DU-145-solut - Tutkijan kattava opas
DU-145 on ihmisen eturauhaskarsinooman solulinja, jota käytetään laajasti biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Nämä solut toimivat korvaamattomana mallina eturauhassyövän biologian, lääketestauksen ja -kehityksen tutkimisessa. Lisäksi tutkijat käyttävät DU-145-soluja eturauhassyövän kehittymisen, kasvun ja etenemisen taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen.
Tämä artikkeli antaa sinulle arvokasta tietoa DU-145-eturauhassyöpäsoluista. Erityisesti se kattaa:
- DU-145-solulinjan yleistiedot ja alkuperä
- DU-145-solujen viljely
- DU-145-solulinja: DU1545-14545: edut ja rajoitukset
- DU-145-solujen tutkimussovellukset
- DU-145-soluja sisältävät tutkimusjulkaisut
- DU-145-solulinjan resurssit: DU4545-145: protokollat, videot ja muut
1. Yleistä tietoa DU-145-solulinjasta ja sen alkuperästä
Solulinjan perusominaisuuksien ja alkuperän ymmärtäminen on olennaista ennen sen kanssa työskentelyn aloittamista. Tässä osassa annetaan kattava käsitys DU-145-solulinjan ominaisuuksista ja alkuperästä. Saat tietää: Mitä DU145-syöpäsolut ovat? Mikä on DU145-solujen morfologia? Mikä ero on PC-3:n ja DU145:n välillä?
- DU-145 on ihmisen eturauhassyöpäsolulinja, joka on peräisin metastaattista eturauhassyöpää sairastavan kaukasialaisen miehen (69-vuotias) aivoista. K.R. Stone ja kollegat tallettivat nämä solut ensimmäisen kerran vuonna 1978.
- Kuten PC-3-eturauhassyöpäsolut, myös DU-145 ilmentää androgeenireseptoreita. Kun näille soluille annetaan androgeeniligandihoitoa, ne eivät kuitenkaan osoita androgeenireseptoriin reagoivien geenien aktiivisuutta, joten niitä pidetään androgeeniriippumattomina soluina.
- DU-145-soluilla on epiteelimorfologia.
- DU-145-solut ovat hypotriploideja, ja niiden modaalinen kromosomimäärä on 64. Niillä on useita merkkikromosomeja, kuten del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) ja del (9) (p11).
PC-3 Vs. DU145
Molemmat eturauhassyöpäsolulinjat ovat androgeenireseptori-riippumattomia. Ne eroavat toisistaan tuumorigeenisen ja metastaattisen potentiaalinsa suhteen. Kun PC-3-solulinja ruiskutetaan immuunipuutteiseen hiireen, se muodostaa erittäin metastaattisen IV asteen adenokarsinooman. DU-145-solulinjasta sen sijaan kehittyy eturauhassyöpä, jolla on kohtalainen metastaattinen potentiaali [1].
2. dU-145-solujen viljely
DU-145-solulinjaa käytetään laajalti eturauhassyövän tutkimuslaboratorioissa. Sinun tulisi oppia seuraavat keskeiset seikat, jotta sen viljely olisi helppoa ja tehokasta. Tämä jakso sisältää tietoja DU145-mediasta, kaksinkertaistumisajasta, soluviljelyolosuhteista ja pöytäkirjoista.
DU-145-solujen viljelyä koskevat keskeiset seikat
|
Populaation kaksinkertaistumisaika: |
DU-145-solujen kaksinkertaistumisaika on 30-40 tuntia. |
|
Adheesiossa tai suspensiossa: |
DU-145 on tarttuva solulinja. |
|
Kylvötiheys: |
DU-145-solut kylvetään suositellulla solutiheydellä 2 x104 solua/cm2. Tällä tiheydellä solut muodostavat konfluentin monokerroksen lähes 4 päivässä. Kylvöä varten solut pestään 1 x fosfaattipuskurisuolaliuoksella ja inkuboidaan Accutase-passage-liuoksella. Kun soluja on inkuboitu 8-10 minuuttia huoneenlämmössä, ne lisätään tuoreeseen elatusaineeseen ja sentrifugoidaan. Kerätty solupelletti suspendoidaan huolellisesti uudelleen, ja solut kaadetaan uusiin kasvatuspulloihin kasvua varten. |
|
Kasvualusta: |
EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium), jossa on väliaineen lisäaineita, eli 10 % naudan sikiöseerumia (FBS), 2 mM L-glutamiinia, 2,2 g/l NaHCO3 ja EBSS. Väliaine uusitaan 2-3 kertaa viikossa. |
|
Kasvuolosuhteet: |
DU-145-viljelmiä pidetään 37 °C:n kostutetussa inkubaattorissa, jossa on 5 %:n hiilidioksidilähde. |
|
Varastointi: |
DU-145-solut säilytetään nestemäisen typen höyryfaasissa tai alle -150 °C:n lämpötilassa sähköisessä pakastimessa solujen elinkelpoisuuden säilyttämiseksi pidempään. |
|
Pakastusprosessi ja väliaine: |
DU-145-eturauhassyöpäsoluille suositellaan CM-1- tai CM-ACF-pakastusmediaa. Solujen jäädyttämiseen valitaan hidas jäädytysmenetelmä, jossa lämpötila laskee asteittain 1 °C:n verran. Näin estetään solujen sokki ja autetaan säilyttämään niiden elinkelpoisuus. |
|
Sulatusprosessi: |
Pakastetut DU-145-solupullot sulatetaan nopeasti 37 °C:n vesihauteessa 40-60 sekunnin ajan. Tämän jälkeen soluihin lisätään elatusainetta ja ne sentrifugoidaan pakastusmedian komponenttien poistamiseksi. Kerätyt solut suspendoidaan uudelleen kasvualustaan ja kaadetaan kolviin kasvua varten. Pakastuksen palautuminen kestää lähes 24 tuntia. |
|
Bioturvallisuustaso: |
DU145-androgeenireseptori-riippumattoman solulinjan viljelyyn tarvitaan bioturvallisuustaso 1 -asetukset. |
3. dU-145-solulinja: Perimä: edut ja rajoitukset
Muiden solulinjojen tavoin eturauhassyöpäsolulinjaan DU-145 liittyy joitakin etuja ja haittoja. Nämä ominaisuudet voivat auttaa sinua päättämään sen käytöstä tutkimuksessasi. DU-145-solulinjan tärkeimmät edut ja haitat mainitaan jäljempänä.
Edut
DU-145-solujen etuja ovat:
|
Tumorigeenisyys |
DU-145 on aggressiivinen tumorigeeninen eturauhassyöpäsolulinja, jolla on kohtalainen metastaattinen potentiaali. Käytetään DU145-ksenotransplanttimallin kehittämiseen immuunipuutteisissa hiirissä eturauhassyövän biologian, kehityksen ja kasvun tutkimiseksi in vitro ja in vivo. |
|
Androgeenireseptori-riippumattomuus |
DU-145-eturauhassyöpäsolut ovat androgeenireseptori-riippumattomia. Ne eivät ole riippuvaisia androgeeneista kasvussaan, eikä niillä ole vastetta solu- tai molekyylitasolla, kun niitä hoidetaan androgeeneilla. Ihanteellinen hormoniriippumattomien eturauhassyöpämekanismien tutkimiseen. |
Rajoitukset
DU-145-solulinjan rajoitukset ovat seuraavat:
|
In vitro -malli |
DU-145 on metastaattisen eturauhaskarsinooman in vitro -solumalli, joten se ei välttämättä edusta täysin primaaristen eturauhaskasvainten monimutkaisuutta. Lisäksi se ei välttämättä edusta kaikkia eturauhassyöpätyyppejä ja alatyyppejä erityispiirteiden, kuten androgeenireseptori-riippumattomuuden, vuoksi. |
4. dU-145-solujen tutkimussovellukset
DU-145-eturauhassyöpäsolulinjalla on monenlaisia tutkimussovelluksia. Tässä luetellaan muutamia lupaavia sovelluksia.
- Eturauhassyövän biologia: DU-145 on merkityksellinen malli eturauhassyövän biologian tutkimiseen. Tutkijat käyttävät näitä soluja tutkiakseen syövän kehittymistä, etenemistä ja etäpesäkkeitä ohjaavia molekyylimekanismeja. Lisäksi tutkitaan eturauhassyöpään yleisesti liittyviä geneettisiä muutoksia. Vuonna 2021 tehdyissä tutkimuksissa tutkittiin DU-145-soluja mahdollisten biomarkkerien tunnistamiseksi, jotta niillä olisi tehokkaita diagnostisia ja terapeuttisia vaikutuksia. Tutkimuksessa ehdotettiin aktiini gamma 1:tä (ACTG1) potentiaaliseksi eturauhassyövän biomarkkeriksi, koska se edistää syöpäsolujen lisääntymistä ja säätelee etäpesäkkeitä MAPK/ERK-reitin aktivoitumisen kautta [2].
- Lääkkeiden seulonta ja kehittäminen: DU-145-eturauhassyöpäsoluja käytetään laajalti mahdollisten syöpälääkkeiden sytotoksisuuden ja tehokkuuden testaamiseen. Tämä auttaa tutkijoita tunnistamaan uusia lääkkeitä, ymmärtämään lääkeresistenssiä ja sen taustalla olevia molekyylimekanismeja. Vuonna 2022 tehdyssä tutkimuksessa tutkittiin hartsiseoksen, propoliksen tai mehiläisliiman, sytotoksista vaikutusta eturauhassyöpäsolulinjoissa PC-3 ja DU-145. Tutkimus osoitti tämän luonnollisen aineen kasvua estäviä vaikutuksia molemmissa solulinjoissa ja ehdotti sen syöpää ehkäisevää potentiaalia [3]. Vuonna 2019 tehtiin toinen tutkimus, jossa tutkittiin luonnollisen yhdisteen, betaiinin, kasvua estäviä vaikutuksia DU-145-eturauhassyöpäsoluissa. Tutkimus osoitti, että betaiini vaikuttaa antiproliferatiivisesti nostamalla oksidatiivisen stressin välittämää solukuolemaa ja tulehdusta DU-145-soluissa [4].
5.dU-145-soluja sisältävät tutkimusjulkaisut
Seuraavassa on joitakin DU-145-solulinjaa koskevia tutkimusjulkaisuja.
Tässä Biological Trace Element Research, 2020 -lehdessä julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että sinkkisulfaatti (ZnSo4) aiheuttaa antiproliferatiivisia vaikutuksia DU-145-soluissa indusoimalla apoptoosia, morfologisia muutoksia, oksidatiivisia vaurioita ja tulehdusta.
Tämä tutkimusartikkeli julkaistiin BMC Complementary Medicine and Therapies -lehdessä vuonna 2020. Tässä tutkimuksessa selvitettiin kasvin, Annona muricata L. kuoriuutteen ja sen bioaktiivisen annonasiinin sytotoksista ja metastaattista potentiaalia DU-145-solulinjassa.
Tässä IUBMB Life -lehdessä (2019) julkaistussa julkaisussa ehdotettiin, että pitkä ei-koodaamaton RNA LOXL1-AS1 vuorovaikutus miR-let-7a-5p:n ja EGFR-reitin kanssa säätelee doksorubisiiniresistenssiä DU-145-eturauhassyöpäsoluissa.
Tässä Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry -lehdessä (2020) julkaistussa artikkelissa todettiin, että Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) -geenin alaregulaatio aiheuttaa DU-145-solujen kuoleman ja estää epiteelistä mesenkyymiin siirtymisen (EMT) aktivoimalla Pyk2/MKK7-reitin.
Tässä Journal of Food Biochemistry -lehdessä (2019) julkaistussa tutkimuksessa ehdotettiin, että kastisiini, polymetoksiflavoni, estää DU-145-solujen migraatiota ja invasiota säätelemällä Ras/Akt/NF-κB-signalointia.
6. dU-145-solulinjan resurssit: DU4545-145: protokollat, videot ja paljon muuta
DU-145-eturauhassyöpäsolulinjasta on saatavilla monia verkkolähteitä. Tässä jaksossa mainitaan muutamia resursseja, joissa selitetään näiden solujen käsittelyä, ylläpitoa ja transfektioprotokollaa:
- DU-145-transfektio: DU-145-solujen transfektioprotokollan oppiminen: Tämä video-opas on vaiheittainen opas DU-145-solujen transfektioprotokollan oppimiseen.
DU-145-solujen viljelyprotokolla mainitaan tässä.
- DU-145-solujen subkultivointi: Tämä linkki auttaa sinua oppimaan DU-145-solujen subkulturointiin tai subkultivointiin liittyvän protokollan.
- DU-145-solut: Tällä verkkosivustolla on runsaasti hyödyllistä tietoa DU-145-solulinjasta, mukaan lukien DU145-solualusta, subkulturointiprotokolla sekä proliferatiivisten ja kryosäilytettyjen viljelmien käsittely.
Viitteet
- Lima, A.R., et al., Discrimination between the human prostate normal and cancer cell exometabolome by GC-MS. Tieteelliset raportit, 2018. 8(1): p. 5539.
- Xiao, L., et al., ACTG1:n ilmentymisen hiljentäminen indusoi eturauhassyövän epiteelin ja mesenkymaalisen siirtymän MAPK/ERK-signalointireitin kautta. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
- Gogacz, M., et al., Kylmäerotusmenetelmällä saatujen propolis-uutteiden syöpää ehkäisevät vaikutukset PC-3- ja DU-145-eturauhassyöpäsolulinjoihin. Molecules, 2022. 27(23): p. 8245.
- Kar, F., et al., Betaiini estää solujen lisääntymistä lisäämällä oksidatiivisen stressin välittämää apoptoosia ja tulehdusta DU-145-ihmisen eturauhassyöpäsolulinjassa. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.