HL-60-solut: Akuutti myelooinen leukemia Research Essentials

HL-60 on kuolematon ihmisen leukemiasolulinja. Sitä käytetään laajalti syövän biologian tutkimiseen ja syöpälääkkeiden tehon tutkimiseen. Lisäksi sitä voidaan käyttää myös ymmärtämään erilaisia solu- ja molekyylimekanismeja, jotka liittyvät leukemiasolujen proliferaatioon ja erilaistumiseen.

HL-60-solulinja: HL-60-60: alkuperä ja yleisiä tietoja

HL-60-solulinja on keskeinen malli hematologisessa tutkimuksessa, ja se tarjoaa syvällistä tietoa akuutin promyelosyyttisen leukemian luonteesta ja hoidosta. Tässä blogikirjoituksessa perehdytään HL-60-solulinjan alkuperään ja erityispiirteisiin ja valotetaan sen ratkaisevaa roolia lääketieteellisessä tutkimuksessa ja terapeuttisessa kehityksessä.

HL-60 luotiin ensimmäisen kerran 36-vuotiaan valkoihoisen naisen leukemiasoluista, jolla oli diagnosoitu akuutti promyelosyyttinen leukemia. Tämän uraauurtavan työn teki S.J. Collins työryhmänsä kanssa, ja se merkitsi merkittävää läpimurtoa, sillä HL-60 oli ensimmäinen myelooinen leukemiasolulinja, joka onnistuttiin eristämään ja viljelemään suspensiossa. Tämä saavutus on helpottanut lukuisia tutkimusmahdollisuuksia leukemian ja muiden siihen liittyvien sairauksien tutkimisessa. Fyysisiltä ominaisuuksiltaan HL-60-soluilla on lymfoblastinen morfologia, ja niiden tiedetään kasvavan suspensiossa ja olevan muodoltaan pyöreitä. Näiden solujen koko vaihtelee, ja niiden läpimitta vaihtelee 9-25 μm, mikä kuvastaa niiden heterogeenisuutta. Genomitasolla HL-60-solulinja on pääasiassa pseudodiploidi, ja sen modaalinen kromosomimäärä on 43. Mielenkiintoista on, että pieni prosenttiosuus (6,2 %) soluista osoittaa 2S-komponenttia, mikä lisää niiden geneettisen rakenteen monimutkaisuutta [1].

Näiden HL-60-solujen perustavanlaatuisten näkökohtien ymmärtäminen ei ainoastaan lisää tietämystämme leukemiasta solutasolla, vaan tukee myös meneillään olevia tutkimustoimia uusien hoitomuotojen löytämiseksi. Seuraavissa jaksoissa selvitetään, miten HL-60-solulinjan ainutlaatuiset ominaisuudet ovat edistäneet merkittävää edistystä lääketieteellisessä tutkimuksessa.

Yksisoluista leukemiakudosta mikroskoopilla.

HL-60-soluviljelyä koskevat tiedot

HL-60-solujen viljely on yksinkertaista ja helppoa. Tässä osiossa tutustutaan perusasioihin, kuten Mikä on HL-60-solulinjan kaksinkertaistumisaika? Onko HL-60 soluviljely adheesioviljelyä vai suspensioviljelyä? Mikä on HL-60-solulinjan kylvötiheys? Mitä väliaineita käytetään HL-60:n kasvattamiseen?

Kaksinkertaistumisaika:	HL-60-solujen kaksinkertaistumisaika on noin 36-48 tuntia.
Tarttuva vai suspensio:	HL-60-solut kasvavat suspensioviljelminä.
Kylvötiheys:	Nämä solut kylvetään tiheydellä 1 x¹⁰⁶ solua/ml, kun niitä viljellään edelleen, ja tiheydellä 2 x¹⁰⁵ solua/ml, kun uusi viljelmä aloitetaan.
Kasvualusta:	HL-60-solujen viljelyyn käytetään RPMI 1640 -kasvualustaa, johon on lisätty 10 % FBS:ää ja 2,5 mM L-glutamiinia. Kasvualusta on uusittava 2-3 kertaa viikossa.
Kasvuolosuhteet:	HL-60-soluja kasvatetaan kostutetussa inkubaattorissa 37 °C:n lämpötilassa ja 5 %:n_{hiilidioksidipitoisuudessa}.
Varastointi:	HL-60-solut säilytetään alle -150 °C:n lämpötilassa tai nestemäisen typen höyryfaasissa, jotta mahdollisimman moni solu säilyy elinkelpoisena.
Jäädytysmedium ja -prosessi:	HL-60-solujen jäädyttämiseen käytetään CM-1- tai CM-ACF-pakastusmediaa. HL-60-solujen jäädyttämisessä käytetään mieluiten hidasta jäädytysmenetelmää.
Sulatusprosessi:	Jäädytettyä HL-60-solupulloa sekoitetaan nopeasti vesihauteessa, joka on asetettu 37 °C:n lämpötilaan. Tämän jälkeen solut sentrifugoidaan pakastusmedian poistamiseksi. Lisätään uusi kasvatusmedia ja solut suspendoidaan uudelleen, jotta ne voidaan annostella pulloon kasvattamista varten.
Bioturvallisuustaso:	HL-60-viljelmien käsittelyyn suositellaan bioturvallisuustasoa 1.

HL-60-suspensiosolut 10x ja 20x suurennoksella.

HL-60-solut: HL-60-60: Edut ja haitat

Ennen kuin työskentelet minkä tahansa solulinjan kanssa, haluat ehkä tietää sen edut ja haitat. Tässä artikkelin osassa käsitellään muutamia HL-60-solujen käytön etuja ja haittoja.

Edut

HL-60-solulinjan muutamia merkittäviä etuja ovat:

Monipuolisuus: HL-60-soluilla on kyky erilaistua useiksi solutyypeiksi, kuten monosyyteiksi, makrofageiksi ja granulosyyteiksi, sopivissa kasvuolosuhteissa. Tämä tekee niistä hyödyllisiä solujen erilaistumisen ja muiden soluprosessien tutkimisessa
Helppo viljellä: HL-60-soluja on helppo kasvattaa ja ylläpitää suspensioviljelmissä, mikä tekee niistä kätevän välineen useiden soluprosessien tutkimiseen
Leukemian in vitro -malli: Nämä solut on saatu akuuttia myelooista leukemiaa sairastavalta potilaalta, joten niiden geneettiset ja molekyyliset ominaisuudet muistuttavat tautia

Haitat

HL-60-solulinjan haittoja ovat:

Rajoitettu erilaistumispotentiaali: HL-60-solut voivat erilaistua joihinkin myelooisiin linjoihin ärsykkeiden vaikutuksesta, mutta niiden erilaistumispotentiaali on rajallinen verrattuna primaarisoluihin.

HL-60-solulinjan sovellukset tutkimuksessa: H-60-60-60-60:n tutkimukset: Syöpätaudit, immunologia ja muu

HL-60-solulinjasta, joka on peräisin akuuttia promyelosyyttistä leukemiaa sairastavalta potilaalta, on tullut lääketieteellisen tutkimuksen kulmakivi sen monipuolisuuden ja helppoviljelyisyyden ansiosta. Nämä vähän huoltoa vaativat viljelmät ovat keskeisessä asemassa lukemattomissa tutkimussovelluksissa, ja pyrimme tutkimaan joitakin merkittävimpiä niistä sisällyttämällä laaja valikoima tutkimuksen avainsanoja kattavan yleiskatsauksen tarjoamiseksi.

Syöpätutkimus

Syöpätutkimuksen alalla HL-60-solulinja on auttanut ratkaisemaan syöpäsolujen signaalinvälityksen monimutkaisuutta, edistänyt onkogeenien ilmentymisen ymmärtämistä ja edistänyt uusien terapeuttisten kohteiden löytämistä. Tämä solulinja on osa leukemiasolulinjapaneelia, jota käytetään uusien kemoterapeuttisten aineiden seulontaan. Eräs koskettava esimerkki on HL-60-solujen käyttö merieliöistä saatujen yhdisteiden leukemian vastaisten ominaisuuksien selvittämiseksi, jolloin havaittiin sekä antiproliferatiivisia että pro-apoptoottisia vaikutuksia [2]. Lisäksi solulinja on helpottanut keskeisten signaalireittien, kuten JAK/STAT:n, ja niiden vaikutuksen tutkimista leukemiasolujen proliferaatioon sekä tymokinonin kaltaisten bioaktiivisten yhdisteiden terapeuttisten lupausten arviointia [3].

Immunologia

HL-60-solut ovat vankka in vitro -järjestelmä erilaisten immuunivasteiden tutkimiseen, mukaan lukien monimutkainen kemotaksisprosessi ja keskeisten immuunivälittäjäaineiden ilmentymisen säätely. Nämä solut voivat erilaistua makrofagien ja neutrofiilien kaltaisiksi myelooisiksi soluiksi, mikä toimii monipuolisena mallina tulehdusreittien tutkimiseen. Esimerkiksi HL-60-alkuisia makrofagien kaltaisia soluja käytettiin Brassica-suvun fytokemikaalien tulehdusta ehkäisevän potentiaalin tutkimiseen [4]. Toisessa tutkimuksessa HL-60-solujen erilaistaminen neutrofiilien kaltaisiksi soluiksi antoi tutkijoille mahdollisuuden tunnistaa solujen erilaistumisen ja siihen liittyvien immuunitoimintojen kannalta keskeisiä geenejä [5].

Lääkkeiden löytäminen

HL-60-solujen myelooisia erilaistumiskykyjä on hyödynnetty myös lääketutkimuksessa, erityisesti sellaisten ehdokkaiden tunnistamisessa, jotka voisivat mahdollisesti muokata erilaistumisreittiä, joka on ratkaisevan tärkeä leukemian hoidossa. Tästä ovat esimerkkinä tutkimukset, joissa HL-60-solulinjaa on käytetty arvioitaessa luonnontuotteiden syöpälääkkeiden potentiaalia [6].

Lisäksi HL-60-solulinjaa käytetään myelooisten solulinjojen biologian eri näkökohtien tutkimiseen, kuten sen ymmärtämiseen, miten hoito retinohapon kaltaisilla aineilla voi johtaa monosyyttiseen erilaistumiseen tai miten nämä solut jäljittelevät primaarisia neutrofiilejä solunulkoisia ansoja tuottaessaan. Mallin käyttöä hematologisten pahanlaatuisten sairauksien molekyylitapahtumien selvittämisessä laajennetaan edelleen soveltamalla sitä mutaatiosolupaneelitutkimuksissa, erityisesti leukemian p53-hotspot-analyysin yhteydessä.

Solulinja tarjoaa luotettavan tutkimusalustan niille, jotka tutkivat HL-60:n solumekaniikkaa, kaksinkertaistumisaikaa ja vastetta elektroporaatioon mikrofluidisissa kanavissa.

HL-60-solulinja tutkimusta varten

430,00 €*

Sisältö: 1.5 milliliter

Hinnat ilman veroja ja toimituskuluja

cryovial

Tuotenumero: 300209

HL-60-solut: HL-60-60-60: Tutkimusjulkaisut

HL-60-soluista on saatavilla useita tutkimuksia. Tässä on lueteltu joitakin merkittäviä esimerkkejä:

Dendronephthya giganteasta saatavan Stigmast-5-en-3-olin apoptoottiset ja antiproliferatiiviset vaikutukset ihmisen leukemia HL-60- ja rintasyöpä MCF-7-soluihin

Tässä tutkimusartikkelissa ehdotettiin yhdisteen, Stigmast-5-en-3-olin, kasvainvastaista vaikutusta HL-60-leukemiasoluihin ja MCF7-rintasyöpäsoluihin.

Tymokinoni estää HL60-leukemiasolujen solujen solujen lisääntymistä ja tehostaa niiden apoptoosia JAK/STAT-negatiivisten säätelijöiden uudelleen ilmentymisen kautta

Tässä tutkimuksessa kuvataan JAK/STAT-signaloinnin merkitystä HL-60-solujen proliferaatiossa. Lisäksi tutkijat tutkivat timokinoniyhdisteen terapeuttista potentiaalia käyttäen tätä leukemiasolulinjaa. Yhdiste estää solujen lisääntymistä ja aiheuttaa solukuoleman elvyttämällä JAK/STAT-kaskadin negatiivisten säätelijöiden ilmentymistä.

Analyysi Brassican bioaktiivisten yhdisteiden anti-inflammatorisesta potentiaalista ihmisen makrofagin kaltaisessa solumallissa, joka on johdettu HL-60-soluista

Tässä tutkimuksessa käytettiin HL-60-soluja makrofagin kaltaisen solumallin johtamiseksi Brassica-kasviyhdisteiden tulehdusta ehkäisevän vaikutuksen tutkimisesta.

ERK osallistuu dimetyylisulfoksidin indusoimien HL-60 neutrofiilien kaltaisten solujen, jotka jäljittelevät tulehduksellisia neutrofiilejä, erilaistumiseen ja toimintaan

Tässä International Immunopharmacology -lehdessä julkaistussa tutkimuksessa kehitettiin HL-60-solulinjasta neutrofiilisoluja jäljitteleviä soluja käyttämällä dimetyylisulfoksidia. Tutkimuksessa havaittiin, että ERK-geeni osallistuu näiden solujen erilaistumiseen.

Valikoitujen kasvipolyfenolien, gallushapon ja ellagiinihapon, kasvainvastainen vaikutus herkkiin ja moniresistentteihin HL60-leukemiasoluihin

Tässä tutkimuksessa tutkitaan kasvipolyfenoliyhdisteiden eli gallushapon ja ellagiinihapon syöpää ehkäisevää vaikutusta lääkkeille herkkiin ja resistentteihin HL-60-leukemiasoluihin.

HL-60-solulinja Resurssit: HL-60-60-60-60:n resurssit: Protokollia, videoita ja muuta

HL-60-solulinjasta on saatavilla useita verkossa olevia koulutusresursseja. Tässä osiossa käsitellään muutamia resursseja, joissa kuvataan tämän solulinjan viljelyä ja transfektiota.

Soluviljelyprotokollat

HL-60-solujen viljelymenetelmiä kuvaavat resurssit ovat seuraavat:

HL-60-solujen lisääminen: Tässä asiakirjassa annetaan tietoa HL-60-solujen osaviljelystä.
HL-60-solulinja: Tämä verkkosivusto sisältää perustiedot HL-60-soluista ja -protokollista, mukaan lukien solujen viljely, jäädyttäminen ja sulattaminen.

Transfektioprotokollat

Tässä on joitakin resursseja, joissa kuvataan HL-60-soluille valittuja transfektiomenetelmiä.

HL-60-solujen transfektio: Tässä linkissä on yksityiskohtainen HL-60-leukemiasolujen transfektiomenetelmä.
HL-60-solujen ohimenevä transfektio: Tässä asiakirjassa on hyödyllistä tietoa solulinjasta ja yksityiskohtainen protokolla HL-60-solujen ohimenevää transfektiota varten.

HL-60-solulinjaan liittyvät videot

HL-60-soluja koskevia videoresursseja on hyvin vähän.

HL-60-solujen kuljettaminen: Tässä videossa selitetään HL-60-solujen subkultivointiprotokolla.

Odotamme tämän artikkelin antavan sinulle perustiedot HL-60-solulinjan viljelystä ja ylläpidosta. Lisäksi se voi lisätä tietämystäsi näiden leukemiasolujen käytön eduista tutkimuksessa. Jos aiot käyttää tätä solulinjaa, tilaa meiltä.

HL-60-solulinja: HL-60-60-60: Olennaiset usein kysytyt kysymykset tutkijoille

Viitteet

Fleck, R., S. Romero-Steiner ja M. Nahm, HL-60-solulinjan käyttö pneumokokkivasta-aineiden opsonisen kapasiteetin mittaamiseen. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): p. 19-27.
Fernando, I.S., et al., Dendronephthya giganteasta peräisin olevan Stigmast-5-en-3-olin apoptoottiset ja antiproliferatiiviset vaikutukset ihmisen leukemian HL-60- ja ihmisen rintasyövän MCF-7-soluihin. Toxicology in Vitro, 2018. 52: p. 297-305.
Almajali, B., et al., Thymoquinone suppresses cell proliferation and enhances apoptosis of HL60 leukemia cells through re-expression of JAK/STAT negative regulators. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): p. 879.
Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., Analyysi Brassican bioaktiivisten yhdisteiden anti-inflammatorisesta potentiaalista ihmisen makrofagin kaltaisessa solumallissa, joka on johdettu HL-60-soluista. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: p. 112804.
Wang, D., et al., ERK osallistuu dimetyylisulfoksidin indusoimien HL-60 neutrofiilien kaltaisten solujen, jotka jäljittelevät tulehduksellisia neutrofiilejä, erilaistumiseen ja toimintaan. International Immunopharmacology, 2020. 84: p. 106510.
Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Anti-Leukemic Activity of Brassica-Derived Bioactive Compounds in HL-60 Myeloid Leukemia Cells. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): p. 13400.