tulisi tietää solulinjan yleiset ominaisuudet ja alkuperä. Tämä osio auttaa sinua oppimaan: Mitä HT-29-solut ovat? Onko HT-29 paksusuolen syöpäsolulinja? Mikä on HT-29-solujen morfologia?

Mikä on HT-29-solulinja? HT-29 on Trempen ja Foghin vuonna 1964 perustama paksusuolen adenokarsinooma-solulinja. Solut johdettiin alun perin paksusuolen adenokarsinoomaa sairastavan 44-vuotiaan valkoihoisen naisen primaarikasvaimesta [1]. Perustamisestaan lähtien tätä solulinjaa on käytetty syövän biologian tutkimiseen.

HT-29-solujen morfologia: HT-29-solulinjalla on yleensä epiteelin kaltainen morfologia. Erilaistuneet solut kasvavat monikerroksina, muodostavat tiiviitä solu-soluliittymiä ja niillä on apikaalinen harjasraja. Jos näitä soluja kasvatetaan glukoosipuutteisessa elatusaineessa tai niille annetaan induktoreita, kuten butyraattia tai happoa, niillä on enterosyyttien kaltaisia piirteitä.

Solujen koko: HT-29-kolorektaalisyöpäsolulinjan halkaisija on 11 μm.

Genomi ja ploidia: HT-29-solulinjan kromosomien modaaliluku on 71. Se voi vaihdella välillä 68-72. Lisäksi HT-29-solujen virtaviivainen kromosomimäärä on hyper-triploidinen, ja 2S-komponenttia esiintyy 2,4 prosenttia.

Mikä on HT29 MTX? HT29 MTX on metotreksaattiresistentti solulinja, joka on eristetty alkuperäisestä HT-29 ihmisen paksusuolisyövän solulinjasta mukauttamalla se 10 µM metotreksaattiin. Näillä soluilla on limakalvoja erittävien kypsien ruokatorvisolujen ominaisuuksia.

Paksusuolen syöpäsolujen jakautuminen ja liikkuminen mikroskoopilla.

2. HT-29-solulinjan soluviljelytiedot

Kun tiedät solulinjan perusviljelyvaatimukset, voit helpottaa työskentelyäsi sen kanssa. Sinun tulisi tietää: Mikä on HT-29-solulinjan kaksinkertaistumisaika? Mikä on HT-29-solujen kylvötiheys? Mitä väliaineita HT-29-soluille tarvitaan?

Kaksinkertaistumisaika	HT-29-solulinjan keskimääräinen kaksinkertaistumisaika on 24 tuntia.
Tarttuva/suspensio	HT-29 on adherentti solulinja.
Kylvötiheys	HT-29-solujen suositeltava kylvötiheys on 3 x¹⁰⁴ ^solua/cm2. Kasvatetut solut pestään 1 X PBS:llä ja irrotetaan sen jälkeen, kun niitä on inkuboitu Accutaasilla 8-10 minuuttia. Lisätään tuoretta elatusainetta ja solut sentrifugoidaan. Solupelletti suspendoidaan uudelleen, ja solut annostellaan uusiin pulloihin suositellulla solutiheydellä.
Kasvualusta	HT-29-solujen optimaaliseen viljelyyn käytetään Eagle's Minimum Essential Mediumia (EMEM), jota on täydennetty 2,5 mM L-glutamiinilla ja 10 % FBS:llä. Väliaine on vaihdettava 2-3 kertaa viikossa.
Kasvuolosuhteet	HT-29-solut vaativat kasvuun kostutetun inkubaattorin, jossa lämpötila on 37 °C ja_{hiilidioksidipitoisuus} 5 %.
Säilytys	Nämä solut säilytetään nestemäisen typen höyryfaasissa alle -195 °C:ssa.
Jäädytysaine ja -prosessi	HT-29-solulinjan jäädytysalusta on CM-1 tai CM-ACF. Solut jäädytetään hitaalla jäädytysprosessilla, joka aiheuttaa 1 °C:n lämpötilan laskun ja suojaa tehokkaasti solujen elinkelpoisuutta.
Sulatusprosessi	Pakastetut HT-29-solut sulatetaan 37 °C:n lämpötilaan säädetyssä vesihauteessa. Solut voidaan resuspendoida ja annostella suoraan tuoreeseen kasvualustapulloon. Sitä vastoin sulatetut solut voidaan sentrifugoida pakastusmediumin elementtien poistamiseksi, suspendoida uudelleen tuoreeseen mediumiin ja viljellä pulloissa.
Bioturvallisuustaso	HT-29-solulinjan käsittelyssä ja ylläpidossa käytetään bioturvallisuustasoa 1.

HT-29-solut 10x ja 20x suurennoksella.

3. HT-29-solut: 29-29: Edut ja rajoitukset

Jokaisella solulinjalla on ainutlaatuisia etuja ja haittoja, jotka erottavat sen muista solulinjoista. Tässä jaksossa käsitellään HT-29-soluihin liittyviä tärkeimpiä etuja ja rajoituksia.

Edut

HT-29-solujen tärkeimmät edut ovat:

Helppo viljellä
HT-29-solulinjaa on helppo käsitellä ja ylläpitää, eikä sen viljelyyn liity monimutkaisia vaatimuksia. Sitä viljellään laajalti tutkimuslaboratorioissa.
Suolistosolujen in vitro -malli
HT-29-solut voivat erilaistua kypsiksi suolistosoluiksi (enterosyytit ja limaa tuottavat solut) tietyissä viljelyolosuhteissa. Niitä käytetään solumallina ruoansulatuksen ja biologisen hyötyosuuden tutkimiseen.
Korkea transfektiotehokkuus
HT-29-paksusuolisyöpäsolujen transfektiotehokkuus on korkea, joten ne soveltuvat geeniekspression ja säätelyn tutkimiseen. Sekä ohimeneviä että stabiileja transfektiokokeita voidaan tehdä eri menetelmiä käyttäen.
Herkkyys lääkkeille
HT-29-solut ovat herkkiä kemoterapeuttisille lääkkeille, kuten fluorourasiilille ja oksaliplatiinille, joita käytetään yleisesti paksusuolisyövän hoidossa. Niitä käytetään lääkeresistenssin tutkimiseen ja mahdollisten terapeuttisten lääkkeiden seulontaan paksu- ja peräsuolen karsinooman hoitoon.

Rajoitukset

Heterogeenisuus
HT-29-solut, kuten muutkin syöpäsolulinjat, ovat heterogeenisiä eivätkä välttämättä muodosta yhtenäistä solupopulaatiota. Tämä voi vaikuttaa tulosten toistettavuuteen tietyissä määrityksissä ja johtaa pieniin vaihteluihin kokeellisissa tuloksissa.
Rajoitettu erilaistuminen
HT-29-soluilla on rajallinen erilaistumispotentiaali. Ne eivät erilaistu täysin suolisto- tai paksusuolisoluiksi, vaan niillä on vain muutamia ominaispiirteitä. Tämä rajoitus saattaa rajoittaa niiden käyttöä monimutkaisempien biologisten prosessien tutkimisessa.

4. hT-29-solut: HT-29-29: sovellukset

HT-29-solulinjaa viljellään laajalti tutkimuslaboratorioissa sen monipuolisten sovellusten vuoksi. Tässä jaksossa käsitellään vain muutamia HT-29-solujen merkittäviä sovelluksia.

Syöpätutkimus: HT-29 on paksusuolen adenokarsinooman solulinja, joten sitä käytetään syövän etenemisen, kehityksen ja taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen. Vuonna 2018 tehdyssä tutkimuksessa HT-29-solulinjaa käytettiin metastaasista vastaavien solumolekyylien tutkimiseen. Tässä tutkimuksessa havaittiin, että vimentiini- ja CXCR4-geenit säätelevät solun etäpesäkkeitä. Kun taas mikroRNA-193a-5p:n jäljittelijän transfektoiminen voi vähentää näiden geenien mRNA-tasoja ja vähentää menestyksekkäästi syöpäsolujen metastaasia [2].

Toksikologinen tutkimus: HT-29-solulinjaa käytetään laajasti toksikologisessa tutkimuksessa. Näitä kolorektaalikarsinoomasoluja käytetään erilaisten lääkeainekandidaattien toksisuuden arvioimiseen erilaisilla määrityksillä. Esimerkiksi eräässä tutkimuksessa tutkittiin Syzygium cumini -kasvin etanolisen uutteen toksisuuspotentiaalia HT-29-solulinjassa. Tulokset osoittivat, että HT-29-solujen kasvu estyy merkittävästi, mikä viittaa uutteen lupaaviin syövänvastaisiin ominaisuuksiin [3].

Mikrobiologia: HT-29:tä voidaan käyttää isäntäsolujärjestelmänä mahdollisten mikrobien eli bakteerien ja virusten patogeneesin tutkimiseen. Tutkijat voivat infektoida HT-29-soluja mikrobeilla tutkiakseen niiden virulenssia ja isäntävastetta. Tällaisessa tutkimuksessa käytettiin HT-29-soluja maitohappobakteerien probioottisten ominaisuuksien tutkimiseen [4]. Toisessa tutkimuksessa käytettiin HT-29-soluja bakteriofagihoitojen tehokkuuden ja turvallisuuden arviointiin [5].

430,00 €*

Sisältö: 1.5 milliliter

Hinnat ilman veroja ja toimituskuluja

cryovial

Tuotenumero: 300215

5. HT-29-soluja koskevat tutkimusjulkaisut

Tässä osiossa kerrotaan eräistä HT-29-soluja koskevista merkittävistä julkaisuista, jotka auttavat sinua suunnittelemaan tutkimustasi.

Syzygium cumini etanolisen uutteen syövänvastaisen vaikutuksen arviointi HT-29 paksusuolisolulinjassa

Tässä tutkimuksessa ehdotettiin Syzygium cumini -etanoliuutetta potentiaaliseksi syövänvastaiseksi aineeksi kolorektaalisyöpäsolulinjaa HT-29 vastaan. Ote tukahdutti merkittävästi syöpäsolujen kasvua.

Tetrandriini estää paksusuolen syöpäsolujen HT-29-solujen kasvua Bcl-2/Caspase 3/PARP-reitin ja G1/S-vaiheen kautta

Tässä Bioscience Reports -julkaisussa testattiin yhdisteen, tetradriinin, syöpää ehkäisevää vaikutusta HT-29-soluihin. Tulokset osoittivat, että tetradriini estää syöpäsolujen lisääntymistä ja kasvua säätelemällä solujen signaalireittejä.

microRNA-193a-5p estää ihmisen HT-29-paksusuolisyöpäsolujen migraatiota metastaasireitin tukahduttamisen kautta

Tässä tutkimuksessa ehdotettiin, että miRNA-193a-5p voi mahdollisesti säädellä HT-29-solujen metastaasiaa säätelemällä metastaasiin liittyviä geenejä.

Bakteriofagit ovat virulentimpia bakteereille ihmissoluilla kuin bakteeriviljelyssä; oivalluksia HT-29-soluista

Tämä artikkeli on julkaistu Nature Scientific Reports -lehdessä vuonna 2018. Tässä tutkimuksessa käytettiin HT-29-tuumorigeenistä solulinjaa suoliston solumallina ehdotetun bakteriofagihoidon tehokkuuden arvioimiseksi.

Laktobasillien probioottiset ominaisuudet ja niiden kyky estää enteropatogeenisten bakteerien tarttumista Caco-2- ja HT-29-soluihin

Tässä tutkimuksessa tutkijat käyttivät HT-29-soluja tutkiakseen maitohappobakteerien probioottisia vaikutuksia. Mielenkiintoista oli, että tutkimus osoitti maitohappobakteerien estävän patogeenisten bakteerien tarttumista paksusuolen soluihin.

6. HT-29-solut Resurssit: H-29-29-29: Protokollia, videoita ja muuta

Tässä osiossa käsitellään joitakin HT-29-soluista saatavilla olevia verkkolähteitä, jotka auttavat oppimaan niiden ylläpito-, viljely- ja transfektioprotokollia.

Soluviljelyprotokollat

Seuraavat resurssit opastavat sinua HT-29-solujen osaviljelyssä.

HT-29-solujen viljely: Tämä linkki antaa perustiedot HT-29-solujen kasvualustasta, sulattamisesta ja subkulturoinnista.
HT-29-soluviljelmien ylläpito: Tämä artikkeli sisältää kaikki hyödylliset tiedot HT-29-solujen viljelystä ja ylläpidosta.

Transfektioprotokollat

HT-29-solulinjalla on suuri transfektiotehokkuus, ja sitä käytetään usein geeniekspressiotutkimuksissa. Seuraavissa lähteissä kuvataan mahdollisia transfektioprotokollia näille soluille.

HT-29:n transfektointi: Tämä verkkosivulinkki sisältää yksityiskohtaisen protokollan HT-29-solujen transfektiota varten.
HT-29-solulinjan transfektio: Tässä asiakirjassa kuvataan HT-29-solulinjan transfektioprotokolla plasmidi-DNA:lla.

HT-29-solulinjaan liittyvät videot

Tässä on joitakin videoita tämän tumorigeenisen solulinjan viljelystä ja ylläpidosta.

Solujen kuljettaminen: Tässä videossa esitetään solujen passage-protokolla adheesiosolulinjoille.
HT-29-solujen transfektointi: Tämä video opastaa sinua HT-29-solujen transfektiomenetelmästä.

Odotamme, että tässä artikkelissa olevat tiedot ovat arvokkaita ja riittäviä sinulle HT-29-solulinjojen käsittelyssä ja ylläpidossa. Jos aiot käyttää HT-29-soluja tutkimuksessasi, tilaa meiltä.

Viitteet

Martínez-Maqueda, D., B. Miralles ja I. Recio, HT29-solulinja. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: s. 113-124.
Shirafkan, N., et al., microRNA-193a-5p estää ihmisen HT-29-paksusuolen syöpäsolujen migraatiota metastaasireitin tukahduttamisen kautta. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
Khodavirdipour, A., R. Zarean ja R. Safaralizadeh, Syzygium cumini etanolisen uutteen syövänvastaisen vaikutuksen arviointi HT-29 paksusuolen solulinjassa. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
Fonseca, H.C., et al., Laktobasillien probioottiset ominaisuudet ja niiden kyky estää enteropatogeenisten bakteerien tarttumista Caco-2- ja HT-29-soluihin. Probiootit ja antimikrobiset proteiinit, 2021. 13: p. 102-112.
Shan, J., et al., Bakteriofagit ovat virulentimpia bakteereille ihmissoluilla kuin bakteeriviljelyssä; insights from HT-29 cells. Tieteelliset raportit, 2018. 8(1): p. 5091.